基層牧區(qū)羊布魯氏桿菌病的檢測與預(yù)防

傲騰其木格

（烏拉特中旗川井蘇木農(nóng)牧業(yè)服務(wù)中心，內(nèi)蒙古烏拉特中旗 015321）

世界動物衛(wèi)生組織（OIE）將布病列為B類動物疫病，我國將布病列為二類動物疫病。

1 病原

布魯氏桿菌（brucella）為不可運動的小球桿菌，革蘭氏染色呈陰性，大小為0.6～1.5μm×0.5～0.7μm，散在分布，無芽孢及鞭毛，在條件不利時有形成莢膜的能力。本菌難以著色，姬母薩染色呈紫色。本菌為需氧兼性厭氧菌，對營養(yǎng)要求高，在普通培養(yǎng)基上生長較差。生長最佳溫度為37℃，pH為6.6～7.4。

布魯氏桿菌屬目前共有六個種，即馬耳他布魯氏桿菌（Brucella melitensis）、流產(chǎn)布魯氏桿菌（Br.abortus）、豬布魯氏桿菌（Br.suis）、沙林鼠布魯氏桿菌（Br.neotomae）、綿羊布魯氏桿菌（Br.ovis）和犬布魯氏桿菌（Br.canis）。習(xí)慣上稱馬耳他布魯氏桿菌為羊布魯氏桿菌，流產(chǎn)布魯氏桿菌為牛布魯氏桿菌。

本菌不產(chǎn)生外毒素，但有毒性較強的內(nèi)毒素。不同菌種的菌株之間毒力差異較大，一般來說，羊布魯氏桿菌毒力最強，豬布魯氏桿菌次之，牛布魯氏桿菌較弱。各型布魯氏桿菌雖有其主要的宿主動物，但普遍存在宿主轉(zhuǎn)移現(xiàn)象。

本菌對外界環(huán)境的抵抗力較強，在水和土壤中能存活72～114d，在糞尿中存活45d，在乳內(nèi)能生存60d，在冷暗處的胎兒體內(nèi)可活六個月。

但對濕熱較敏感，60℃30min、70℃5～10min可殺死本菌。對消毒劑抵抗力不強，1～3%石炭酸、2～3%煤酚皂液、0.1%升汞、2%苛性鈉溶液，1h可殺死本菌；1～2%甲醛溶液3h或5%新鮮石灰溶液兩小時也可殺死本菌，0.1%新潔爾滅5min內(nèi)可將其殺死。

2 流行病學(xué)

2.1 易感動物

布病可感染多種動物，布魯氏桿菌主要會引起對應(yīng)動物的布病，也可發(fā)生交叉感染，自然感染主要侵害羊、牛和豬。羊、牛和豬布魯氏桿菌均能引起人感染布病，但以感染羊布魯氏桿菌后發(fā)病最嚴重，豬次之，牛最輕。通常母畜比公畜更易感，成畜比幼畜更易感。

2.2 傳染源

病畜及帶菌動物為布病主要的傳染源。病母畜在流產(chǎn)時，布魯氏桿菌會大量隨流產(chǎn)胎兒，胎衣、胎水和陰道分泌物排出。同時，布魯氏桿菌還能通過乳汁、精液、糞便排出污染環(huán)境[6]。

2.3 傳播途徑

布病的主要傳播途徑為消化道、生殖道（交配）和皮膚與粘膜（布魯氏桿菌可通過正常無損傷的皮膚粘膜引起感染）。

2.4 流行特點

初次妊娠的母畜易感染發(fā)病，大多數(shù)只發(fā)生一次流產(chǎn)。在老疫區(qū)，發(fā)生流產(chǎn)的較少，多數(shù)為發(fā)生子宮炎、乳房炎、關(guān)節(jié)炎、胎衣不下及久配不孕的病畜。在新疫區(qū)，孕畜均發(fā)生流產(chǎn)，呈暴發(fā)性流行[7]。

2.5 臨診癥狀及病理變化

2.5.1 臨診癥狀

布病潛伏期為兩周至半年。妊娠母畜的主要癥狀為流產(chǎn)。流產(chǎn)多發(fā)生于妊娠第6～8個月（牛）、第3～4個月（羊）、第4～12周（豬）。流產(chǎn)前主要表現(xiàn)為陰唇和陰道粘膜紅腫，從陰道流出灰白色或淺褐色黏液，乳房腫脹，泌乳量減少，繼而發(fā)生流產(chǎn)。有時會無先兆而突然發(fā)生流產(chǎn)。流產(chǎn)胎兒多為死胎，弱胎，多數(shù)病畜流產(chǎn)后還會伴隨胎衣不下（牛）或從陰道流出紅褐色惡臭分泌物，惡臭往往持續(xù)1～2周，如不伴發(fā)慢性子宮炎，即可自愈。公畜發(fā)生睪丸炎和附睪炎，表現(xiàn)為睪丸腫大，有熱痛反應(yīng)，非妊娠畜，常發(fā)生滑液囊炎、膿腫和關(guān)節(jié)炎，表現(xiàn)關(guān)節(jié)腫脹，疼痛，喜臥，跛行[7]。

