原發(fā)性腎病綜合征中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)及臨床意義

徐海燕,劉凌,李玉平,王旭光,劉翻利,金翠萍，王曉峰，張敏，陳瓊，王穎，高桂鳳

DOI：10.16662/j.cnki.1674-0742.2019.35.196

[摘要] 目的 通過檢測(cè)原發(fā)性腎病綜合征（PNS）患者血、尿中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（NGAL），分析其與病理類型及臨床指標(biāo)的關(guān)系。 方法 方便選取2015—2018年該院50例PNS患者，根據(jù)腎活檢病理結(jié)果分組，根據(jù)有無急性腎小管壞死（ATN）分急性腎損傷（AKl）組及非AKI組，25名例健康體檢者作為正常對(duì)照組，檢測(cè)血、尿NGAL濃度，觀察NGAL在NS不同病理類型的表達(dá)水平;同時(shí)檢測(cè)血白蛋白、血肌酐、24 h尿蛋白定量等臨床指標(biāo)。觀察NGAL的變化及與臨床指標(biāo)的關(guān)系。結(jié)果 AKI組患者血、尿NGAL水平[（176.75±57.31）ng/mL， （241.72±78.49）ng/mL]高于非AKI組[（132.78±55.69）ng/mL，（189.36±60.10）ng/mL]及對(duì)照組[（83.41±23.45）ng/mL，（38.73±24.58）ng/mL]（t=2.085，2.328，6.305， 11.379，P=0.043，0.025，0.000，0.000）;病理類型不同，血、尿NGAL表達(dá)水平不同：其中膜性腎病組[（169.98±50.04）ng/mL，（220.84±67.24）ng/mL及局灶節(jié)段硬化組[（289.8±94.58）ng/mL，（296.14±76.22）ng/mL]較微小病變組NGAL水平[（116.63±48.55ng/mL，（173.68±63.24）ng/mL]升高（t=3.364，3.042，6.085，4.051，P=0.004，0.048，0.000，0.001）。血、尿NGAL與24 h尿蛋白定量、血尿素氮和血肌酐呈正相關(guān)（r=0.274、0.288;0.113、0.129;0.310、0.525，P<0.05） ，與血白蛋白呈負(fù)相關(guān)（r=-0.255，-0.733，P<0.05）。結(jié)論 ?血、尿 NGAL 可能作為早期判斷PNS并發(fā)急性腎損傷的敏感、無創(chuàng)指標(biāo)，一定程度下可預(yù)測(cè)病理類型。

[關(guān)鍵詞] 中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白;腎病綜合征;急性腎損傷

[中圖分類號(hào)] R325 ? ? ? ? ?[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A ? ? ? ? ?[文章編號(hào)] 1674-0742（2019）12（b）-0196-03

Expression and Significance of Neutrophil Gelatinase-associated Lipocalin in Patients with Nephrotic Sydrome

XU Hai-yan， LIU Ling， LI Yu-ping， WANG Xu-guang， LIU Fan-li， JIN Cui-ping， WANG Xiao-feng， ZHANG Min， CHEN Qiong， WANG Ying， GAO Gui-feng

Department of Nephrology， Bayannaoer Hospital， Inner Mongolia， Bayannaoer， Inner Mongolia， 015002 China

[Abstract] Objective To detect the significance of Neutrophil gelatinase associated lipocalin（ NGAL） level of the patients with primary nephrotic syndrome（PNS） and the correlation with the renal pathological type and the clinical indicators. Methods Convenient selected fifty PNS patients who were in the hospital from 2015 to 2018 were selected in the study and divided according to the pathological results. Serum samples from 25 healthy persons was used as controls.The levels of NGAL were detected by ELISA. At the same time， albumin， serum creatinine and 24-hour urine protein were measured. The changes of NGAL and its relationship with serum creatinine， urine protein were observed. Results The blood and urine NGAL levels [（176.75±57.31）ng/mL， （241.72±78.49）ng/mL] in the AKI group were higher than those in the non-AKI group[（132.78±55.69）ng/mL， （189.36±60.10）ng/mL] and the control group[（83.41±23.45）ng/mL， （38.73±24.58）ng/mL] the difference was statistically significant（t=2.085， 2.328， 6.305， 11.379， P=0.043， 0.025， 0.000， 0.000）; different pathological types， different levels of blood and urine NGAL expression： membranous nephropathy group[（169.98±50.04）ng/mL， （220.84±67.24）ng/mL] and focal segmental sclerosis group[（289.8±94.58ng/mL， （296.14±76.22）ng/mL] compared with NGAL level in the minimal lesion group [（116.63±48.55ng/mL[（173.68±63.24）ng/mL] increased the difference was statistically significant（t=3.364， 3.042， 6.085， 4.051， P=0.004， 0.048， 0.000， 0.001）.Blood and urine NGAL were positively correlated with 24 h urine protein quantitation， blood urea nitrogen and serum creatinine（r=0.274， 0.288， 0.113， 0.129; 0.310， 0.525， P<0.05）， and negative with albumin. Correlation （r=-0.255，-0.733，P<0.05）. Conclusion The level of NGAL can be used as one of the sensitive indexes for early and non- invasive detection ofPNS with AKI.

