部分豬場哺乳仔豬腹瀉流行病學調查

李濤 屈平平 孫霞 王志遠

（山東畜牧獸醫職業學院 261061）

1 試驗材料

1.1 檢測樣品來源

110 份病料樣品均來自30 個豬場不同批次的發病哺乳仔豬。

1.2 試劑與儀器

普通營養瓊脂、伊紅美藍瓊脂、麥康凱瓊脂、LB 肉湯培養基，北京陸橋技術有限責任公司生產；革蘭氏染色液，杭州濱和微生物試劑有限公司生產；微量生化發酵管及配套試劑，青島海博生物技術有限公司生產；SK-1 快速渦勻器，中外合資深圳天南海北有限公司生產；PCR 儀、電泳儀、Gel Doc XR 凝膠成像系統，BIO-RAD 公司生產；BS-210S 型電子分析天平，北京賽多利斯天平有限公司生產；BHC-1300ⅡA/B3 型生物潔凈安全柜，蘇州潔凈設備有限公司生產；PYX-DHS-X 型隔水式電熱恒溫培養箱，上海市躍進醫療器械廠生產；可調微量移液器，德國Eppendorf 公司生產；高壓蒸汽滅菌器，日本Panasonic 公司生產。

2 試驗方法

2.1 病料中細菌的分離培養鑒定

2.1.1 細菌分離培養

取采集的病料樣品，在鮮血瓊脂、伊紅美藍或麥康凱平板上進行分區劃線，倒置于37℃恒溫箱培養18～24h 后，挑取疑似單個菌落，于普通瓊脂平板上分區劃線進行純培養，倒置放于37℃恒溫箱，培養18～24h 后，將平板放置于4℃中保存，待用[1-2]。

2.1.2 革蘭氏染色鏡檢

取潔凈的玻片在火焰上反復通過幾次，用接種環挑取1～2環生理鹽水，用接種環挑取純培養的菌落邊緣少許細菌，與玻片上的生理鹽水混勻，涂抹均勻，自然干燥，火焰固定。按常規步驟進行染色，油鏡觀察待檢菌的形態、大小、顏色、排列方式[3-4]。

2.1.3 生化鑒定

對分離的細菌進行生化實驗，用青島海博革蘭氏陰性細菌鑒定系統進行21 項生化實驗，并把生化反應的結果轉換為一個8 進制數，通過提供的標準數據庫查詢系統可得到實驗菌株歸屬的相對概率、T 值和R 值，對菌株的歸屬進行鑒定[5-6]。

將細菌各項生化反應結果填入附贈的記錄卡中，依次每3項為一組，若這3 項反應均為陽性，則分別記為1、2、4，若為陰性，則相應項記為0。將每組3 項的數值相加，共7 組，組成一個7 位數。將所得7 位數輸入數據庫系統中即可進行查詢。使用前，所有試劑（21±3） ℃放置直至達到此溫度。打開包裝，取出微孔板。

2.2 病料中病毒的PCR 檢測

取病死豬的脾、肺、淋巴結、扁桃體、腸及內容物等用生理鹽水按照1∶5 比例勻漿，反復凍融3 次以便于病原釋放，提取核酸及PCR 檢測[7]。

2.3 寄生蟲的檢測

將發病的哺乳仔豬剖檢，取其腸道及內容物，置于干凈的載玻片上，滴加適量生理鹽水，蓋上蓋玻片，分別用顯微鏡的低倍鏡、高倍鏡和油鏡觀察是否有寄生蟲的存在[8]。

3 試驗結果

3.1 病料中細菌的檢測結果

細菌引起的哺乳仔豬腹瀉檢出率為11.82%，其中主要是大腸桿菌感染引起的仔豬黃白痢，魏氏梭菌感染引起的仔豬紅痢也有發生，見圖1～2，表1。豬黃痢是新生仔豬的一種急性致死性較高的傳染病，常發生于出生后7d 之內，又名早發性大腸桿菌病。仔豬白痢，常發生于10～30 日齡，又稱遲發性大腸桿菌病，病程較短，長的1 周左右，有的仔豬能自行康復，病死率低。仔豬紅痢又名仔豬傳染性壞死性腸炎，仔豬腸毒血癥，主要發生于1 周齡以內的新生仔豬，以排出紅色帶血的稀便為特征。本病發生快，病程短，病死率高。

