液基細胞學聯合HPV分型在宮頸癌早期篩查中的意義

喻朝霞，潘陶強，黃啟梅，張云榮，張 潤，鄧士杰

（安徽省安慶市第一人民醫院病理科，安徽 安慶 246000）

我國是宮頸癌的高發地區，發病率僅次于乳腺癌，嚴重威脅著婦女的健康和生命。宮頸癌是唯一可早期發現并實施預防的惡性腫瘤，主要病因是高危型人乳頭瘤病毒（HPV）的持續感染。因此，降低已婚女性的HPV的感染可通過HPV檢測進行。目前液基細胞學檢查（TCT）是宮頸細胞學的主要篩查方法[1]，但需要依靠醫生的主觀判斷來確認結果，且宮頸癌細胞發生浸潤性改變現象較晚，無法在宮頸癌早期診斷中進行應用。因HPV-DNA檢測能夠診斷早期宮頸宿主細胞感染HPV，本研究采用液基細胞學技術（TCT）聯合HPV分型進行宮頸病變篩查，旨在探討TCT聯合HPV分型檢測對早期宮頸癌篩查的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年5月～2018年5月本院收治的宮頸癌的患者4000例，性生活史超過2年，年齡20～64歲，平均（33.2±10.6）歲，無妊娠，無其他婦科疾病，無宮頸手術史，處于非月經期；均同意進行TCT和HPV檢測。

1.2 方法

采集標本前24小時內禁止性生活；標本采集前3天內禁止陰道沖洗或使用陰道用藥。所有病例均使用一次性取樣器，將專用毛刷置入宮頸口，在鱗狀上皮以及宮頸內鱗柱交界處采集細胞，連續刷3～5圈后取標本，將宮頸分泌物裝入專用的細胞保存液收集管中，并做好標記。

1.2.1 TCT檢測

于宮頸口及頸管部用宮頸刷收集脫落上皮細胞，并置于ThinPrep保存液中，送至我院病理科進行細胞學檢查。檢查結果分為：含有無明確診斷意義的非典型鱗狀上皮細胞（ASC-US）、低度鱗狀上皮內病變（LSIL）、高度鱗狀上皮內病變（HSIL）和鱗狀細胞癌（SCC）。

1.2.2 HPV檢測試劑

DNA提取：將保存于收集管中的宮頸分泌物放入1.5 mL離心管中，加入裂解液150 μL，充分震蕩混勻，在100℃金屬浴中加熱10 min，13000 rpm離心10 min，取中間層DNA溶液待用。采用HPV基因分型（23型）檢測試劑盒，將提取的DNA采用聚合酶鏈式反應（PCR）擴增，在已固定核酸探針的低密度基因芯片上進行雜交、孵育、顯色，根據膜條上藍色斑點顯現的位置讀取該位置標注的基因型信息，對HPV感染進行分型（23型）。HPV基因分型（23型）檢測試劑盒，其中包括5種低危型HPV：81、43、42、11、6和18種高危型HPV：83、82、73、68、66、59、58、56、53、52、51、45、39、35、33、31、18、16。

1.2.3 病理學檢測

將TCT和HPV-DNA其中兩種檢測均為陽性或一種檢測為陽性者進行陰道鏡取活檢查，病理組織結果分為宮頸癌和宮頸上皮內瘤變（CIN）、炎癥或正常，其中CIN-Ⅰ相當于TCT診斷中的LSIL，CIN-Ⅱ和CIN-Ⅲ相當于TCT診斷中的HSIL。

1.3 統計學方法

上述數據應用SPSS 20.0軟件分析，計量資料與計數資料分別以()及%表示，組間比較分別采用t及x2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 TCT檢測

TCT檢測中正常或炎癥者、ASCUS、LSIL、HSIL及SCC患者HPV感染率分別為26.03%（880/3380）、59.43%（189/318）、82.35%（140/170）、85.11%（80/94）、100.00%（38/38）。

2.2 病理學檢測結果分析

病理檢測正常或炎癥者、CIN-Ⅰ、CIN-Ⅱ與CIN-Ⅲ及SCC中，高危型HPV感染率分別為19.62%（650/3312）、79.33%（426/537）、89.38%（101/113）、100.00%（38/38）。

2.3 3種檢查方法結果比較

HPV靈敏度為81.00%（1215/1500），特異度為95.48%（2387/2500），陽性預測值為91.49%(（1215/1328），陰性預測值為89.33%（2387/2672）；TCT靈敏度為65.73%（986/1500），特異度為86.36%（2159/2500），陽性預測值為74.30%（986/1327），陰性預測值為80.77%（2159/2673）；2者聯合靈敏度為86.53%（1298/1500），特異度為95.72%（2393/2500），陽性預測值為92.38%（1298/1405），陰性預測值為92.22%（2393/2595）；TCT聯合HPV-DNA分型檢測的靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值均顯著高于單獨應用TCT，靈敏度、陰性預測值顯著高于單獨HPV-DNA分型檢測（P＜0.01）。

3 討 論

據統計數據顯示，我國每年的宮頸癌新發病例約占全世界發病總數的25%～33%，實施疾病防治與控制疾病惡變顯得至關重要[2]，宮頸癌的發病是一個緩慢進展的過程，大量基礎與臨床研究已證實[3]，宮頸癌病變是一個單向的病理生理學發展過程，早期干預治療能夠抑制癌變組織發展演變為宮頸癌的可能。普通宮頸癌患者由癌前病變發展至宮頸癌通常會經歷10～20年，若在病變過程中得到規范的、合理的早期篩查，根據篩查結果進行對癥治療，通常能逆轉疾病的發展[4]，因此早期診斷是預防宮頸癌發生的重要環節。目前臨床常見的檢查手段有液基細胞學，HPV檢測，陰道鏡檢查以及宮頸組織活檢。宮頸刮片涂片準確性可達到97%～100%，但有研究指出其敏感性僅為29%～56%[5]，因此臨床檢查中經常會出現假陰性，導致漏診誤診。病理學檢測的另一大問題是存在檢查盲區，主觀性較強[6]。針對巴氏涂片的缺點及不足，研究者對制片技術進行了一定的改良修正發明了TCT檢測，21世紀初被廣泛推廣于臨床使用。對取材器進行保留，使標本保留最大程度的完整性，同時將標本完全置于保存液中，避免制片過程對標本的損害。本研究所選取的4000例患者中，TCT檢測結果，隨著宮頸癌的病變HPV陽性檢出率升高；TCT聯合HPV-DNA分型檢測的靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值均顯著高于單獨應用TCT，靈敏度、陰性預測值顯著高于單獨HPV-DNA分型檢測。

綜上所述，TCT聯合HPV-DNA檢測結果準確度均優于單獨應用其中一種方法的檢測率，因此值得在臨床上推廣應用。