蔬菜中有機磷農藥分光光度檢測法的研究

渠柏艷　張哲

摘 要：研究的目的主要針對有機磷農藥殘留檢測方法的探討，可以找到一種操作簡單、耗時短、價格低廉、實驗結果良好，穩定性較好、可行性高，以解決現有檢測方法的高成本、難操作等問題。本研究利用化學發光及分光光度法，以有機磷農藥樂果為標的物，通過對磷鉬藍比色法的反應條件進行改進和優化，以磷酸二氫鉀作為磷標準溶液，優化溶液中鹽酸、鉬酸銨、無水乙醇、L-抗壞血酸的用量，建立磷濃度與吸光度線性關系。在此基礎上，研究了有機磷農藥轉化為正磷酸的條件，并將其用于蔬菜中有機磷農藥的定量檢測。

關鍵詞：磷鉬藍比色法；農殘檢測；分光光度法；化學發光

近年來由于農藥的大量使用致使食品的農藥殘留問題倍受關注， 提高農藥殘留分析檢測技術是解決農藥殘留問題的前提。有機磷類農藥因為高速有效、廣譜適用等特點，被廣泛應用，但它高殘留、毒性強同時殘留期較長、會在動物體內產生蓄積等問題，導致有機磷農藥現在雖然已經被國家禁止使用，但它的殘留檢測仍是農產品檢測重要的一環。

目前常用的農殘檢測方法有氣相色譜法[1，2]、酶抑制法[3，4]、熒光光度法[5-7]等，但這些方法檢測成本高、不易操作等，所以普遍的農殘檢測需要一種簡便、快速的方法，更有利于推廣使用。

1.主要儀器與材料

在721E型紫外-可見分光光度計進行分光光度法檢測，利用LDZX-50KB立式壓力蒸汽滅菌器將有機磷成分轉化為無機磷，在HH6-數顯恒溫水浴鍋進行反應。采用50%樂果農藥（乳油）為主要檢測對象。

2. 研究方法的原理

鉬藍比色法測定磷化合物，在酸性條件下，鉬酸銨與正磷酸結合，生成淡黃色的磷鉬酸銨，其高價的磷鉬酸銨具有氧化性，可被抗壞血酸還原成藍色化合物。生成的鉬藍在特定的波長下有最大吸收。基于此原理，采用鉬藍比色法，測定磷化合物含量。樂果農藥中的有機磷經高溫高壓，與強氧化劑K2S2O8反應，將有機磷化合物轉化為無機磷化合物。本實驗通過磷鉬藍比色法測定磷濃度，進而轉換為農藥濃度，實現對蔬菜中含磷有機農藥（極性農藥）的檢測。

3.最大吸收波長的確定

按先后順序依次加入磷標準溶液，5%鉬酸銨溶液，無水乙醇，搖勻，溶液成淡黃色后，加入HCl， L-抗壞血酸，室溫靜置，在600nm—900nm范圍內，每隔10nm測一次吸光度，做λ—A曲線，該實驗條件下，最大吸收波長（λmax）為730nm。基于此，本實驗所有數據皆在730nm下測定所得。

鉬藍比色法實驗條件的確定

根據先后順序依次加入磷標準溶液，5%鉬酸銨溶液，無水乙醇，搖勻，溶液成淡黃色后，加入HCl，再加 L-抗壞血酸，在某溫度放置一段時間，在最大吸收波長處測吸光度，做V1—A曲線，確定最優條件，通過單因素和正交實驗，最終確定無水乙醇用量為4.0mL、HCl（1：1）為0.5mL、5%鉬酸銨用量為0.7mL、L—抗壞血酸為3.0mL。

有機磷轉化率的確定

以樂果農藥為例，取樂果溶液，分別加入K2S2O8定容，經高壓、121℃、恒溫30min，使樂果轉化為正磷酸。取出后用流水快速冷卻，用NaOH溶液調節PH值為6-7。取轉化液，按比例加入鉬酸銨、無水乙醇、HCl、L-抗壞血酸，定容，60℃恒溫水浴，其轉化率最大為84.6%。

農藥檢出限的測定

在樂果農藥的轉化率為84.6%時，加入不同量的樂果農藥，按最優條件實驗，按比例加入4%的K2S2O8溶液。經轉化后，按比例加入顯色劑，60℃恒溫水浴30min，流水冷卻后，測吸光度值，以此確定該方法對樂果農藥的檢出限為0.05mg/L。

加標回收率

將洗凈稱重的卷心菜加入無水硫酸鈉，研碎、抽濾、脫色獲得蔬菜汁，經檢測計算得到該方法對樂果農藥的回收率為83.5%。說明該方法在實際檢出環境中，能很好的給予檢出。

綜上所述，本文利用化學發光和分光光度計的方法建立了一個操作簡單且不需要昂貴的儀器設備，特別適用于蔬菜中含磷極性有機農藥的檢測方法。

參考文獻：

[1]宮兆晶.基質固相分散-氣相色譜法測定油菜籽中有機磷農藥殘留檢測技術研究[R].中國農業科學院碩士論文，2007：1-42.

[2]易承學?薛淵?徐虹等.毛細管氣相色譜法測定金針菇中16種農藥殘留[J].食品工業.2015，36（8）：276—279.

[3]王小瑜?孫霞?王相友等.不同來源酶快速檢測有機磷農藥的靈敏度比較[J].農業機械學報.2008，39（9）：82-86.

[4]孟玲?翁霞?劉長江.利用植物酯酶快速檢測有機磷農藥殘留的研究進展[J].農藥.2006，45（5）：307-308.

[5]張國勝.三元雜多酸體系快速測定有機磷農藥的研究[R].河南大學碩士論文，2008：1-73.

[6]程定璽?杜鋼鋒?畢新慧等.鈣黃綠素熒光猝滅法測定辛硫磷[J].河南師范大學學報（自然科學版）.2010，38（4）：174-177.

[7]程定璽?杜剛鋒.以鈣黃綠素-Pd2+作為熒光探針-熒光分光光度法測定樂果[J].理化檢測（化學分冊）.2009，45（7）：855-857.

基金項目： 遼寧省教育廳項目《基于微流控芯片技術的食品中極性相反的多種農殘同提方法研究》（項目編號L015424 ）