圖1 大腸桿菌

圖2 魏氏梭菌

表1 病料中細菌的檢測結果

3.2 病料中病毒PCR 檢測結果

病毒引起的哺乳仔豬腹瀉檢出率為88.18%，主要有豬瘟病毒、豬偽狂犬病毒、豬流行性腹瀉病毒和豬傳染性胃腸炎病毒，其中豬流行性腹瀉病毒感染率最高，豬傳染性胃腸炎病毒感染率較低，參見圖3，表2。

圖3 部分病料病毒的PCR 擴增結果

表2 病料中病毒PCR 檢測結果

3.3 病料中寄生蟲的檢測結果

寄生蟲引起的哺乳仔豬腹瀉檢出率為15.45%，主要有球蟲、小袋纖毛蟲和滴蟲。豬小袋纖毛蟲病是由結腸小袋蟲寄生于豬大腸，導致患豬出現腹瀉癥狀的一種人畜共患原蟲病，一般呈陰性感染。當仔豬感染傳染性胃腸炎、豬瘟、沙門氏菌病時，腸黏膜發生炎癥反應，蟲體隨即侵襲到黏膜內大量繁殖，導致潰瘍性結腸炎，而發生腹瀉，參見圖4～5，表3。

圖4 豬等孢球蟲

圖5 經瑞氏-吉姆薩染色的小袋纖毛蟲

表3 病料中寄生蟲的檢測結果

4 綜合防控措施的制定

4.1 細菌性腹瀉

進行藥敏試驗，選擇最敏感的抗菌素。大腸桿菌性腹瀉，從藥敏試驗中篩選氯霉素類、氨基糖苷類、頭孢類等抗生素藥物進行治療，梭菌性腸炎選擇青霉素類、頭孢類抗生素進行治療[9]。

4.2 病毒性腹瀉

綜合防控，防止繼發感染，降低死亡率。哺乳仔豬的病毒性腹瀉沒有特效藥物可以治療，主要通過加強飼養管理和疫苗預防來防控。對癥療法、口服微生態制劑，通過藥敏試驗選用敏感抗菌素等防止繼發感染，可以降低哺乳仔豬病毒性腹瀉的死亡率。對豬輪狀病毒病，在盡早喂給足量初乳后，用母乳喂養，使用口服補液鹽可防止脫水，補充養分；對傳染性胃腸炎和流行性腹瀉，給予口服補液鹽[10]。

4.3 寄生蟲性腹瀉

驅蟲是重點，球蟲性腸炎可內服氨丙啉或磺胺二甲基嘧啶治療[11]。

5 結論

根據對哺乳仔豬腹瀉原因的傳染性因素調查結果可以發現，傳染性因素方面主要集中在豬瘟、流行性腹瀉、偽狂犬、傳染性胃腸炎、仔豬黃白痢等幾種疾病，陽性率分別達到25.45%、33.64%、20.91%、8.18%、10.91%，這幾種疾病仍然是引起哺乳仔豬腹瀉的主要疾病。

但不可忽視的是，一些以前發生較少的寄生蟲病在這次檢測過程中有所上升，如小袋纖毛蟲的檢出率達到了8.18%，豬毛滴蟲也檢出了2 例，而且這些寄生蟲很多情況下是繼發于病毒性傳染病，加重了仔豬腹瀉的程度，造成更高的死亡率和更大的損失。

上述調查和檢測結果提示，養殖場的技術人員要關注疾病發生和流行的動態，抓好飼養管理，預防老病新發與新流行疾病對養殖場造成的危害。