非器質(zhì)性失眠癥患者氧化應(yīng)激水平研究

王新源，陳 強(qiáng)*，潘 燕，李 玲，佘 琴

非器質(zhì)性失眠癥（失眠癥）是以頻繁而又持續(xù)的入睡困難和/或睡眠維持困難并導(dǎo)致睡眠感不滿(mǎn)意為特征的睡眠障礙［1］。近年來(lái)，氧化應(yīng)激與失眠的相互關(guān)系正逐漸成為人們研究的一個(gè)方向。氧化應(yīng)激是指機(jī)體在遭受各種有害刺激時(shí)，體內(nèi)高活性分子如活性氧自由基（reactive oxygen species，ROS）和活性氮自由基（reactive nitrogen species，RNS）產(chǎn)生過(guò)多，超出機(jī)體氧化物的清除能力，使得氧化與抗氧化系統(tǒng)失衡，細(xì)胞進(jìn)入氧化應(yīng)激狀態(tài)，從而繼發(fā)細(xì)胞損傷［2］。研究表明，大腦的自由基在日間醒覺(jué)狀態(tài)時(shí)進(jìn)行積累，在睡眠期間進(jìn)行清除［3］。睡眠期間過(guò)多自由基的清除是通過(guò)減少自由基的生成及增加內(nèi)源性抗氧化機(jī)制完成的，但氧化應(yīng)激與失眠癥之間的關(guān)系目前仍未闡明。本研究旨在分析失眠癥患者氧化應(yīng)激水平的變化，從而探討其是否與失眠癥的發(fā)病存在一定的關(guān)系。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選擇2015年1月—2017年3月在新疆精神衛(wèi)生中心睡眠醫(yī)學(xué)科就診的失眠癥患者78例作為失眠癥組。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合國(guó)際疾病分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)編碼（ICD-10）有關(guān)失眠癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］；（2）匹茲堡睡眠質(zhì)量指數(shù)（Pittsburgh Sleep Quality Index，PSQI）總分≥7分［5］；（3）年齡18～60歲；（4）認(rèn)可并簽署知情同意書(shū)，且能夠理解和遵守研究的要求。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）腦器質(zhì)性精神障礙者；（2）精神活性物質(zhì)或非成癮物質(zhì)所致精神障礙者；（3）嚴(yán)重的軀體疾病或神經(jīng)系統(tǒng)疾病者；（4）近期有創(chuàng)傷或近1周內(nèi)有感染或發(fā)熱者；（5）其他睡眠疾病及特殊的短睡者。

選擇同期新疆精神衛(wèi)生中心健康職工76例作為對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡 18～60歲；（2）PSQI總分＜7分；（3）認(rèn)可并簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）患有嚴(yán)重軀體疾病者；（2）患有符合ICD-10診斷標(biāo)準(zhǔn)的精神障礙或既往有精神障礙病史者；（3）現(xiàn)在或既往有物質(zhì)依賴(lài)或物質(zhì)濫用者；（4）三代直系親屬中有精神障礙者。本研究方案通過(guò)新疆精神衛(wèi)生中心倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 研究方法

1.2.1 入組診斷及量表評(píng)定 所有入組人員均經(jīng)2名睡眠專(zhuān)科的高年資醫(yī)師檢查，按ICD-10中失眠癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］同時(shí)診斷，PSQI評(píng)分按規(guī)范操作同時(shí)評(píng)定。PSQI由23個(gè)條目構(gòu)成，分為7個(gè)成分，包括睡眠質(zhì)量、入睡時(shí)間、睡眠時(shí)間、睡眠效率、睡眠障礙、催眠藥物及日間功能障礙，每個(gè)成分按0～3分計(jì)分，各成分評(píng)分相加為PSQI總分，總分0～21分，總分越高提示睡眠質(zhì)量越差，臨床以PSQI總分≥7分為睡眠障礙［5］。采用自制一般資料調(diào)查問(wèn)卷收集兩組的一般資料，包括性別、年齡、吸煙情況、飲酒情況。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)室檢查

