甘藍型油菜BnEOD3基因克隆與比較測序分析

俎 峰，李 霞，何曉瑩，張國建，張建昆，董云松，王敬喬，束正齊，陳 葦*

(1.云南省農業科學院經濟作物研究所，云南 昆明 650225；2. 云南省農業科學院生物技術與種質資源研究所，云南 昆明 650205；3. 云南省農業職業技術學院，云南 昆明 650031)

【研究意義】中國是世界上油菜種植與菜籽生產最主要的國家之一，其種植面積和菜籽總產均約占世界的30 %左右，但中國也是主要的菜籽進口國，油菜籽生產自給嚴重不足[1]。因此，大力提升中國油菜籽產量是我國油菜產業未來健康發展的關鍵所在。【前人研究進展】母體遺傳基因EOD3(enhancer of da1) 編碼細胞色素P450/CYP78A6，是重要的調控擬南芥籽粒發育的基因，在植物體絕大部分器官中均有表達。在擬南芥中過表達EOD3基因能夠顯著增加籽粒的大小，相反敲除該基因則會導致籽粒變小。該基因與同一家族基因CYP78A9存在功能冗余，雙基因突變體能夠產生更小的籽粒。遺傳分析還表明EOD3基因與同為母體遺傳的基因DA1與TTG2位于不同的調控路徑[2]。【本研究切入點】目前尚未有擬南芥EOD3基因的甘藍型油菜同源基因克隆的報道。本研究以甘藍性油菜特大籽粒種質(千粒重千粒重7.0 g左右)與小粒種質(千粒重3.2 g左右)為研究材料，克隆在籽粒發育中表達的BnEOD3基因拷貝，并比較測序分析。【擬解決的關鍵問題】雖然EOD3基因在擬南芥中是重要的調控籽粒發育的基因，但在甘藍型油菜研究中尚未有該基因被克隆的報道，因此有必要克隆該基因在甘藍型油菜的同源基因，明確該基因在甘藍型油菜籽粒發育中有多少功能拷貝表達，并在大小籽粒材料間進行比較測序分析，以期為該基因的功能分析與后續的分子標記輔助育種奠定數據基礎。……