呼吸窘迫綜合征患兒炎性因子水平變化及相關性分析

王來成

新生兒呼吸窘迫綜合征(NRDS)是指患兒出生后4～12 h內出現的肺泡進行性萎縮，從而出現呼吸困難，呼吸衰竭的癥狀[1]。NRDS的主要病因是缺乏肺泡表面活性物質，是新生兒的常見病，具有極高的致死率和致殘率，越來越受社會的關注[2]。炎性因子在急性NRDS中發揮作用，研究認為NRDS的病理改變與炎性因子失衡相關[3]。正常情況下，體內同時存在促炎因子和抗炎因子，其中促炎因子有腫瘤壞死因子-α(TNF-α)，白細胞介素-1β(IL-1β)，白細胞介素-6(IL-6)，白細胞介素-2(IL-2)等，抗炎因子有白細胞介素-4(IL-4)，白細胞介素-10(IL-10)等。NRDS時肺損傷因素導致肺泡中巨噬細胞激活，釋放大量促炎因子，激活炎癥級聯，引起肺泡上皮細胞，血管內皮細胞損傷甚至凋亡，造成進一步肺損傷[4]。研究發現促炎因子越高的NRDS患兒預后越差，提示促炎因子可能與NRDS相關[5]。本研究以NRDS患兒為研究對象，通過研究NRDS與促炎因子以及抗炎因子的相關性來探討NRDS發病與機體炎性因子的相關性，為闡明NRDS發病機制，開發和制訂有效的治療方案提供參考依據。

1 資料與方法

1.1一般資料選擇2013年2月至2015年12月在開封市兒童醫院就診的NRDS患兒46例。患兒均符合NRDS診斷標準：出生后出現進行性呼吸困難，青紫和三凹征；符合NRDS肺X線變化分級標準：Ⅰ級：雙肺野透亮度降低，見均勻散在的細小顆粒和網狀陰影；Ⅱ級：存在Ⅰ級改變，還存在支氣管充氣征，并延伸至肺野中外帶；Ⅲ級：存在Ⅱ改變，且肺野透亮度進一步降低，心緣，膈緣模糊；Ⅳ級：肺野呈白肺，支氣管充氣征更加明顯，胸廓擴張良好，橫隔位置正常。排除標準：依從性差的患兒；小于胎齡兒；存在新生兒敗血癥，新生兒硬腫癥的患兒。選擇同時期同科室的正常新生兒46例為對照組，對照組和NRDS組患兒的性別比例，平均胎齡等一般資料差異無統計學意義。根據胸片結果對NRDS病情進行分級，Ⅰ、Ⅱ級為輕度組31例，Ⅲ、Ⅳ級為重度組15例。本研究得到了開封市兒童醫院醫學倫理委員會批準。患兒近親屬對本次研究知情同意并簽署了知情同意書。

1.2樣本采集納入標準的研究對象入院后采集靜脈血3 mL，室溫靜置30 min，3 000 r/min，離心4 min，分離血清，置于-80 ℃保存備用。

1.3檢測血清炎性因子水平使用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測血清IL-1β，IL-6，TNF-α水平。檢測步驟大致如下：(1)先取試劑盒中攜帶的標準品，按說明書配成不同濃度，做標準曲線；(2)將樣品加入酶標板中，每孔100 μL；(3)將酶標板放入培養箱，37 ℃孵育90 min；(4)棄去反應液；(5)每孔加入含有IL-1β、IL-6、TNF-α的生物素工作液 100 μL，將酶標板放入培養箱，37 ℃孵育60 min；(6)棄去反應液，用洗滌液清洗3次；(7)每孔加入親和素-過氧化物酶復合物工作液 100 μL，將酶標板放入培養箱，37 ℃孵育30 min；(8)棄去反應液，用洗滌液清洗5次；(9)每孔加入顯色液90 μL，37 ℃孵育20 min；(10)每孔加入終止液10 μL；(11)在450 nm處測定吸光度值，根據濃度曲線算出樣品濃度。

2 結果

2.1新生兒血清炎性因子水平結果顯示NRDS組患兒血清IL-1β和IL-6明顯高于對照組，差異有統計學意義(t=12.774、8.373，均P=0.000)，兩組TNF-α比較差異無統計學意義(t=1.527,P=0.130),見表1。

表1 新生兒血清炎性因子水平

2.2新生兒血清炎性因子與呼吸窘迫相關性分析Pearson分析顯示，IL-1β與NRDS病情呈正相關(r=0.47，P<0.05)，IL-6與NRDS病情呈正相關(r=0.42，P<0.05)。

3 討論

肺泡表面活性物質缺乏是NRDS發病的主要因素。肺泡表面活性物質由肺泡上皮Ⅱ型細胞產生和分泌[6]。肺泡上皮Ⅱ型細胞是肺中非經典免疫細胞，能產生多種炎性因子，參與肺部的炎癥反應。研究發現肺泡表面活性物質也能調節肺中炎性因子水平[7]。所以研究認為肺泡表面活性物質缺乏引起的肺部炎性因子水平異常也是導致NRDS發病的因素之一[8]。本研究為了驗證炎性因子與NRDS的關系，比較NRDS患兒和正常病人的血清IL-1β，IL-6，TNF-α水平，并把NRDS病情嚴重程度與炎性因子水平進行相關性分析，結果顯示NRDS組患兒血清IL-1β和IL-6明顯高于對照組，兩組TNF-α差異無統計學意義，NRDS病情與IL-1β和IL-6呈正相關。本研究結果再次驗證炎性因子與NRDS發病和病情嚴重程度相關，炎性因子可能通過激活炎癥反應，引起肺損傷，導致NRDS病情進一步加重。

綜上所述，NRDS患兒血清IL-1β，IL-6明顯升高，與NRDS病情嚴重程度關系密切，聯合檢測IL-1β，IL-6對NRDS病情評估具有重要意義。