月季花揮發油的提取及其β-環糊精包合物的初步研究

2019-02-13 13:22:54張敏娜王光輝丁瑞芳王利濤

上海醫藥 2019年1期

張敏娜王光輝丁瑞芳王利濤

摘要目的：研究月季花揮發油的最佳提取工藝并對其β-環糊精包合物進行初步研究。方法：采用水蒸氣蒸餾法提取月季花中揮發油，以揮發油得率為指標，采用L9（34）正交試驗優化最佳提取工藝；采用飽和水溶液-超聲法制備揮發油β-環糊精包合物并用顯微鏡法和紅外光譜法對包合物鑒別。結果：揮發油最佳提取工藝條件為A3B1C3，即采用粗粉，加入8倍量的水，浸泡6 h，提取10 h；經顯微鏡法和紅外光譜法分析，月季花揮發油包合前后具有明顯不同的特征。結論：本提取工藝簡單、可行，可為月季花揮發油新制劑的開發提供科學依據。

關鍵詞月季花揮發油正交試驗 β-環糊精

中圖分類號：R284.2 文獻標志碼：A 文章編號：1006-1533（2019）01-0062-04

Extraction of volatile oil from Rosa chinensis Jacq and primary study on the inclusion compound of β-cyclodextrin*

ZHANG Minna**， WANG Guanghui， DING Ruifang， WANG Litao

（Pharmaceutical College， Jining Medical University， Shandong Rizhao 276826， China）

ABSTRACT Objective： To optimize the extraction technology of volatile oil from Rosa chinensis Jacq and to study its inclusion compound of b-cyclodextrin. Methods： Volatile oil was extracted from Rosa chinensis Jacq by steam distillation and its optimal extraction process was selected using the yield of volatile oil as the index by L9（34） orthogonal test. β-cyclodextrin inclusion compound of the volatile oil was prepared by saturated aqueous solution ultrasonic method and identified by microscopy and infrared spectroscopy. Results： The optimal process for volatile oil extraction was as follows： using coarse powder， 8-fold water， soaking for 6 h， extracting for 10 h. The analysis by microscopy and infrared spectroscopy showed that the inclusion of volatile oil from Rosa chinensis Jacq had distinct characteristics before and after inclusion. Conclusion： This technology is simple and feasible， can provide a scientific basis for the development of new preparation of the volatile oil from Rosa chinensis Jacq.

KEy WORDS Rosa chinensis Jacq； volatile oil； orthogonal experiment； β-cyclodextrin

月季花為薔薇科植物月季（Rosa chinensis Jacq.）的干燥花，全年均可采收，主要含有黃酮類、酚酸類和揮發油等成分[1-3]，具有活血調經，疏肝解郁之功效[4]。近年來，對月季花的研究主要集中在化學成分的提取分離、同科植物鑒別及藥理作用研究上[5-7]，對揮發油提取工藝的研究較少。為了有效提取月季花中揮發油，本文采用水蒸氣蒸餾法，以揮發油得率為評價指標，考察粉碎度、加水倍數、提取時間和浸泡時間等因素對揮發油得率的影響，通過正交試驗優選月季花揮發油最佳提取工藝。由于揮發油易揮發、性質不穩定，在制劑或貯存時易損失，從而影響成品質量，因此，本文采用b-環糊精包合技術，將其制成包合物，為月季花揮發油新制劑的開發提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 儀器

揮發油測定器（揮發油量管5 ml，北京玻璃儀器廠）；KDM型調溫電熱套（山東甄城華魯電熱儀器有限公司）；電子天平（北京賽多利斯天平有限公司）；IR Tracer-100紅外光譜儀（日本島津公司）；VMB1100顯微鏡（蘇州景通儀器公司）；DH-202電熱恒溫干燥箱（天津市福元銘儀器有限公司）；HW.SY11-K電熱恒溫水浴鍋（北京長風儀器公司）；FW135中草藥粉碎機（天津泰斯特儀器有限公司）。

