制霉素搽劑質量控制與穩定性研究

叢萍

摘 要：本實驗研究制霉素搽劑的制備方法進行研究。含量測定方法：固定相為：奧泰公司C18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm），醋酸鈉緩沖溶液（PH4.0）-乙腈（60∶40），檢測波長：306nm，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。；制霉素在10～320μg·mL-1范圍內呈良好的線性關系。制霉素平均回收率分別為99.1%，RSD為0.86%。結論：本制劑穩定、可靠。制霉素搽劑可以存放24個月。

關鍵詞：制霉素搽劑；制備；質量

制霉素為黃色或棕黃色粉末，對光、空氣、酸和堿均不穩定。制霉素可與真菌細胞膜上的甾醇相結合，致細胞膜通透性的改變，以致重要細胞內容物漏失而發揮抗真菌作用。制霉素也用于長期服用廣譜抗生素所致的真菌性二重感染。制霉素可用于消化道真菌感染、老年霉菌性陰道炎、念珠菌陰道炎、乳腺炎等[1-4]。搽劑一種在皮膚上搽用的液體外用制劑，可分為溶液型、乳劑型及混懸液型，一般以醇或油等為分散劑。搽劑最早出現于我國現存最早的出土于馬王堆漢墓的古醫方《五十二病方》。最早搽劑為天然藥物制劑，即利用自然界中常見的某種藥物不加炮制而稍作加工后直接使用，為人類早期對天然藥物的一種原生態使用方法。本實驗研究制霉素搽劑的制備方法進行研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：百典BLY系列立式恒溫水槽（上海百典儀器設備有限公司）；電熱恒溫水浴鍋-DU-30（杭州匯爾儀器設備有限公司）；ELGA Purelab UHQ小型超純水儀（北京東迅天地醫療儀器有限公司）；帕恩特應用分析級超純水器（北京湘順源科技有限公司）；雙光束紫外可見分光光度計-UV1900（杭州匯爾儀器設備有限公司）；HZY-404/503實驗室電子天平（浙江景程生物科技有限公司）；T9雙光束紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責任公司）；晨陽臺式大容量離心機（常州市金壇晨陽電子儀器）；電熱恒溫培養箱（廣州越特科學儀器有限公司）；RE-52AA旋轉蒸發儀（東莞康潤儀器設備有限公司）；Stuart加熱磁力攪拌器（艾泰赫生化科技（蘇州）有限公司）； KYX-800YS 色譜配套超聲波清洗機（沈陽科晶自動化設備有限公司）；KHW-D-1LC精密拉伸水浴鍋（上海科恒實業發展有限公司）；旋轉粘度計專用恒溫槽CH1006（上海右一儀器有限公司）；DTD-6小容量臺式超聲波清洗機（鼎泰（湖北）生化科技設備制造公司）。

1.2色譜柱：奧泰公司C18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm）。

1.3對照品：制霉素 購自中國藥品生物制品檢定所。

1.4試劑：甲醇（東營市鑫旺化工有限責任公司）、乙腈（東營市鑫旺化工有限責任公司）、鹽酸（蘇州源泰潤化工有限公司）、醋酸鈉（江陰祥輝化工有限公司）、醋酸（東營市鑫旺化工有限責任公司）、乙醇（東營市鑫旺化工有限責任公司）。

1.5 原輔料：甘油（西安晉湘藥用輔料有限公司）。

2 制備方法

2.1處方

制霉素、甘油等。

2.2制霉素搽劑的制備

制霉素、甘油等混合，攪拌均勻，分裝，即得。

3質量控制

3.1性狀

本品為黃色粘稠性混懸液。符合《中國藥典》2015年版對搽劑的要求。

3.2 含量測定

3.2.1 依據查閱文獻及考查的結果，確定色譜條件如下[5-6]。流動相：醋酸鈉緩沖溶液（PH4.0）-乙腈（60∶40），檢測波長：306nm，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。理論板數按制霉素計算應不得低于3000。

3.2.2 對照品溶液的制備

精密稱取制霉素對照品適量，置容量瓶中，加甲醇溶解，加甲醇制成每1mL含100μg的溶液，避光保存，即得。

3.2.3 供試品溶液的制備

取制霉素搽劑精密稱定，置具小燒杯中，加流動相適量，超聲處理（240W，40kHz）5分鐘，放冷至室溫，加流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續濾液5m1，置25m1量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過。取續濾液，即得。

3.2.4 專屬性試驗

依照處方取甘油，按樣品制備工藝制成陰性對照樣品，按供試品溶液的制備方法制成陰性液，依色譜條件測定，結果陰性試驗沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

3.2.5 精密度試驗

依照3.2.2項下制備對照品溶液，精密吸取制霉素對照品溶液10μL重復進樣6次，測定峰面積積分值，對照品峰面積積分值的RSD為0.82%。結果表明，本實驗精密度良好。

3.2.6 重現性試驗

分別稱取樣品6份，分別依照3.2.3項下供試品制備方法制備供試品，按含量測定項下方法測定含量，并計算樣品的RSD值為0.81%，結果表明，此含量測定方法的重現性良好。

3.2.7 回收率試驗

取已知含量的同一批供試品各6份，分別精密添加一定量的制霉素對照品，測定含量，計算回收率。平均回收率為99.1%，RSD為0.86%。

3.2.8 標準曲線的制備

制備濃度為10、20、40、80、160、320μg·mL-1的對照品溶液，分別精密吸取10μL注入HPLC，記錄色譜圖。以峰面積積分值A（μg）為橫坐標，進樣量為縱坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程。試驗表明，氨芐青霉素對照品在10～320μg·mL-1范圍內線性關系良好。

3.3 微生物限度檢查

按照《中國藥典》2015年版附錄所載方法測定，結果符合規定。

3.4 穩定性考察

將本品置于30℃的恒溫箱內，分別于第1、2、3、12、24個月末取樣并測定，考察外觀、微生物限度、含量的測定結果做比較。放置36個月后， 制霉素搽劑片未發生明顯變化。經測定發現， 外觀、微生物限度、含量均穩定，表明制霉素搽劑可以存放24個月。

4 討論

本制劑穩定、可靠，符合中國藥典相關規定。此測定方法可用于制霉素搽劑中制霉素的含量測定。制霉素搽劑可以存放24個月。

參考文獻

[1]婦科消炎方與硝呋太爾制霉素對老年霉菌性陰道炎患者血清C反應蛋白和氧化應激產物及其療效的影響[J].程松，王銳.抗感染藥學.2016（05）.

[2]國產與進口硝呋太爾-制霉菌素陰道栓隨機雙盲對照治療念珠菌陰道炎[J].董曉靜，胡麗娜，唐莨萏，常青.中國臨床藥理學雜志. 2004（05）.

[3]婦科消炎方聯合硝呋太爾制霉素對老年霉菌性陰道炎C反應蛋白、氧化應激產物的影響及其療效[J].牛軍霞，張志輝.中國生化藥物雜志. 2016（04）.

[4]國產硝呋太爾制霉素陰道軟膠囊治療陰道炎的臨床研究[J].耿力，宋學紅，郝增平，陳蕾，詹宇新，朱馥麗，劉軍，唐學磊，楊惠靜.中國婦產科臨床雜志. 2007（01）.

[5]中國制霉菌素主要成分的分離、制備、鑒定和再命名[J].馬劍文，劉玉波，文德秀，朱鳳娟，王紹文，凌大奎.抗生素. 1987（02）.

[6]高效液相色譜法研究國內外制霉菌素的組成[J].馬劍文，劉玉波，文德秀，朱鳳娟，王紹文. 藥學學報.1985（04）.