冉紅志 張勇俊 趙仙苗 張朝鵬
(1.陜西省動物疫病預防控制中心,陜西西安 710000;2.西安邦騰農牧公司,陜西西安 710000)
PRV屬于皰疹病毒科(Herpesviridae)、豬皰疹病毒屬,病毒粒子為圓形,直徑150~180 nm之間,囊膜表面有長約8~10 nm呈放射狀排列的纖突。
PRV只有一種血清型,但不同毒株在毒力和生物學特性等方面存在差異,基因組為線狀雙鏈DNA,平均胞嘧啶與鳥嘌呤含量高達74%,具有典型的皰疹病毒基因組結構特征,由長獨特區(Unique long region,UL)、短獨特區(Unique short region,US)以及位于US兩側的末端重復序列(Terminal repeat,TR)和內部重復序列(Internal repeat,IR)組成[1]。
PRV基因組序列測定發現由72個閱讀框組成,可編碼70種蛋白,目前已發現和命名的有gB、gC、gD、gE、gG、gH、gI、gK、gL、gM、gN11種。這些糖蛋白都是病毒粒子的結構成分(除gG糖蛋白外)。其中gD與細胞受體結合后,使結合狀態從可逆狀態進入不可逆狀態,為PRV侵入細胞發生感染所必需。編碼gB、gE、gH、gI、gL和gM、gC糖蛋白促使病毒快速粘附于細胞表面,gB是主要病毒抗原,在PRV進入中起關鍵作用。gG基因是偽狂犬病毒的非必需基因,它的缺失與插入對病毒在體內增值無影響。糖蛋白gB、gC、gD在免疫誘導方面最為重要。偽狂犬病病毒的毒力是由幾種基因協同調控,其中TK是PRV最主要的毒力基因[2]。
豬偽狂犬病的臨診表現主要取決于感染病毒的毒力和感染量,以及感染豬的年齡。其中,感染豬的年齡是最主要的。與其他動物的皰疹病毒一樣,幼齡豬感染偽狂犬病病毒后病情最重。
新生仔豬感染偽狂犬病病毒會引起大量死亡,臨診上新生仔豬第1天表現正常,從第2天開始發病,3~5 d內是死亡高峰期,有的整窩死光。同時,發病仔豬表現出明顯的神經癥狀、昏睡、嗚叫、嘔吐、拉稀,一旦發病,1~2 d內死亡。剖檢主要是腎臟布滿針尖樣出血點,有時見到肺水腫、腦膜表面充血、出血。15日齡以內的仔豬感染本病者,病情極嚴重,發病死亡率可達100%。仔豬突然發病,體溫上升達41℃以上,精神極度委頓,發抖,運動不協調,痙攣,嘔吐,腹瀉,極少康復。斷奶仔豬感染偽狂犬病病毒,發病率在20%~40%左右,死亡率在10%~20%左右,主要表現為神經癥狀、拉稀、嘔吐等。成年豬一般為隱性感染,若有癥狀也很輕微,易于恢復。主要表現為發熱、精神沉郁,有些病豬嘔吐、咳嗽,一般于4~8 d內完全恢復。懷孕母豬可發生流產、產木乃伊胎兒或死胎,其中以死胎為主無論是頭胎母豬還是經產母豬都發病,而且沒有嚴格的季節性,但以寒冷季節即冬末春初多發[3]。
豬偽狂犬病的另一發病特點是表現為種豬不育癥。近幾年發現有的豬場春季暴發偽狂犬病,出現死胎或斷奶仔豬患偽狂犬病后,緊接著下半年母豬配不上種,返情率高達90%,有反復配種數次都屢配不上的。此外,公豬感染偽狂犬病病毒后,表現出睪丸腫脹、萎縮,喪失種用能力。