[Key words] Neutrophil gelatinase-associated lipocalin; Nephrotic syndrome;Acute kidney injury

急性腎損傷（Acute Kidney Injury， AKI）是原發(fā)性腎病綜合征（Primary Nephritic Syndrome， PNS）臨床上常見且危重并發(fā)癥之一。可發(fā)生在病程中的任何階段。PNS合并AKI時(shí)腎臟病理主要表現(xiàn)為急性腎小管壞死（Acute Tubular Necrosis， ATN）和腎間質(zhì)水腫。如能及早診斷并干預(yù)治療，腎臟病變有可能恢復(fù)，若不及時(shí)治療，則會(huì)導(dǎo)致不可逆的終末期腎病的發(fā)生。2010年，改善全球腎臟病預(yù)后組織（Kidney Disease： Improving Global Outcomes， KDIGO）突出強(qiáng)調(diào)了AKI早期診斷及干預(yù)治療的重要性。其中把血清肌酐（Serum creatinine，Scr）做為診斷的主要指標(biāo)。然而，Scr受許多因素的影響，無法早期準(zhǔn)確反映腎功能的變化。腎活檢是診斷ATN的金標(biāo)準(zhǔn)，但腎穿刺是有創(chuàng)并具有風(fēng)險(xiǎn)性的檢查，臨床應(yīng)用具有一定的局限性，且基層醫(yī)院無法行此項(xiàng)操作，因此尋找早期反映AKI的無創(chuàng)、特異性指標(biāo)對(duì)早期診斷PNS合并AKI具有重大意義。NGAL可成為反映PNS患者AKI的敏感指標(biāo)，能夠動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，便于觀察患者病情變化[1]。但在腎病綜合征中的表達(dá)情況、與病理類型的關(guān)系目前研究較少。

該文通過檢測(cè)該院2015—2018年50例PNS患者血、尿NGAL的水平，探討其與原發(fā)性腎病綜合征不同病理類型及臨床指標(biāo)的關(guān)系，從而為PNS合并AKI的早期診斷提供幫助，報(bào)道如下。

1 ?資料與方法

1.1 ?一般資料

方便選取該院50例初發(fā)、初治原發(fā)性腎病綜合征患者為腎病組。所有病例均符合以下條件：符合腎病綜合征診斷標(biāo)準(zhǔn)：血漿白蛋白<30 g/L，24 h尿蛋白定量>3.5 g;排除糖尿病腎病、紫癜性腎炎、乙肝病毒相關(guān)性腎炎、狼瘡性腎炎等繼發(fā)性腎臟損害;無嚴(yán)重肝腎疾病、甲狀腺疾病、白細(xì)胞數(shù)異常、心功能不全、惡性腫瘤等?；颊呶捶锰瞧べ|(zhì)激素、免疫抑制劑、抗凝劑等藥物。其中男27例，女23例，年齡22～70歲，平均年齡 （48.34±13.04）歲。根據(jù)腎臟病理有無急性腎小管壞死（ATN）分為2組AKI組：8例和非AKI組42例;根據(jù)病理類型分為，膜性腎?。╩embranousnephropathy ?MN ） 24 例，微小病變（minimaichangedisease MCD ）18例，局灶節(jié)段性腎小球硬化（focal segmental glomerulosclerosis FSGS）組8例。隨機(jī)選取患者年齡匹配的健康體檢者25名為正常對(duì)照組，近期無肝腎疾病、無心血管疾病，無感染史、無糖尿病，其中男13名，女12名，年齡25～72歲，平均年齡 （42.58±14.35）歲。兩組間年齡、性別，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。該研究經(jīng)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，且受試者知情同意并簽署知情同意書。

1.2 ?方法

采用ELISA法檢測(cè)所有研究對(duì)象血清、尿NGAL水平，人lipocalin2（NGAL）ELISA試劑盒來自上海西唐生物有限公司，操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書執(zhí)行。同時(shí)由本院實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)血白蛋白、血肌酐（SCR）、尿素氮（BUN）、血脂、24 h尿蛋白定量（UTP）等臨床指標(biāo)。