2.5.2 病理變化

流產(chǎn)的胎兒，皮下、肌間有漿液性浸潤，胸、腹腔積有淡紅色液體，內(nèi)混有纖維素，脾、肝和淋巴結(jié)腫脹，有的可見到炎性壞死灶，第四胃中有淡黃色或白色粘液樣絮狀物，胃腸和膀胱粘膜有小出血點。胎衣呈黃色膠樣浸潤，有些部位附有纖維素絮狀物和膿液，有的胎膜增厚，有出血點，絨毛葉充血，腫大，或呈黃褐色，上附灰色或黃綠色污穢的滲出物和纖維素。

母畜子宮粘膜變厚，上附有分泌物，與絨毛膜之間有淡黃色不結(jié)的滲出物和膿塊，絨毛膜上多數(shù)有出血點。

病公畜精囊內(nèi)可能有出血點和壞死灶，在睪丸和附睪丸有炎性壞死灶和化膿灶，有時整個睪丸發(fā)生壞死。慢性病例的睪丸和附睪，由于結(jié)締組織增生，變硬。此外病畜關(guān)節(jié)和關(guān)節(jié)周圍呈現(xiàn)慢性炎癥腫脹[8]。

3 布病的危害

3.1 對動物的危害

主要侵害動物的淋巴系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)。臨床表現(xiàn)為母畜流產(chǎn)、胎兒成活率降低，且常引起子宮炎。對公畜來講，常引起睪丸炎和附睪炎，造成無精癥影響生殖能力。布病一年四季均可發(fā)生，多以夏秋季節(jié)發(fā)病率較高，常呈地方性流行[9]。

3.2 對人的危害

人類普遍易感染布病，感染后會出現(xiàn)比家畜更為嚴重的癥狀。人感染布病，潛伏期最短的僅三天，少數(shù)患者潛伏期可長達數(shù)月或一年以上，多數(shù)潛伏期在7～60天，平均潛伏期為2～3周，在臨床上可分為急性期和慢性期。急性發(fā)作時，大多表現(xiàn)為波浪熱，感覺多汗、身體困倦、疲乏無力，食欲減少，關(guān)節(jié)和肌肉疼痛難忍，不能勞動，頭痛、坐骨神經(jīng)痛，出現(xiàn)皮疹、淋巴結(jié)腫大、肝臟腫大及肝功能異常，同時還會影響生育功能。女性患者會發(fā)生卵巢炎、輸卵管炎及子宮內(nèi)膜炎，孕婦可導(dǎo)致流產(chǎn)，個別嚴重者可能會導(dǎo)致死亡。人類感染布病將會嚴重影響生活、工作。該病病情頑固，重在預(yù)防。慢性病例主要的病情長達1年以上，也可無明顯急性病史，發(fā)現(xiàn)時主要表現(xiàn)為疲乏無力、低熱、出汗、抑郁、頭痛、煩躁[10]。長期與家畜打交道的人群更易感染，如飼養(yǎng)管理人員、屠宰場工作人員、獸醫(yī)人員、實驗室檢測人員等，此類人群應(yīng)更注重布病防護工作。

4 布病的診斷

包括臨診、流行病學(xué)、病理學(xué)、細菌學(xué)和免疫學(xué)診斷。布病依據(jù)臨床癥狀、病理變化、流行病學(xué)可做出初步診斷，確診需進一步做血清學(xué)診斷或病原分離。

4.1 臨診及流行病學(xué)診斷

妊娠母畜發(fā)生流產(chǎn)，且多發(fā)生于初次妊娠母畜，多數(shù)只流產(chǎn)一次，流產(chǎn)后常伴隨胎衣不下，子宮炎，屢配不孕等癥狀，有的還有關(guān)節(jié)炎表現(xiàn)，公畜主要表現(xiàn)睪丸炎癥狀[11]。

