含血管內皮生長因子緩釋微粒的合成與鑒定

鐘聲 尚耀華 楊文峰 任遠飛 董玉金 梁武 張鐵慧 大連市中心醫院手足外一科 （遼寧 大連 116033）

內容提要： 目的：合成含血管內皮生長因子緩釋微粒，并檢測其體外緩釋作用。方法：本實驗使用可降解高分子聚乳酸/乙醇酸共聚物，采用乳化分散法，對血管內皮生長因子進行包裹，制成可控制釋放的微粒。測定VEGF體外釋放情況并描繪成曲線。結果：制得VEGF的緩釋微粒大小約80～120nm。體外釋放檢測開始時為快速釋放期，隨后為緩慢持續釋放。結論：此實驗證實成功構建含血管內皮生長因子緩釋微粒。

血管吻合口處的血栓形成是術后最嚴重的并發癥，也是困擾著顯微外科醫生的重大問題。血管內皮生長因子是一種具有誘導和刺激內皮細胞生長的多肽，對組織修復有重要作用。本實驗使用可降解高分子聚乳酸/乙醇酸共聚物，采用乳化分散法，對血管內皮生長因子進行包裹，制成可控制釋放的微粒。以求解決臨床術后并發癥，提高血管通暢度。

1.材料與方法

1.1 一般材料

試劑聚乳酸/乙醇酸共聚物（poly lactic-co-glycolic acid，PLGA）（大連市中心醫院中心實驗室提供）；兔抗人血管內皮生長因子多克隆抗體、VEGF-ELISA試劑盒（武漢華美生物工程有限公司）。

主要試劑及儀器：二氯甲烷，丙酮，聚乙烯醇，沈陽化學試劑廠出品。

1.2 方法

微粒的合成與制備：稱取1g聚乳酸/乙醇酸共聚物置于三口瓶中，加入20mL二氯甲烷和2mL丙酮，在800r/min的機械攪拌下滴加10mL兔抗人血管內皮生長因子多克隆抗體工作液，均勻乳化數分鐘后，加入30mL含2%聚乙烯醇（Polyvinyl Alcohol，PVA）乳化劑的水溶液，攪拌2～3h。……