1.3 ?統(tǒng)計(jì)方法

數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，其中計(jì)數(shù)資料（%）進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料（x±s）進(jìn)行t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 ?結(jié)果

2.1 ?一般資料比較

腎病組及對(duì)照組一般資料比較：兩組例數(shù)、性別、年齡差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;腎病組血ALB水平低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;Scr、UTP水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。AKI 組與非AKI組一般資料，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見表1。

表1 腎病組及對(duì)照組一般臨床資料（x±s）

注：△與對(duì)照組相比P<0.05

2.2 ?各病理類型組血、尿NGAL的比較

PNS組患者血、尿NGAL水平高于對(duì)照組，且AKI組高于非AKI組（P<0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。患者各病理類型之間：MN組及FSGS組血、尿NGAL水平高于MCD組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。而與MN組比，F(xiàn)SGS組高于MN組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表2、表3。

表2 ? AKI組，非AKI組和對(duì)照組血、尿NGAL水平[（x±s），ng/mL]

注：△與對(duì)照組相比P<0.05，*與非AKI組相比P<0.05

表3 ? 不同病理類型NGAL水平（x±s）

注：△與MCD組比較，P<0.05;與MN組比較，*P<0.05

2.3 ?血、尿NGAL與臨床資料的相關(guān)性

PNS患者血、尿NGAL水平與BUN、 Scr、UTP呈正相關(guān)，與血ALB呈負(fù)相關(guān)，見表4。

表4 ? NGAL 與臨床指標(biāo)的關(guān)系

3 ?討論

NS合并 AKI發(fā)病率約 2% ～11%[2]。對(duì)AKI早期診斷，早期治療和降低死亡率具有重要意義。有學(xué)者提出某些生物學(xué)標(biāo)志物可以判斷腎臟疾病的進(jìn)展、恢復(fù)過程、預(yù)后[3]。

中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)載脂蛋白（neutrophil gelatinase associated lipocalin，NGAL）屬于脂質(zhì)運(yùn)載蛋白超家族成員，為急性腎損傷的生物標(biāo)志物[4]。正常情況下，NGAL主要表達(dá)于近端腎小管，在腎臟NGAL呈低表達(dá)。病理情況下NGAL由腎臟大量表達(dá)，尤其在缺血或腎毒性時(shí)，在近端腎小管上皮細(xì)胞表達(dá)更多[5]。NGAL是診斷 AKI 靈敏、特異、無創(chuàng)的生物學(xué)指標(biāo)之一。有數(shù)據(jù)[6]表明NGAL水平對(duì)于NS合并AKI的診斷及疾病預(yù)測(cè)有重要價(jià)值。張穎等[1]發(fā)現(xiàn)NGAL不僅可作為反映PNS患者AKI的敏感指標(biāo)，在一定程度下可評(píng)價(jià)腎小管間質(zhì)病變程度。

該實(shí)驗(yàn)中，PNS合并AKI時(shí)血、尿NGAL表達(dá)水平為[（176.75±57.31）ng/mL， （241.72±78.49）ng/mL]，高于不合并AKI組的NGAL水平[（132.78±55.69）ng/mL，（189.36±60.10）ng/mL]，而兩組間血肌酐[（87.88±17.74）μmol/L， （75.97±18.06）μmol/L]，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），說明血尿NGAL比血肌酐更敏感、可靠地預(yù)測(cè)AKI的發(fā)生，能夠作為診斷早期急性腎損傷的敏感生物學(xué)指標(biāo);該研究相關(guān)分析結(jié)果顯示，血、尿NGAL水平表達(dá)與Scr、BUN呈正相關(guān)，與血ALB呈負(fù)相關(guān)（r=-0.255，-0.733，P<0.05），與劉靜等[7]相關(guān)研究一致，其研究顯示PNS合并ATN時(shí)血清及腎組織NGAL水平較不合并ATN時(shí)明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），并對(duì)PNS合并ATN患者分析發(fā)現(xiàn)血NGAL水平100%升高，僅有23%血肌酐值升高，表明NGAL診斷AKI時(shí)早于血肌酐，與腎小球功能密切相關(guān)。