4.2 病理解剖學(xué)診斷

胎兒皮下水腫，體腔有淡黃色液體，實質(zhì)器官變性壞死，胃腸出血，胎衣、絨毛葉、子宮粘膜出血、壞死和糜爛[12]。根據(jù)以上臨診診斷、流行病學(xué)、病理學(xué)特點可懷疑為布病。確診需進行細菌學(xué)及免疫學(xué)檢查。

4.3 細菌學(xué)診斷

取胎衣、絨毛葉滲出物，胎兒胃內(nèi)容物，水腫液、胸、腹水等，制成涂片，用柯茲羅夫斯基染色法染色、鏡檢，可見單個，成對或成堆存在的紅色球桿狀細菌，其他細菌被染成綠色或藍色。

4.4 免疫學(xué)檢查

（1）血清凝集實驗具有很高的特異性和敏感性。常用的方法有試管凝集反應(yīng)，平板凝集反應(yīng)和虎紅平板凝集反應(yīng)。

（2）補體結(jié)合反應(yīng)本法具有很高的特異性，但其操作復(fù)雜，現(xiàn)在很少使用。

（3）全乳環(huán)狀實驗此法操作簡便，敏感性高，可用于混合牛乳的普查，判定牛群是否存在布病。

（4）變態(tài)反應(yīng)可用于檢查犢牛、羊和豬，在牛尾根皮內(nèi)注入0.2ml流產(chǎn)布氏桿菌菌素，陽性者24h內(nèi)出現(xiàn)紅腫，陰性者無任何變化。

通常病畜首先出現(xiàn)凝集反應(yīng)抗體，并消失較早，其次出現(xiàn)補體結(jié)合反應(yīng)抗體，消失較晚，最后出現(xiàn)變態(tài)反應(yīng)，持續(xù)時間最長。如凝集反應(yīng)陽性，而補體結(jié)合反應(yīng)陽性或陰性而變態(tài)反應(yīng)陰性時，說明布氏桿菌病的發(fā)生為初期階段，凝集反應(yīng)呈陰性而補體結(jié)合反應(yīng)、變態(tài)反應(yīng)均呈陽性時，說明布氏桿菌病的發(fā)生已到停止階段，凝集反應(yīng)和補體結(jié)合反應(yīng)同時呈現(xiàn)陰性而變態(tài)反應(yīng)為陽性時，說明布氏桿菌的發(fā)展已進入康復(fù)階段[13]。

根據(jù)布氏桿菌病所具有的免疫學(xué)特性，在診斷時需根據(jù)具體情況應(yīng)用凝集反應(yīng)，補體結(jié)合反應(yīng)和變態(tài)反應(yīng)方法，進行檢查以確定畜群中的布氏桿菌病畜的情況。

5 布病公共衛(wèi)生

人感染布病，主要人群為畜牧獸醫(yī)工作人員和飼養(yǎng)管理人員，其次為屠宰加工人員、實驗室檢測人員和經(jīng)常食用畜產(chǎn)品的人員。

由于經(jīng)常接觸病畜及其產(chǎn)品，特別是在助產(chǎn)時接觸胎兒、胎衣、羊水、陰道分泌物等引起感染，也可通過食入被污染的食物而感染發(fā)病。此類人群在與病畜接觸時應(yīng)注意做好自身的防護工作，避免直接接觸流產(chǎn)畜的胎兒、羊水、胎衣、陰道分泌物等物；注意做好消毒工作，對相關(guān)工作人員應(yīng)該進行定期體檢，發(fā)現(xiàn)發(fā)病人員時應(yīng)及時治療并調(diào)離工作崗位等。

6 實驗室檢測

6.1 實驗原理

實驗室常用虎紅平板凝集試驗（RBPT）檢測布病。其原理為利用細菌、立克次氏體等相應(yīng)抗原抗體可以在體外發(fā)生特異性結(jié)合并呈現(xiàn)肉眼可見的現(xiàn)象，用已知抗原（或抗體）檢測未知抗體（或抗原）。

6.2 實驗材料

可調(diào)節(jié)取樣器、布病虎紅平板凝集試驗抗原、待測血清、虎紅平板凝集試驗檢測卡片（1×1cm，50格）

待測血清、布病虎紅平板凝集試驗抗原由內(nèi)蒙古阿拉善盟阿左旗獸醫(yī)工作站提供。

待測血清應(yīng)新鮮，無明顯蛋白凝塊、溶血現(xiàn)象和腐敗氣味。抗原使用前應(yīng)充分搖勻，若抗原被污染或出現(xiàn)搖不散的凝集塊不可使用。

