牛以水樣或糊狀腹瀉為主的疾病的診斷

朱福全

（黑龍江省勃利縣杏樹畜牧獸醫站，黑龍江 勃利 154500）

以水樣或糊狀腹瀉為主的牛傳染病包括牛產腸毒素性大腸桿菌病、副結核病、牛空腸彎曲菌腹瀉、牛輪狀病感染、牛冠狀病毒感染；寄生蟲病包括隱孢子蟲病、前后盤吸蟲病、莫尼茨絳蟲病和犢牛弓首蛔蟲病；普通病主要包括消化不、胃腸炎、淀粉樣變性和結腸炎等疾病。

1 傳染病和寄生蟲病的病原學診斷

1.1 牛產腸毒素性大腸桿菌病

采少量新鮮尸體的小腸前段腸黏膜或內容物，常接種于伊紅美藍瓊脂培養基上，挑選有金屬光澤、紫色帶黑心菌落進行生化反應鑒定。用已知多價和單價O抗血清及單價黏附素抗血清鑒定分離菌的血清型，之后再做腸毒素測定，以確定致病性。

1.2 副結核病

小川氏培養基上需氧培養，生長緩慢，常需6～8周或更長時間才能生長小菌落。常用抗酸染色鏡檢方法，取糞便中的黏液、血絲，加3倍量的0.5%NaOH液，混勻，55℃水浴乳化30 min，以4層紗布濾過，取濾液以1 000 r·min-1離心5 min，去沉渣后，再以3 000～4 000 r· min-1離心30 min，去上清，取沉淀物涂片，用抗酸染色鏡檢，本菌為紅色，常呈叢狀。這兩種方法中有一種為陽性結果，可確診本病。

1.3 牛空腸彎曲菌腹瀉

取腹瀉糞便直接接種于改良Camp-BAP瓊脂培養基，在一個大氣壓的85%N2、10%CO2和5%O2的混合氣體環境條件下，37℃或25℃進行分離培養，經生化試驗鑒定分離菌。

1.4 牛輪狀病毒感染

一般在腹瀉開始24 h內采取小腸內容物或糞便，經高速和超速離心濃縮病毒后，進行檢查，常用的方法有電鏡法、酶聯免疫吸附試驗等。還可將小腸或腸內容物涂片，用已知牛輪狀病毒熒光抗體做直接熒光試驗以及多重RTPCR鑒定病毒。必要時將病料接種于MA-104細胞進行病毒分離培養。

1.5 牛冠狀病毒感染

用電子顯微鏡從腹瀉便中直接觀察病毒粒子，或用牛冠狀病毒熒光抗體從糞便中檢出本病毒。必要時將病料接種于BEK-1或HRT-8細胞進行病毒分離培養，用已知牛冠狀病毒抗血清做病毒中和試驗鑒定分離的病毒。

1.6 牛隱孢子蟲病

可采用飽和蔗糖溶液漂浮法收集糞便中的卵囊，再用1 000倍的油鏡檢查，可見到圓形或卵圓形的卵囊，內含有4個裸露的子孢子和1個殘體。還可采用改良的酸性染色法，制成蟲體抹片，染色，鏡檢，隱孢子蟲卵囊被染成紅色，此法檢出率較高。還可采用間接免疫熒光法，隱孢子蟲卵囊以熒光抗體染色后顯示蘋果綠熒光，極易辨認，敏感性高達100%，特異性97%，此法目前已成為國外診斷隱孢子蟲病最常用的方法之一。死后診斷時取病變部位或刮取消化道黏膜抹片染色，或采用病理切片，姬姆薩染色，或制成電鏡樣本，鑒定蟲體。對可疑病例可采用實驗動物感染加以確診。

1.7 牛前后盤吸蟲病

對成蟲引起的疾病可采用反復水洗沉淀法進行糞便檢查，檢出大量蟲卵即可確診。對童蟲引起的疾病，在生前診斷要結合臨床癥狀、分析流行病學資料做出判斷，必要時可進行尸體剖檢，根據其病變和檢出的大量童蟲而確診。

1.8 牛莫尼茨絳蟲病

在患牛糞便中檢到黃白色孕卵節片，形似煮熟的米粒，將孕節侮涂片檢查時，可見到灰白色、特征性的蟲卵即可確診。未發現節片時，用飽和鹽水浮集法檢查糞便，可發現蟲卵。如果患牛癥狀明顯，但未檢出蟲體或蟲卵，可能是蟲體尚未成熟，此時可采用診斷性驅蟲方法。死后剖檢，在小腸內可見到大量蟲體和相應的病變。

1.9 犢牛弓首蛔蟲病

采用飽和鹽水漂浮法進行蟲卵檢查，檢出大量的蟲卵即可確診。死后剖檢在小腸找到犢牛弓首蛔蟲或在血管、肺臟找到移行期幼蟲也可確診。

2 普通病的實驗室檢查

2.1 消化不良

血液學變化不明顯，但可見低血鈣，代謝酸中毒。

2.2 胃腸炎

血、尿檢驗結果明顯有變。發病初期，白細胞總數增多，中性粒細胞比例增大，核型左移，出現多量桿狀和幼稚型（增生性左移）；發病后期，白細胞總數明顯減少。由于機體長時間脫水和循環系統衰竭，而出現相對性紅細胞增多癥指征，包括血液濃稠，血沉減慢，紅細胞壓積容量增高（＞40%）。尿蛋白質含量增多，腎上皮細胞以至各種管型也有改變。

2.3 酮病

尿液、乳汁和血中酮體含量增高，尿呈酸性。血糖降低，堿貯下降，多數血脂升高。臨床病理檢查，血酮水平＞20 mg·dL-1，血糖含量＜50 mg·dL-1，并且呈現明顯癥狀的，稱為臨床酮病。血酮水平為10～20 mg·dL-1，但無明顯臨床癥狀的，稱為亞臨床酮病。原發性酮病時，血糖為20～40 mg·dL-1（正常是50 mg·dL-1），血酮10～100 mg·dL-1（正常為10 mg·dL-1）。繼發性酮病時，血糖常＞40 mg·dL-1，血酮很少超過50 mg·dL-1。尿酮差異很大，正常可達70 mg· dL-1，酮病時，約達80～1 300 mg· dL-1。乳酮較穩定，酮病時平均值達40 mg·dL-1正常為3 mg·dL-1）。目前，國內多采用酮粉法，國外多采用試紙法定性檢測牛乳中酮體陽性，作為監測泌乳早期牛群亞臨床酮病的依據。