核酸與血清學聯合檢測在輸血前感染指標篩查中的應用

郭基平，袁暉蓉

1 萬載縣人民醫院 （江西宜春 336100）；2 萬載縣中醫院 （江西宜春 336100）

輸血療法是臨床常用的救治手段，患者所輸入的血液主要來源于無償獻血者，因此獻血者的血液質量將直接影響救治效果[1]。由于肝炎、艾滋病及梅毒等傳染病均可經血液傳播，因此輸血治療存在一定的感染風險[2]。輸血后發生感染的危險因素包括獻血管理不當、交叉感染等。臨床主要通過核酸與血清學檢測進行傳染病的篩查，以盡可能減少輸血感染，且兩者聯合檢測可明顯提高診斷準確度[3]。本研究重點分析核酸與血清學聯合檢測在輸血前感染指標篩查中的應用價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年1—12月萬載縣人民醫院的4 163份無償獻血血液標本作為研究樣本，其中男2 106例，女2 057例；年齡21～50歲，平均（34.13±3.49）歲。本研究經萬載縣人民醫院醫學倫理委員會批準，且無償獻血者對本研究均知情，并簽署知情同意書。

1.2 方法

所有樣本均接受核酸與血清學檢測，包括乙型肝炎病毒（HBV）、乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、谷丙轉氨酶（ALT）、梅毒螺旋抗體（抗-TP）、丙型肝炎病毒抗體（抗-HCV）、人類免疫缺陷病毒抗體（抗-HIV），其中血清學指標通過酶聯免疫吸附法檢測。HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP均使用廈門英科新創科技公司以及北京萬泰生物藥物股份公司試劑進行檢測：若兩種試劑均存在反應性，則提示雙試劑陽性；若一種試劑存在反應性則通過該試劑雙孔復試，結果為單孔反應性或雙孔均有反應性提示單試劑陽性；若兩種試劑均未出現反應性則為陰性。通過速率法對ALT進行檢測，50 U/L及以上為不合格。核酸檢測前需使用EDTA-K2抗凝BD管進行離心，再對HIV RNA、HCV RNA以及HBV DNA進行三聯6混樣核酸檢測：若混樣無反應性則為6樣本陰性，有反應性則為樣本混樣陽性；再予以單人份拆分檢測，無反應性為陰性，有反應性為陽性。

1.3 臨床評價

記錄核酸與血清學檢測結果陽性符合率。

2 結果

2.1 血清學與核酸檢測結果

在4 163份標本中，不合格標本占1.23%（51/4 163）；其中，雙試劑反應性占0.12%（5/4 163），單試劑反應性占0.10%（4/4 163），抗-TP不合格標本占0.24%（10/4 163），ALT不合格標本占0.07%（3/4 163）；在不合格標本中，除抗-TP、ALT不合格之外的其余標本，核酸與血清學檢測結果均為有反應性占31.58%（12/38），血清學無反應性然而核酸檢測存在反應性占13.16%（5/38），血清學檢測有反應性而核酸檢測無反應占55.26%（21/38）。

2.2 核酸與血清學檢測陽性結果符合情況

在4 163份標本中，血清學檢測陽性占0.79%（33/4 163），其中雙試劑陽性占45.45%（15/33），單試劑陽性占54.55%（18/33）。在15份雙試劑陽性樣本中，HBV陽性11份，核酸檢測陽性結果符合率為72.73%（8/11）；HCV陽性3份，核酸檢測陽性結果符合率為66.67%（2/3）；HIV陽性1份，核酸檢測陽性結果符合率為100.00%（1/1）。在18份單試劑陽性樣本中，HBV陽性3份，核酸檢測陽性結果符合率為33.33%（1/3）；HCV陽性12份，核酸檢測陽性結果符合率為0.00%；HIV陽性3份，核酸檢測陽性結果符合率為0.00%。在血清學陰性樣本中，核酸檢測陽性占0.12%（5/4 130），且均為HBV DNA陽性。

3 討論

輸血治療對于失血過多的患者具有重要的治療價值，可挽救急危重癥患者的生命。輸血治療是一項具有高專業性要求的醫療救治措施，同時具有高風險性，因此在臨床操作時必須嚴格監管血源質量，以避免傳染病經血液傳播[4]。預防、減少輸血后傳染病的發生不僅需要醫療機構的強化管理，還需要社會各界的積極參與，尤其需要醫務工作者增強預防輸血感染的意識，做好篩查工作。

實驗室檢查多通過血清學檢測輸血前感染指標，但該檢測方法存在“窗口期”較長、靈敏度低等缺點，且難以檢出變異病毒、靜默感染病毒以及病毒亞型。近年來，隨著輸血治療群體的不斷擴大，血源性傳播感染病例逐漸增加，臨床對輸血前感染指標的篩查工作愈加重視。核酸檢測因其具有較高的靈敏度及特異度，可明顯縮短檢測病毒的“窗口期”，有利于發現部分隱匿的病毒感染，而逐漸成為至關重要的血清學檢測輔助手段。本研究結果顯示，不合格血液標本確有存在；在血清學雙試劑陽性樣本中，血清學檢測與HBV或者HCV核酸檢測陽性結果間均存在一定差異，與HIV核酸檢測陽性結果完全符合；單試劑陽性樣本中，血清學檢測與HBV核酸檢測陽性結果的符合率較低，與HCV、HIV核酸檢測陽性結果不符；在血清學陰性樣本中，經核酸檢測發現HBV DNA陽性。這說明，核酸與血清學檢測在輸血前感染指標篩查中存在一定差異，將兩者聯合應用可改善篩查結果，提升輸血的安全性。

核酸與血清學檢測存在如下互補性。（1）血清學的檢測對象為抗原、抗體，在病原體侵襲機體后，機體做出免疫應答需要一段“窗口期”；而核酸的檢測對象為病原體核酸，能夠縮短“窗口期”，減少漏檢；同時，血清學檢測又可避免核酸檢測受病原體間歇現象影響而導致的漏檢問題[5]。（2）核酸檢測可彌補血清學檢測中出現的隱匿性乙型肝炎感染漏檢問題，且可規避免疫靜默的影響[6]。（3）血清學檢測能夠通過抗體、抗原對靶目標進行識別，但在靶目標出現突變或者單克隆抗體未識別目標片段時可出現漏檢；核酸檢測在探針與引物所識別區域序列出現變異時可促使擴增效率降低而導致漏檢[7]。因此，聯合檢測可真實反映患者機體病原體感染狀況，對疾病的診斷、患者病情的監測以及輸血安全的維護等均具有重要意義[8]。

綜上所述，核酸檢測對輸血傳染疾病有一定的預防作用，但也存在漏檢問題，將其與血清學指標聯合檢測可更有效地確保輸血安全。