miRNA-21在宮頸癌患者組織中的表達及其與臨床病理特征的關系

李新 董立新

【摘要】目的：探討宮頸癌患者miRNA-21組織表達情況及其同臨床病理特征的聯系。方法：選取41例宮頸癌病患為研究對象，取得患者腫瘤組織及臨近非腫瘤組織標本，采用定量PCR分析的方式，測定樣品中miR-21-3P、miR-21-5P表達情況及同患者臨床病理特征的聯系。結果：同臨近非腫瘤組織對比，宮頸癌組織樣本中的miR-21-3P、miR-21-5P水平表達高（P<0.05）;宮頸癌病患中miRNA-21表達病理因素包括腫瘤大小及淋巴結轉移。結論：宮頸癌病患中，miRNA-21表達明顯上調，且與腫瘤大小及淋巴結轉移，因此可將miRNA-21作為檢測宮頸癌患者預后的重要標志物。

【關鍵詞】miRNA-21;宮頸癌;臨床病理特征

【中圖分類號】R181.3+2【文獻標志碼】A【文章編號】1005-0019（2019）02-075-02

宮頸癌是女性群體中常見的惡性腫瘤疾病，疾病的發生同乳頭狀瘤病毒的感染存在密切的聯系[1]。從關于宮頸癌的研究中我們可發現，患者機體中的染色體發生突變以及單核苷酸多態性會引起宮頸上皮細胞惡性病變，而借助小RNAs（miRNA）這一調節基因可判定宮頸癌的具體病變情況。在宮頸癌患者中，miRNA-21表達明顯更高，針對這一情況，很多的學者認為miRNA-21對宮頸癌發生及發展有促進作用[2]。本次研究中，探討了宮頸癌患者組織中的miRNA-21表達情況，并探討其與宮頸癌患者臨床病理特征間的關系，旨在為宮頸癌患者的早期診治提供依據和重要幫助。

1資料與方法

1.1一般資料

選取本院2017年3月-2018年6月收治的41例宮頸癌病患為研究對象，所有患者均行手術切除，且術前均未行放化療。41例患者年齡范圍在35～71歲之間，平均年齡54.3歲;腫瘤大小2～6cm，平均大小3.5cm。在術中均采集患者腫瘤病灶及鄰近的非腫瘤組織標本，將采集到的標本放置到液氮中進行保存。

1.2方法

1.2.1進行RNA提取

用Trizol試劑提取腫瘤組織和臨近非腫瘤組織樣品的RNA，同時借助紫外分光光度計對組織器官中的miRNAs的含量與純度進行測定。

1.2.2RNA逆轉錄及定量PCR檢測

采用逆轉錄法、定量PCR檢測獲取對的宮頸癌樣本及臨近非腫瘤組織中的miRNA表達情況，具體miRNA測定內容包括miR-21-3P及miR-21-5P。應用miR-21-3P、miR-21-5P下游引物轉錄，各轉錄體系中均含有500ng的RNA產物。定量PCR檢測中，檢測反應條件是在95℃的溫箱中預變性10min、95℃變性10s、60℃變性30s，持持續40個循環時間[3]。各個樣品重復三孔，之后應用定量PCR儀行定量擴增。針對擴增的產物，借助溶解曲線鑒定產物的特異性，鑒定的溫度設定為60℃～95℃，應用U6、RNA作為參照評估標準，評定基因的表達情況，對miRNA-21、U6擴增Ct比值進行計算。

針對miRNA-21的表達水平，應用△Ct、2-△△Ct分析，△Ct計算樣品Ct值同內參Ct值的差值，具體的計算公式為△Ct=CtmiRNA-CtU6;△△Ct的計算公式為：△△Ct=△Ct腫瘤樣品-△Ct臨近非腫瘤樣品。針對本研究所選RQ，計算公式為：RQ=2-△Ct，這主要顯示miRNA在腫瘤組織與臨近非腫瘤組織的比值大小，若計算出RQ的值小于1提示腫瘤組織中的miRNA表達下降，反之升高。

1.3統計學方法

使用SPSS 20.0軟件做統計學分析，計量資料用t檢驗，P<0.05為差異顯著。

2結果

2.1miRNA表達的定量測定

41例樣品中測得38例miRNA-21高表達，宮頸癌標本同臨近非腫瘤組織標本的表達差異顯著（P<0.05），見表1。

2.2miRNA-21同宮頸癌病理學特征的關系

對病患的一般資料進行分析，顯示宮頸癌患者的miRNA-21表達情況腫瘤大小、淋巴結轉移有顯著聯系，而與患者年齡、腫瘤分化情況無明顯聯系。

3討論

宮頸癌是臨床中常見的惡性腫瘤疾病，而在最近幾年的臨床研究中發現，miRNA常常作為原癌基因或抑癌基因參與腫瘤的發生發展。而關于miRNA同宮頸癌間的關系，多個研究提示可將miRNA作為診斷及治療疾病的重要標志產物。

為了進一步的了解miRNA-21在診治宮頸癌中的價值，在本次研究中，應用定量PCR檢測宮頸癌病患中miR-21-3P和miR-21-5P的表達情況，同時對miRNA-21的表達水平進行分析，探討其與患者臨床病理特征的關系。本研究中采集了宮頸癌病患腫瘤組織及非腫瘤組織的樣本進行檢測，結果顯示腫瘤組織樣本中miR-21-3P、miR-21-5P顯著高表達，通過進一步對患者病理學特征進行分析，提示腫瘤組織中miRNA-21高表達同腫瘤大小、淋巴結轉移有密切的聯系，這一結果同韓英等[6]的研究結果相一致。

綜上所述，在宮頸癌患者腫瘤組織中miRNA-21的表達明顯上調，且其表達情況同腫瘤大小、淋巴結轉移狀況有著緊密聯系，提示臨床中可以將miRNA-21作為評價宮頸癌患者診治和預后的重要標志物。

參考文獻

[1]楊朝暉， 章輝， 顧華敏， 等. 宮頸癌組織中miR-21和Stat3的表達及相關性研究[J]. 浙江醫學， 2017， 39（2）：93-96.

[2]趙芳， 王靜， 余建軍， 等. microRNA表達與乳腺癌患者臨床特征的關系[J]. 中國腫瘤， 2016， 25（12）：1013-1017.

[3]王佳佳. microRNA-21、microRNA-205在非小細胞肺癌中的表達及臨床意義[D]. 中國科學院心理研究所， 2012.

[4]沈蓉， 高建武， 李妍雨，等. 宮頸癌組織中miRNA-21含量檢測及其下游靶分子的初步分析[J]. 海南醫學院學報， 2015， 21（11）：1536-1538.

[5]馮磊， 常春紅， 管曉卿， 等. 宮頸癌患者血漿miRNA-10b的表達及其臨床意義[J]. 現代檢驗醫學雜志， 2018，23（1）.

[6]韓英， 張蓉， 俞丹華， 等. miRNA-21在子宮頸鱗癌組織中表達的初步研究[J]. 中國婦產科臨床雜志， 2015，14（2）：179-180.