ELISA法與膠體金法檢測血液中HIV抗體結果的對比分析

史志坤

（朝陽市衛生健康事業服務中心，遼寧 朝陽 122000）

現階段，艾滋病已逐漸成為嚴重威脅人類健康的公共衛生問題之一。由于艾滋病病情極為獨特，且潛伏期較長，不少艾滋病患者難以及時發現病情，嚴重影響患者的生活質量[1]。所以臨床應尋求一種科學、可靠的檢測方法來及早發現、診斷艾滋病患者。就目前而言，臨床檢測HIV抗體常用的方法有酶聯免疫法（ELISA法）和膠體金法。本次研究嘗試采用這兩種方法檢測我實驗室2018年1月至2019年8月收集到的血清HIV抗體，旨在比較分析其結果差異，為今后的臨床發現、診斷作為科學理論依據。報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：隨機抽取我實驗室2018年1月至2019年8月自愿咨詢檢測人員524例血清作為此次研究對象，自愿咨詢檢測人員包括男性268例，女性256例，年齡12～85歲，平均年齡為（43.58±5.87）歲。采用免疫印跡法進行HIV抗體確認，結果顯示有例224例血清為HIV抗體陽性，包括男性121例，女性103例，年齡19～80歲，平均年齡為（46.82±1.05）歲。本次實驗已通過醫院醫學倫理委員會的批準，且征得所有患者及其家屬的同意。

1.2 檢測儀器、試劑和方法：本組血清HIV抗體檢測儀器為賽特湘儀TD5A型低速離心機和百得實驗儀器北京有限公司生產的50 μL、100 μL和200 μL移液器。膠體金法檢測試劑盒為英科新創廈門科技有限公司生產的HIV抗體診斷試劑盒，ELISA法檢測試劑盒為北京萬泰生物藥業股份有限公司生產的HIV抗體診斷試劑盒。另外，所用儀器包括鄭州安圖生物技術有限公司生產的Anthos-2010酶標儀和Anthos fluido洗板機；天津恒高科技有限公司的HWT-6A恒溫水浴箱。具體檢測方法如下：首先抽取受檢者3～5 mL靜脈血，待血液凝固后離心，注意離心轉速保持在4000 rp/min，如果無溶血和脂血現象發生，方可收集上層血清，隨后給予膠體金法和ELISA發檢測。檢測過程中，各項操作均需遵循試劑盒說明書的相關要求。

1.3 觀察指標：ELISA法檢測結果應采用酶標儀進行測定，注意將波長設置為450 nm，計算公式為：CUTOFF=陰性對照孔平均A值+0.12。如果發現樣品A值≤CUTOFF值，說明HIV抗體為陽性，反之為陰性。膠體金法檢測結果判定標準如下：①測試線為紅色條帶，質控線無顏色變化則表示檢測結果不正確，應重新測定；②測試線和質控線均為紅色條帶，表示血清HIV抗體呈陽性；③測試線無顏色變化，質控線為紅色條帶，表示血清呈陰性。

1.4 統計學處理：運用SPSS20.0統計學軟件處理、分析實驗數據，其中均數±標準差（）表示計量資料，t檢驗；百分比（%）表示計數資料，χ2檢驗；P＜0.05表示差異具備統計學意義。

2 結果

2.1 膠體金法和ELISA法特異性比較：實驗結果顯示：經免疫印跡法檢測，本組524例血清中有224例呈陽性，其陽性率為42.75%。經ELISA法檢測，發現本組血清中有235例呈現陽性，其中假陽性11例，假陽性率為4.68%；經膠體金法檢測，發現本組血清中有244例呈現陽性，其中假陽性20例，假陽性率為8.20%。顯然膠體金法假陽性率高于ELISA法（P＜0.05）。見表1。

表1 膠體金法和ELISA法特異性比較

2.2 膠體金法和ELISA法靈敏度比較：實驗結果顯示：經ELISA法檢查224例血清，確定HIV為陽性的最大稀釋比例是（3.18±0.32），經膠體金法檢查224例血清，確定HIV為陽性的最大稀釋比例是（1.40±0.17），經比較顯然ELISA法最大稀釋比例明顯高于膠體金法（P＜0.05）。

3 討論

艾滋病屬于一種傳染性疾病，在我國的發病率呈現逐年上升趨勢。然而目前臨床尚未研制出有效治療艾滋病的方法和藥物，只能通過有效檢測來提早發現、診斷HIV病毒，以此幫助患者更好的控制自身疾病的發展，干預其行為，減少二次傳播[2]。

雖然ELISA法綜合準確性較高，但仍存在一定的局限性，例如檢測時間長、所用試劑容易受外界的影響、檢測輔助設備較復雜、實驗人員要求較高以及不適宜少量樣本檢測等，偏遠地區基層醫院檢測難度較大[3]。而膠體金法敏感性和準確性都較高，且操作簡單便捷、檢測時間短、速度快、試劑穩定性高、適用于少量樣本檢測，相比而言，更加適合用于日常檢測工作和醫院急診術前檢測[4]。

HIV抗體檢測屬于特殊檢測，對特異性和陽性預期感要求均高，以此確保可以及早發現、診斷真正的HIV感染患者[5]。在本次實驗中，ELISA法檢測結果顯示本組血清中有235例呈陽性，11例呈假陽性，其假陽性率為4.68%；膠體金法檢測結果顯示本組血清中有244例呈陽性，20例呈假陽性，其假陽性率為8.20%，顯然膠體金法檢測血清出現假陽性的概率高于ELISA法。ELISA法HIV抗體陽性血清最大稀釋比例（3.18±0.32）明顯高于膠體金法（1.40±0.17），且差異顯著（P＜0.05）。足以說明這兩種檢測方法均具有較高的敏感性和特異性，但膠體金法敏感性和特異性更高，ELISA法綜合準確性更好。

綜上所述，膠體金法敏感性和特異性顯著高于ELISA法，但ELISA法綜合準確性較膠體金法高，所以在臨床檢測過程中，應兩種方法共用，相互補充，以此提高HIV抗體的診斷準確率。