6.3 實驗方法

吸取待測血清30μl滴于虎紅平板凝集試驗卡片，換槍頭吸取30μl抗原于待測血清旁，用槍頭混勻，不停晃動混合液，在4min內(nèi)觀察現(xiàn)象并記錄。

6.4 判定方法

若在4min內(nèi)出現(xiàn)大的凝集片或小的顆粒則為陽性，若為顏色均一的淡粉色渾濁液體，則為陰性。陽性血清需進行試管凝集實驗復(fù)檢。

7 布病的預(yù)防措施

7.1 無病地區(qū)的預(yù)防措施

堅持自繁自養(yǎng)，避免引入病畜。必須引入時，應(yīng)從無病地區(qū)選購并進行嚴格的檢疫，確認為健康無病畜時，才能與當(dāng)?shù)匦笕夯烊猴曫B(yǎng)。每年應(yīng)對畜群進行檢疫和疾病監(jiān)測，以便及時發(fā)現(xiàn)病畜，可用血清凝集實驗進行檢查。畜群發(fā)生原因不明的流產(chǎn)時，應(yīng)立即隔離病母畜，對流產(chǎn)物污染的環(huán)境和用具進行徹底消毒，對流產(chǎn)胎兒和母畜進行血清學(xué)檢驗，如為布氏桿菌病陽性則按病畜處理。

7.2 污染地區(qū)的防疫措施

（1）定期檢疫。對畜群進行定期檢疫，對檢出的病畜要嚴格隔離飼養(yǎng)，嚴禁與健畜接觸，引入的牲畜也要進行檢疫，健康種公畜才能作為種用。

（2）檢疫凈化。對病畜群，進行反復(fù)多次檢疫，病畜淘汰，陽性畜隔離飼養(yǎng)，繼續(xù)利用，逐步淘汰，陰性繼續(xù)檢疫，直至全群均為陰性。如陽性畜數(shù)量少，也可淘汰處理。

（3）培養(yǎng)健康幼畜。如陽性畜數(shù)量大，母畜可用無病種公畜的精液人工授精，母畜產(chǎn)前、產(chǎn)后要對母畜體軀和產(chǎn)房環(huán)境進行徹底消毒，幼畜出生后，立即與母畜隔離，喂初乳5～7d，以后喂健康乳或消毒乳，一年內(nèi)檢疫2～3次，如檢疫均為陰性，則可送入健康畜群飼養(yǎng)，如為陽性，則應(yīng)淘汰。

（4）免疫接種。對布病常在的畜群，應(yīng)進行免疫接種進行免疫預(yù)防。

（5）加強消毒和獸醫(yī)衛(wèi)生措施。對被污染的牛舍、運動場、飼槽、水槽、奶具和管理用具，要及時消毒，特別是對產(chǎn)房要注意消毒，對流產(chǎn)胎兒、羊水、胎衣、陰道分泌物等要經(jīng)消毒后妥善處理，糞便墊草燒毀。

8 討論和建議

針對陽性血清，應(yīng)及時找到對應(yīng)羊并進行撲殺，同時做好環(huán)境消毒等的防護工作；實驗過程中所使用的器械應(yīng)注意消毒，一次性器具及血清應(yīng)及時銷毀。作為基層牧區(qū)要想在布病防控方面取得較好的效果需要做到以下幾點：

（1）鄉(xiāng)鎮(zhèn)、蘇木政府重視布病防控，明確嘎查對養(yǎng)殖戶的監(jiān)督責(zé)任。

（2）牲畜提倡自繁自養(yǎng)，禁止從外地調(diào)入。確實要調(diào)入的，按相關(guān)法律法規(guī)進行申報、檢疫、隔離、觀察。

（3）領(lǐng)導(dǎo)以身作則，任何領(lǐng)導(dǎo)不以任何方式為調(diào)入的牲畜免檢開綠燈。

（4）種畜必須持有健康檔案，定期檢測疫病。

（5）消毒滅源。督促養(yǎng)殖戶清理圈舍，在6～8月的高溫季節(jié)，雇傭灑水車對養(yǎng)殖環(huán)境進行消毒。

（6）強制撲殺程序與分工確定。

（7）充分發(fā)揮指定通道作用。只有經(jīng)過指定通道進入的動物及動物產(chǎn)品，才是合法進入，否則給與處罰。

（8）經(jīng)常宣傳個人防護意識。如接羔季節(jié)不去勢；工作期間不吃喝、抽煙；不將胎衣、流產(chǎn)胎兒喂狗；禁止流浪貓狗出入養(yǎng)殖場。

（9）堅持布病疫點回訪。

（10）地理環(huán)境。