1.2 藥材與試劑

月季花購自東營市康美藥業，由濟寧醫學院中藥教研室付英杰副教授鑒定為真品。正己烷、無水乙醇、b-環糊精均為分析純；水為娃哈哈純凈水。

1.3 方法

1.3.1 揮發油的提取及揮發油得率測定

稱取月季花100 g置圓底燒瓶中，加水適量，浸泡適當時間，從揮發油測定器上方加正己烷1.0 ml，照《中國藥典》揮發油測定法甲法操作[8]，回流提取一定時間，然后靜置5 min，開啟測定器下端活塞，收集正己烷溶液，水浴揮去正己烷，精密稱定揮發油重量。揮發油得率（%）=揮發油重量（g）/月季花重量（g）×100%[9]。

1.3.2 單因素試驗

根據預實驗結果選擇粉碎度、加水倍數、提取時間和浸泡時間4個因素并設置相關水平，考察各因素水平對揮發油得率的影響。

1.3.3 正交試驗因素水平設計

根據單因素試驗結果，浸泡時間對揮發油得率影響較小，為節省時間，選擇浸泡6 h，以粉碎度（A）、加水倍數（B）和提取時間（C）為考察因素，每個因素3個水平，按L9（34）正交表設計試驗，因素水平見表1，以揮發油得率為考察指標，優選揮發油最佳提取條件。

1.3.4 月季花揮發油包合物制備

采用飽和水溶液-超聲法制備月季花揮發油的b-環糊精包合物[10]。制備β-環糊精飽和水溶液，取月季花揮發油乙醇溶液2 ml緩慢滴入到飽和溶液中（飽和溶液體積︰揮發油乙醇溶液體積=6︰1），超聲1 h，置冰箱冷藏24 h，抽濾、洗滌、干燥，得白色粉末狀包合物。

2 結果

2.1 單因素試驗

結果表明，揮發油得率隨粉碎度的減小先增后減；隨加水倍數的增大先增后減，在加水倍數為4～8倍時，揮發油得率增加較快，加水倍數大于8開始減小；隨提取時間的延長揮發油得率在4～8 h增加較快，但8 h以后趨于平穩；浸泡時間在6 h以上揮發油得率變化不明顯（圖1）。

2.2 正交試驗結果及分析

正交試驗結果及分析見表2、3。

由表2、3可知，各個因素對月季花揮發油得率的影響程度由大到小依次為：A>C>B，即粉碎度>提取時間>加水倍數。其中，粉碎度對提取率有顯著性影響（P<0.05），最終確定月季花揮發油的最佳提取工藝為A3B1C3，即采用粗粉，加入8倍量水，浸泡6 h，提取10 h。

2.3 提取工藝驗證

按A3B1C3進行3次平行試驗驗證最優工藝條件，測得揮發油得率分別為0.336%、0.329%和0.331%，平均得率為0.332%，RSD為1.1%，表明此提取工藝穩定，重復性好。

2.4 包合物的驗證

2.4.1 顯微鏡法

取月季花揮發油包合物和空白β-環糊精包合物制備水裝片，置顯微鏡下觀察（10×10倍），二者有明顯差異（圖2），說明揮發油包合物已經形成。

2.4.2 紅外光譜法

取月季花揮發油、β-環糊精、包合物、揮發油與β-環糊精的物理混合物各1.0 mg，采用溴化鉀法壓片，測定它們的紅外光譜（圖3）。結果發現，包合物與b-環糊精紅外圖譜雖具有一定相似，但峰不完全相同，包合物在2 840 cm-1和2 920 cm-1有與揮發油相同的峰，而b-環糊精沒有這兩個峰，表明包合物與b-環糊精是兩種不同的物相。揮發油在1 720 cm-1有羰基伸縮振動峰，混合物中也有此峰，但在包合物中消失，說明揮發油包合物已形成。