遼寧鳳城市紅松中松材線蟲的分離與鑒定

潘龍，理永霞,3，劉振凱，孟繁麗，陳軍，張星耀,3

(1. 中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院林業(yè)新技術(shù)研究所，北京 100091； 2. 遼寧省鳳城市林業(yè)有害生物防治檢疫局，遼寧 鳳城 118100；3. 南京林業(yè)大學(xué)南方現(xiàn)代林業(yè)協(xié)同創(chuàng)新中心，江蘇 南京 210037)

紅松Pinuskoraiensis以中國(guó)東北地區(qū)東部為中心在中國(guó)、日本、朝鮮、韓國(guó)、俄羅斯等國(guó)均有分布，總面積約30萬(wàn)km2[1]，其中中國(guó)面積最多，廣泛分布于遼寧、吉林和黑龍江等地。紅松是著名的珍貴經(jīng)濟(jì)樹木，且具有重要的生態(tài)價(jià)值，一旦受到松材線蟲病的危害，將會(huì)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失和生態(tài)損害。

松材線蟲病是一種以松材線蟲Bursaphelenchusxylophilus為病原，墨天牛屬M(fèi)onochamus昆蟲為主要媒介的復(fù)雜病害系統(tǒng)[2-3]。在我國(guó)松材線蟲病的傳統(tǒng)分布區(qū)，自然感病的寄主包括馬尾松Pinusmassoniana、黑松P.thunbergii、白皮松P.bungeana、華山松P.armandii、云南松P.yunnanensis等，全部為松科松屬樹種[4]。近年來(lái)松材線蟲由南向北逐漸擴(kuò)張，并在此過程中不斷危害新寄主。2017年遼寧省鳳城市發(fā)生大面積紅松枯死現(xiàn)象，本研究對(duì)該地區(qū)紅松發(fā)病情況進(jìn)行調(diào)查并對(duì)病原線蟲進(jìn)行鑒定，以期為松材線蟲病的防治提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 紅松受害情況調(diào)查與樣品采集 2017年7月發(fā)現(xiàn)單株紅松針葉枯黃后，每天拍照記錄針葉變化情況，共持續(xù)90 d。2017年12月在鳳城市東湯鎮(zhèn)選擇枯死紅松比較集中的樣地(面積約為500 m×500 m)，根據(jù)針葉枯黃率將紅松分為3個(gè)健康等級(jí)，即健康(針葉枯黃率=0%)、半枯(0%<針葉枯黃率≤50%)和全枯(50%<針葉枯黃率)，隨機(jī)選擇樣地中3種健康等級(jí)的紅松，測(cè)量并記錄樹高、胸徑和健康等級(jí)，觀察羽化孔、排糞孔和刻槽，綜合判斷是否有天牛危害。隨機(jī)伐倒不同健康等級(jí)的紅松，其中全枯紅松10株，半枯紅松和健康紅松各5株。在離地1.5 m處各采集5 cm厚的木圓盤，共采集樣本20份，用于分離鑒定病原線蟲。

1.2 紅松中線蟲的分離與培養(yǎng) 采用貝爾曼漏斗法進(jìn)行線蟲分離，24 h后用離心管收集線蟲分離液，離心后用200 μL移液槍吸取底部線蟲混合液滴至載玻片上進(jìn)行觀察[5]。……