保健食品中非法添加降糖藥物的測定方法

路亞靜

基本情況

保健食品現狀。近年來，“綠色食品”理念的提倡和發展，越來越多的人開始重視身體健康和飲食安全，一些以調節血壓、血糖平衡為銷售理念的“保健食品”隨著人們健康意識的提高而越來越暢銷，由于保健品市場火爆，市場競爭力大，一些商家為了提高服用效果和銷售口碑，向保健食品中非法添加藥物類成分，以此獲得消費者的青睞。這種做法既不符合法律規定，又對消費者身體造成損害，對保健食品中非法成分的測定成為阻止違規保健食品流向市場的關鍵。

保健食品中非法添加降糖藥物情況。根據目前的保健食品測定研究，常見的非法添加的降糖藥物主要有磺酰脲類、胰島素增敏劑、促胰島素分泌劑和雙胍類藥物，以格列本脲、二甲雙胍等居多，由于價格低廉且見效迅速，服用添加此類藥物的保健食品后，服用者血糖情況在短期內得到有效控制，但長期服用，極易導致藥物依賴，在服用者不知情的情況下不當容易出現中毒現象。如今市場流通的保健食品種類繁多，為了防止降糖藥物成分被檢測出又不斷更新添加種類和配方，為非法添加的檢測工作增加了難度。

檢測方法

檢測方法的選擇。在此研究前，作者查閱了大量的檢測技術的文獻，與中成藥物相比，保健食品非法添加的檢測較為容易，保健食品制作工藝細致，產品基質較為穩定，其雜質的含量較小，對檢測結果的干擾也小，這更利于檢測方法的選擇，不同檢測方法造成的數據偏差也相對較小。文獻中最為常用的方法是色譜法，多以薄層色譜（TLC）和高效液相色譜（HPLC）為主。HPLC以液體為流動相，在高壓的作用下，液體快速流經色譜柱，受到的阻力比固態流動相小得多，檢測速度得到提升，具有高效、準確的特點，且可以重復使用，樣本不容易破壞，又克服了薄層色譜的假陽性問題，既可以定性分析，又可以定量測定，在實際檢測時十分常用。近年來，高效液相色譜與質譜聯用，衍生出HPLC- MS法，該方法具有HPLC的高分離能力，又具有質譜的靈敏性，采用離子檢測器代替了二極管陣列檢測器，克服了分離不徹底的問題，使得色譜法測定的結果更加準確，但該方法對檢測者的操作要求較高，且檢測儀器價格不菲，并沒有十分普及。

樣本提取。除了檢測方法，樣本的處理和保存也對檢測結果有一定的影響。樣本的提取是檢測程序中關鍵的一個步驟，實驗室常用液液萃取、超聲萃取、固相萃取，由于液液萃取耗時長、消耗大，超聲萃取普適性低，降糖類添加藥物的測定最為常用的提取方法是固相萃取法。固相萃取利用選擇性吸附的原理，減少了液液萃取的溶劑消耗，提高了回收率，更加適合少量添加降糖藥物的保健食品的檢測。

測定方法。根據作者的檢測經歷，對非法添加降糖藥物的測定主要采用固相萃取聯合HPLC檢測法。市面上比較常見的非法添加降糖藥物有格列吡嗪、格列本脲、格列齊特、格列喹酮、瑞格列奈、二甲雙胍、苯乙雙胍等。由于不明確保健食品的添加成分，在檢測時需要進行多項成分的色譜分析，如何在減少進樣的前提下盡量多的檢測藥物成分的種類，是目前探討保健食品添加劑檢測的重點。作者以以上7種藥物為例進行分析，7種目標成分的離子化能力不同，根據其強弱分組進樣，利用陽離子固相萃取凈化。二甲雙胍和苯乙雙胍的水溶性較強，凈化實驗中，使用不同體積比的甲醇-鹽酸（0.1mol/L）溶液對7種藥物樣本進行凈化，二甲雙胍和苯乙雙胍不能洗脫出來，而甲醇-鹽酸體積比在50：50時，格列吡嗪已有少量流出，為了達到更好的凈化效果，對樣品的凈化應選用體積比40：60的甲醇-鹽酸（0.1mol/ L）溶液。磺酰脲類藥物在堿性溶液中的溶解度較大，選用甲醇-氨水溶液作為非雙胍類藥物的洗脫液，在不同體積比的洗脫實驗中，60：40的甲醇-氨水（5%）溶液可將二甲雙胍部分洗脫，而在體積比20：80的比例下，磺酰脲類藥物就已經開始洗脫，在50：50的體積比下，磺酰脲類藥物可完全洗脫，因而，選用50：50體積分數的甲醇-氨水（5%）溶液對格列齊特、格列喹酮、格列本脲、割裂吡嗪、瑞格列奈進行洗脫。雙胍類藥物本身是堿性，不宜使用甲醇-氨水溶液作為洗脫液，應使用強堿性溶液作為洗脫液，研究表明，在0.35mol/ L的氫氧化鈉溶液中，雙胍類藥物洗脫效果較好，因而，選擇60：40比例的甲醇-氫氧化鈉（0.35mol/L）作為雙胍類藥物的洗脫液。

討論

對于保健食品降糖藥物的測定，主要做好兩方面的問題，一是測定方法的選擇，二是樣本的凈化和處理，選用HPLC即能確保測定結果的準確性，避免假陽性，又有價格優勢，而在HPLC中，如何選擇最佳成分的凈化和洗脫液，也是測定的關鍵。因常見的降糖藥在酸堿度和水溶性上差異較大，經過長期的經驗積累和實驗，在同一色譜條件下，對樣本進行不同洗脫液分次測定最能夠保證測定結果。