該研究中尿NGAL在MCD、MN、FSGS表達(dá)水平分別為（173.68±63.24）ng/mL，（220.84±67.24）ng/mL，（296.14±76.22）ng/mL，呈依次升高趨勢(shì)，同雷文娟等[8]研究結(jié)果相似，其研究表明，尿NGAL在MCD、MN、FSGS表達(dá)水平為21.31 μg/mL，23.5 μg/mL，53.88 μg/mL，以FSGS升高最明顯，與該文研究結(jié)果一致?？梢奛GAL在腎病綜合征不同病理類型表達(dá)不同，考慮與腎病綜合征不同病理類型蛋白尿發(fā)生機(jī)制不同及腎小管間質(zhì)損害程度不同有關(guān)。PNS患者尿NGAL水平與腎小管萎縮程度呈正相關(guān)，與腎小球硬化、蛋白尿、GFR下降的程度相關(guān)[9]。NGAL參與尿蛋白激活NF-κB途徑，造成腎小球炎癥反應(yīng)及腎小管間質(zhì)損傷[10]。但該本試驗(yàn)樣本量小，故還有待于擴(kuò)大樣本量更進(jìn)一步研究證實(shí)。

該研究發(fā)現(xiàn)相關(guān)分析表明NGAL水平與尿蛋白定量呈正相關(guān)，PNS因遺傳、免疫、感染、藥物等因素導(dǎo)致腎小球?yàn)V過膜損傷，血漿蛋白從尿中大量丟失，形成大量蛋白尿，而NGAL參與炎癥、應(yīng)激等情況下的免疫反應(yīng)。國(guó)內(nèi)學(xué)者[11]發(fā)現(xiàn)NGAL水平與尿蛋白定量呈正相關(guān)，可反應(yīng)腎臟損傷程度，從而證實(shí)蛋白尿是導(dǎo)致腎小管間質(zhì)病變的因素之一。

綜上所述，血、尿 NGAL可能作為早期判斷PNS并發(fā)急性腎損傷的敏感、無創(chuàng)指標(biāo)。在無法開展的腎活檢的基層醫(yī)院，在一定程度上可預(yù)測(cè)病理類型。

[參考文獻(xiàn)]

[1] ?張穎，唐敏，施婧，等.原發(fā)性腎病綜合征患者中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白的變化及意義[J].中華腎臟病雜志，2013，29（7）：493-497.

[2] ?朱斌，張美娟，襲怡，等.原發(fā)性腎病綜合征合并急性腎損傷危險(xiǎn)因素分析的病例對(duì)照研究[C]//中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)腎臟疾病專業(yè)委員會(huì).2016年中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)腎臟疾病專業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要編.北京：中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)腎臟疾病專業(yè)委員會(huì)，2016.

[3] ?李秀元，高金霞，韓鵬飛，等.血清NGAL水平變化在大鼠不同程度急性腎損傷中的早期診斷價(jià)值[J].中國(guó)臨床新醫(yī)學(xué)，2019，12（4）：392-395.

[4] ?劉艷，葛斌，徐革，等.血清NGAL水平對(duì)2型糖尿病腎臟疾病的篩查價(jià)值[J].鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)，2019，54（3）：454-457.

[5] ?張瑩，張碧麗，王丹.NGAL在新生兒腎損傷中的研究進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)綜述，2019，25（4）：648-653.

[6] ?張鏗.原發(fā)性腎病綜合征患者尿液NGAL、KIM-1與IL-18檢測(cè)分析[J].深圳中西醫(yī)結(jié)合雜志，2017，27（4）：56-57.

[7] ?劉靜，李紹梅，薛雯，等.原發(fā)性腎病綜合征并發(fā)急性腎損傷患者血清及腎組織中NGAL的表達(dá)及意義[J].中國(guó)病理生理雜志，2012，28（11）：1982-1985.

[8] ?雷文娟，張鏗，潘慶軍，等.原發(fā)性腎病綜合征患者急性腎損傷標(biāo)志物的檢測(cè)及其意義[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志，2016，17（6）：499-501.

[9] ?Proletov lalu，Saganova ES，Galkina OV，et al.Diagnostic value of cystatin C and neutrophil gelatinase associated lipocalin in primary glomerulopathies[J].Ter Arkh，2013，85（6）：10-16.

[10] ?甘思雨.益腎活血法干預(yù)小兒原發(fā)性腎病綜合征對(duì)NGAL及L-FABP的影響[D].福州：福建中醫(yī)藥大學(xué)，2017.

[11] ?劉洪，馮小蘭，袁曉玲，等.糖尿病患者血清NGAL、MCP-1和TGF-β1的表達(dá)及意義[J].河北醫(yī)藥，2019，41（2）：186-189.

（收稿日期：2019-09-19）