豬偽狂犬病是指不同階段豬受到偽狂犬病毒的侵入,造成自身免疫力低下,表現出不同癥狀的一種具有傳染性的疾病。豬偽狂犬病主要是通過直接和間接兩種接觸方式進行傳播,且此疾病的病癥最為明顯,傳染率最高。通常情況下,偽狂犬病毒通過鼻液、飛沫、分泌物等多種途徑排出體外,然而病豬的病毒傳播可依靠鼻部接觸、飲水等途徑,這些方式的接觸均導致偽狂犬病毒散播在豬場內的各個不同豬群中。當偽狂犬病毒侵入公豬身體后,偽狂犬病毒在精液中一般可存活12d之久。當豬場人員采用此精液對母豬進行人工授精,極易導致母豬感染病毒,最終出現妊娠不成功。豬場工作人員可以采用血清學檢測方法對豬場內的豬群進行檢查,繼而篩選出患有偽狂犬病毒的陽性豬。引起豬群免疫力低下的主要原因是由于豬場內沒有合理、安全的免疫程序。其中較為常見的是由于豬場內工作人員未掌握母源抗體的消失時間規律,從而對仔豬的免疫時間無法進行確定,所以當仔豬體內來自母豬的抗體在高滴度時,通常對仔豬進行肌肉注射,繼而達到接種的目的,然而母源抗體將影響仔豬的免疫效果[4]。豬偽狂犬病傳播的速度較快,且陽性率可達100%。當整個豬場內個別豬群發現陽性野毒抗體,同時伴有咳嗽時,在以后的2~3周內整個豬場都有可能被病毒感染。
豬偽狂犬病病毒株感染豬群后,哺乳仔豬、保育豬、生長育肥豬都有非常典型的豬偽狂犬病的病變。主要表現為扁桃體水腫、化膿、出血、潰瘍甚至形成偽膜,肝臟、脾臟形成非常典型的黃白色壞死點或白色壞死結節病變,肺臟彌漫性點狀出血,腸道出血,腎出血,腦出血、水腫等特別典型的病理變化。尤其以臨床上發現哺乳仔豬發生病毒性心肌炎為主要特征,心肌呈白色條紋狀壞死[5]。
2.4.1 分子生物學診斷
分子生物學診斷主要包括核酸雜交(DNA探針技術)、普通PCR診斷和實時熒光定量PCR監測等。其中,DNA探針技術利用DNA探針敏感性高和特異性強的特性,可以活體直接檢測,而且快捷簡便;普通PCR診斷樣本用量少、檢測速度快,一般5 h就可以檢測出結果。實時熒光定量PCR檢測更加敏感,特異性相對其他方法更強,可以對潛伏期或者亞臨床感染疾病進行有效的診斷[6]。
2.4.2 血清學診斷
血清學診斷多種血清學方法可用于偽狂犬病的診斷,目前常使用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)、微量血清中和試驗(MSN)、間接免疫熒光試驗(IFA)和乳膠凝集試驗(LA)等進行診斷[7]。其中血清中和試驗的特異性、敏感性都是最好的,并且被世界動物衛生組織(OIE)列為法定的診斷方法。但由于中和試驗的技術條件要求高、時間長,所以主要是用于實驗室研究。酶聯免疫吸附試驗同樣具有特異性強、敏感性高的特點,3~4 h內可得出試驗結果,并可同時檢測大批量樣品,廣泛用于偽狂犬病的臨診診斷。另外,近幾年來,乳膠凝集試驗以其獨特的優點也在臨診上廣泛應用,操作極其簡便,幾分鐘之內便可得出試驗結果。
豬偽狂犬病同流行性乙型腦炎、豬圓環病毒病和豬流感等病的癥狀類似,臨床上需進行鑒別診斷。
(1)對于出現神經癥狀的病例,有木乃伊胎則考慮偽狂犬病;弱胎、死胎的頭蓋骨肥厚者考慮流行性乙型腦炎;對死胎剖檢,前驅皮下水腫、腦膜出血、腦蓋骨出血則懷疑為偽狂犬病,后驅皮下水腫、腦組織出血、溝回間出血則懷疑為流行性乙型腦炎。
