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豬圓環病毒3型研究進展分析

2019-02-12 13:40:15楊敬迪
獸醫導刊 2019年10期
關鍵詞:檢測方法

楊敬迪

(安丘市畜牧局,山東安丘 262100)

1 病原

2016年,美國堪薩斯州立大學科研職員操縱宏基因組測序技術,從患有皮炎腎病綜合征(PDNS)和繁殖障礙的母豬及其流產胎兒體內初次判定出 PCV3。由于是新發現的病原體,PCV3對各種豬的致病性,對于豬圓環病毒相關疾病(PCVAD)的作用,及其現有商品化 PCV2的各種疫苗對它免疫效力等,等待下一步探究。

2 分類地位

pcv3在分類上屬圓環病毒。2016之前,豬圓環病毒(PCV)全世界認可的只有PCV1和PCV2基因型。PCV2是多系統衰竭綜合征(PMWS)主要引起斷奶仔豬,這是PDNS密切相關,豬呼吸道疾病綜合征(PRDC)、繁殖障礙、增生性壞死性肺炎(PNP)、腸炎,都是此類疾病。通過對 PCV3全基因組及部分基因組序列進化分析,發現我國 PCV3包括3a和3b兩個亞群,在這種情況下,3a和美國pcv3參考應變中的一個分支,有著非常密切的同源演化。

3 病原學特征

3.1 形態特征及理化特性

豬圓環病毒是最小的動物病毒之一。豬圓環病毒3型是一種環狀DNA病毒,病毒顆粒無外膜,直徑17~20 nm。豬環對環境有較強的屏障作用,可在酸性條件下(pH=3)長時間存活。無血凝,耐熱性好。PCV對有機溶劑如氯仿、碘或酒精敏感,但對苯酚,氫氧化鈉和氧化劑更敏感。由于pcv3 pcv2病毒屬于同一個家族,物理化學性質相似,同樣的方法可以用消毒劑來消毒處理環境和運輸工具。

3.2 基因組結構及功能

pcv3基因組總長度為2000 bp,包括5個主要的開放閱讀框(ORF),分別編碼Rep蛋白,一種蛋白,和一個特定的ORF3蛋白對PCV同源。Cap protein是PCV的主要結構蛋白,可誘導實驗動物產生特異性免疫應答。PCV2和pcv3 Cap蛋白的同源性僅為30,而他們之間的交錯免疫保護的可能性較低。在湛洋的2個研究表明,在結構和抗原性pcv3 PCV2和蓋之間有顯著性差異。因此,沒有交叉免疫保護和pcv3 PCV2之間。

3.3 培養特性

目前,豬腎細胞(PK-15,SK)和豬睪丸細胞(ST)是常用的PCV2的分離和培養基。據推測,pcv3可以在細胞增殖。

4 流行病學與致病性

雌雄不同、年齡不一和各種不同的育種豬可以感染pcv3,但懷孕母豬和初產豬更易感染。pcv3可引起母豬沒有吃癥狀,皮膚泛起多灶性丘疹、雀斑和淺表性皮炎,輸送能力下降,妊娠母豬繁殖障礙,如流產、出生缺胳膊少腿、出生死亡、木乃伊、弱仔。即使那些病情嚴重的人也會死于急性死亡。。患病仔豬多出現器官系統的功能性混亂。PCV3能夠感染不同大豬的腦(包括死胎大腦),肺(同上)、淋巴結、扁桃體、精液和血清檢測。一系列結果表明 PCV3存在于豬的不同組織中,且存在垂直傳播風險。

5 檢測技術研究進展

5.1 分離培養

病毒分離和診斷是診斷流行性疾病最準確的方法。由于成年感染動物缺乏臨床癥狀,病毒難以掌握,影響了病毒的分離,因此病毒通常是從流產胎兒或死胎的組織樣本中分離出來的。

5.2 分子生物學檢測技術

5.2.1 PCR

國內專家專為pcv3cap基因的藥引,建立了迅速、敏捷、一對一的PCR檢測方法。通過使用這種方法,168名可能得病的從河北豬場進行了檢測,得病樣品9份進行檢測,表明河北有pcv3感染豬。徐朋麗等也建立了一個pcv3 PCR檢測方法,對pcv3最低檢出量為61.9份/L,利用該法對河南省112份臨床樣品進行檢測,發現 PCV3陽性率為33.9(38/112),表明 PCV3在河南已有流行。賀會利等PCR技術在廣西某豬場仔豬腹瀉pcv3從樣品檢測,并pcv3也被檢測到。PCR方法提供了用于監控豬場和在中國pcv3防治pcv3盛行的技術支持。

5.2.2 熒光定量 PCR

Palinski等利用實時熒光定量 PCRpcv3從流產母豬生下來的小豬的檢測,pcv3抗原和淋巴結在豬的皮膚佳能發現,腎臟和肺,表明pcv3在美國非常普遍,有可能是母豬不生小豬的主要得病原因。熒光定量PCR方法的建立,使pcv3更快速、簡便、經濟和實用的檢測,為PCV3感染的早期判斷提供了有力的手段支持。

6 小結

目前對于 PCV3的研究尚處于剛開始的階段,需要盡快展開相關檢驗技術研究,快速、一對一pcv3病原學和血清學檢測方法有助于pcv3菌株的分離和測定,為開展疫苗研發以及動物回歸試驗奠定了基石,從而保護我國生豬產業健康發展。預防和控制pcv3,必須堅持"早發現、早報告、早隔離的原則,早期診斷、早期抑制"。要強化物體安全,提高有關調查人的防范意識,嚴格執行消毒程序,對殺蚊拍蠅要重視,保護環境,保持衛生,定期滅鼠。

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