高效液相色譜法檢測大棗中溴氰菊酯殘留

劉世軍，唐絨絨，唐志書，雷甜甜，王 錦，劉垚潤

(1.陜西中醫藥大學/陜西省中藥資源產業化協同創新中心，陜西 咸陽 712083;2.陜西省創新藥物研究中心，陜西 咸陽 712083;3.陜西省風濕與腫瘤類中藥制劑工程技術研究中心，陜西 咸陽 712083)

大棗藥食兩用，營養豐富，含有三萜、皂苷、生物堿、黃酮等多種活性成分[1]，具有很高的醫療和經濟價值，其深加工技術正向復合飲料(將大棗汁和其它果品混合生產)、著色劑或食用色素(用于食品、工業和化妝品)、藥品或保健食品(對其進行深加工，研發出具有防治心腦血管和糖尿病等方面的制劑)等三方面發展[2]。由于用量大，涉及人群廣，所以大棗中的農藥殘留逐漸引起了人們的重視。

溴氰菊酯為一種中等毒性農藥，被棗農所常用，該農藥常通過皮膚、呼吸道、消化道進入體內，對人體有極大的危害性[3]，故檢測大棗中溴氰菊酯的殘留很有必要。

1 實驗儀器與試劑

1.1 儀器

高效液相色譜儀(Waters e2695型)，低速臺式離心機(TDL-80-2B型，上海安亭科學儀器廠)，電熱鼓風干燥箱(101-1型，北京科偉永興儀器有限公司)，N-丙基乙二胺固相萃取柱(陜西樂博生化科技有限公司)，超聲波清洗機(KQ-300DE型，昆山市超聲儀器有限公司)，電子分析天平(準確度為0.0001 g，FA2004B型，上海佑科儀器儀表有限公司)，予華牌循環真空泵(SHZ-DⅢ型，鞏義市予華儀器有限責任)，燒杯，量筒。

1.2 試劑與材料

大棗(購自咸陽嘉惠市場)；氯化鈉、甲醇(500 mL)為分析純；乙腈、甲醇(4 L)為色譜純；活性炭、娃哈哈瓶裝水(500 mL)(陜西娃哈哈乳品有限公司)。

1.3 色譜條件[4]

色譜柱：BDS HYPERSIL C18(250 mm×4.6 m，5 μm)；檢測器：紫外檢測器；檢測波長：254 nm；流動性：甲醇 ∶水=90 ∶10；流速：1.0 mL·min-1；柱溫：30℃。

2 實驗部分

2.1 對照品溶液的配制

對照品溴氰菊酯的濃度為0.025 g·mL-1，使用時用甲醇(分析純)稀釋成所需濃度的標準使用液(精密量取溴氰菊酯0.1 mL，置25 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得100 μg·mL-1的對照品溶液)。

2.2 樣品的測定[5]

2.2.1 樣品的前處理 取樣品25 g，精密稱定，加入50 mL乙腈，超聲2 min，抽濾，濾液中加入5～7 g氯化鈉，溶解，抽濾，設計濾液45 mL，劇烈搖勻，靜置30 min，取上層乙腈相20 mL，加入0.3 g活性炭粉末，以5 000 r·min-1離心1 min，取上清液10 mL于40℃烘干，加2 mL甲醇溶解殘渣，溶解后過活化好的N-丙基乙二胺固相萃取柱，用甲醇 ∶水(3 ∶2)洗脫，準確定容2.5 mL，混勻后過0.22 μm微孔濾膜，待測。

2.2.2 制備樣品的定性和定量 定性采用外標法(保留時間)，定量采用標準曲線。在以上所述色譜條件下，吸取待測樣品10 μL進樣，重復3次，取面積平均值，根據所繪標準曲線，查到實際濃度，通過計算得到所制樣品中溴氰菊酯的殘留量。

3 結果與討論

3.1 分析方法的線性關系[6]

用電子分析天平稱取溴氰菊酯標準品，用甲醇溶解并定容，配制成溴氰菊酯標準溶液母液，隨后稀釋成2、4、6、8、10、12 μg·mL-1等不同的標準溶液，在上述選定的色譜條件下測定，得到色譜圖，以出峰面積為縱坐標，濃度為橫坐標繪制標準曲線，結果表明溴氰菊酯的濃度與峰面積在特定區間下呈線性關系。標準曲線方程為y=147164x-11210，R2=0.9995。標準曲線如圖1。

圖1溴氰菊酯標準溶液工作曲線

3.2 實驗的重復性、精密度及回收率[7]

3.2.1 重復性實驗 取處理好的對照品溶液5份，在已經選好的色譜條件下依次進樣，依法測定農藥含量，計算RSD為3.04%，表示本方法重復性良好。

3.2.2 精密度實驗 主要有:

(1)日內精密度。取同一種處理好的樣品，在同一天進樣5次，計算溴氰菊酯的含量，RSD為2.33%，表示本方法日內精密度良好。

(2)日間精密度。量取處理好的樣品，分別在6 d中每天進樣一次，計算溴氰菊酯的含量，RSD為3.42%，表示本方法日間精密度良好。

3.2.3 回收率實驗 采取標樣添加法，加定量的標準溶液到已經知道含量的樣品中，在該色譜條件下測定，對回收率進行計算，結果表明本方法的回收率良好，如表1所示。

表1 大棗中溴氰菊酯農藥加標回收率的測定結果(n=3)

4 結論

目前檢測食品中農藥殘留大多采用氣相色譜法，但是由于溴氰菊酯容易在氣相色譜柱中發生吸附[7]，使實驗結果出現一些偏差，不能真正反映食品中的農藥殘留，會給消費者帶來一定的誤導，故我們課題組通過實驗，建立了溴氰菊酯農藥高效液相檢測方法，可以達到有效檢測溴氰菊酯農藥農殘的目的,課題組為此類農藥殘留增加了一種可行的檢測方法，重現性和靈敏度好，有利于控制不合格大棗流入市場，對人們的安全增加了一道保障。