(2)豬感染偽狂犬病毒后,其吻突通常有綠豆大小的瘀血斑點,呈紫黑色;病死豬剖檢,腹股溝淋巴結不腫大,表面呈淺紅色或灰色,且腎臟有針尖狀出血點;而圓環病毒病例的吻突部顏色深諳,觸診發涼;軀體皮膚或四肢下部有吉痘樣潰點;病死豬剖檢,腹股溝淋巴結明顯腫大,表面呈白色,且腎臟出現邊沿整齊、綠豆大小的白色壞死灶。
(3)豬流感通常與氣候突變有密切關系,不同年齡的豬均可感染發病,且一般無神經癥狀,采用退熱藥和抗生素類藥可治愈[8]。
豬偽狂犬病尚無有效藥物治療,應以預防為主。遵守科學引種制度,發病果斷隔離或淘汰,制定科學合理的免疫程序,建立嚴格的生物安全體系,采取科學的飼養管理措施,減少各種應激因素,逐步凈化豬場。
由于該病一經感染可潛伏感染,存在隱性帶毒豬,因此,規模豬場應實行自繁自養,培育屬于自己豬場的健康種群,若無特殊情況不要從外面引種(精液),嚴禁從疫區引入。引進種豬、后備豬時,需隔離飼養45 d,期間采血送實驗室檢測,并做好配種前的疫苗免疫及驅蟲工作,血清學檢測確認為健康豬只,方可混群飼養。
一旦發病立即采取隔離措施,檢測確診后,全場緊急免疫,條件允許時,淘汰全部陽性豬。對一切有可能被污染的場所和設施、設備均進行徹底消毒。隔離舍由專業人員飼養,隔離期間禁止外來車輛及人員隨意走動。
(1)后備豬應在配種前實施至少2次偽狂犬疫苗的免疫接種,使用基因缺失弱毒活疫苗。
(2)經產母豬應根據本場感染程度,每年全群普免3~4次,使用滅活苗或基因缺失弱毒活疫苗均可,2次免疫中至少有1次使用基因缺失弱毒苗,陽性率高的豬場,第一次使用基因缺失弱毒活疫苗,第二次使用滅活苗較為穩妥。
(3)哺乳仔豬免疫根據本場豬群感染情況而定。本場未發生過或周圍也未發生過偽狂犬疫情的豬群,可在35 d以后免疫1頭份滅活苗;若本場或周圍發生過疫情的豬群應在3日齡內使用弱毒活疫苗滴鼻免疫,55~65日齡接種弱毒活疫苗1頭份,3周后弱毒活疫苗加強免疫1次。
(4)疫區或疫情嚴重的豬場:3日齡內使用弱毒活疫苗滴鼻免疫,55-65日齡接種滅活疫苗1頭份,3周后弱毒活疫苗加強免疫1次。
豬場要科學選址,其內部各區間的距離適當,相互獨立,防止交叉感染,各飼養管理人員禁止串舍,并做好人員、車輛、豬群、用具以及各種器械的日常消毒工作。消滅豬場中的鼠類,嚴格控制犬、貓、鳥類和其他禽類進入豬場,嚴格控制人員來往,并做好消毒工作及血清學監測等,這樣對本病的防制也可起到積極的推動作用。
全進全出,分階段分日齡飼養,根據不同階段的豬只營養需求給予新鮮的飼料供給。保證飲水的清潔和充足。做好圈舍衛生、通風、夏天降溫和冬天保溫等工作,讓豬只處于舒適的環境,減少豬群應激。在豬只轉群、疫苗免疫前添加維生素及黃芪多糖等,提高主動免疫力,及被動免疫應答能力。
(1)引進陰性后備豬,做好配種前疫苗免疫工作。
(2)定期監測豬群抗體情況,制定合理免疫程序。
(3)做好生物安全措施,切斷傳播途徑。
(4)杜絕犬、貓、雞及其他鳥類進入豬場,定期進行場內滅鼠、滅蠅工作。