1.2.2.1 血清樣本 所有受試者在晨起空腹安靜狀態(tài)下，用高壓蒸汽滅菌后的10 ml試管抽血樣品至少5 ml，室溫靜置，3 h內(nèi)離心，離心半徑15 cm，2 000 r/min離心20 min，分離血清2～3 ml，置-80 ℃醫(yī)用冰箱備用。

1.2.2.2 試劑及檢測(cè)方法 過(guò)氧化氫酶（hydrogen pemxidase，CAT），型號(hào)A007-1試劑盒；谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-PX），型號(hào)A005試劑盒；丙二醛（malondiadehycle，MDA），型號(hào)A003-1試劑盒；超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD），型號(hào)A001-3試劑盒；均購(gòu)自南京建成科技有限公司。所有樣本由同一人測(cè)定，測(cè)定過(guò)程嚴(yán)格按照試劑盒提供的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行操作，每個(gè)樣本測(cè)定3次，取平均值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。呈正態(tài)分布的計(jì)量資料以s）表示，方差齊時(shí)組間比較采用t檢驗(yàn)，方差不齊時(shí)組間比較采用t'檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以相對(duì)數(shù)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 失眠癥組與對(duì)照組一般資料比較 兩組性別、年齡、吸煙情況、飲酒情況比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05，見(jiàn)表1）。

2.2 失眠癥組與對(duì)照組PSQI評(píng)分比較 失眠癥組PSQI總分及各成分評(píng)分均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001，見(jiàn)表 2）。

2.3 失眠癥組與對(duì)照組氧化應(yīng)激指標(biāo)比較 失眠癥組CAT、GSH-PX、SOD的活性水平低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）；失眠癥組MDA的活性水平與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05，見(jiàn)表3）。

表3 失眠癥組與對(duì)照組氧化應(yīng)激指標(biāo)比較s）Table3 Comparison of oxidative stress indices between nonorganic insomnia group and control group

表3 失眠癥組與對(duì)照組氧化應(yīng)激指標(biāo)比較s）Table3 Comparison of oxidative stress indices between nonorganic insomnia group and control group

注：CAT=過(guò)氧化氫酶，GSH-PX=谷胱甘肽過(guò)氧化物酶，MDA=丙二醛，SOD=超氧化物歧化酶；a為t'值

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3 討論

目前認(rèn)為慢性失眠是過(guò)度警覺(jué)性障礙，與下丘腦-垂體-腎上腺素軸過(guò)度活動(dòng)有關(guān)［6］。在生理狀態(tài)下，氧化應(yīng)激與抗氧化酶防御系統(tǒng)處于平衡狀態(tài)。研究表明，氧化應(yīng)激是抑郁癥神經(jīng)元的凋亡、神經(jīng)退行性改變、神經(jīng)元可塑性改變的重要原因［7］；氧化應(yīng)激可導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生線(xiàn)粒體等多方面的變化，修飾堿基，誘導(dǎo)其氧化損傷，造成復(fù)制及自我修復(fù)時(shí)發(fā)生錯(cuò)配［8］。脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞具有毒性作用，可誘發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病［2］。抗氧化酶防御系統(tǒng)包括CAT、GSH-PX及SOD，這些酶通過(guò)清除自由基保護(hù)機(jī)體免遭過(guò)氧化損傷，有清除氧化物、保護(hù)機(jī)體的作用。

既往研究顯示氧化應(yīng)激反應(yīng)的影響因素很多，如感染、過(guò)敏、應(yīng)激等軀體情況［9］。自由基及抗氧化酶水平的變化與年齡、生活習(xí)慣（如吸煙、飲酒）等因素有關(guān)［10］。本研究?jī)山M性別、年齡、吸煙情況、飲酒情況無(wú)差異，可排除這些因素的干擾。動(dòng)物睡眠剝奪實(shí)驗(yàn)表明，睡眠剝奪與氧化應(yīng)激關(guān)系密切，睡眠剝奪可引起大腦的氧化損傷。由于細(xì)胞膜存在高容量的不飽和脂肪酸和較低的抗氧化能力，大腦對(duì)氧化損傷極為敏感［11］。短期（1～2周）的睡眠剝奪與任何腦組織的蛋白氧化及脂質(zhì)過(guò)氧化均沒(méi)有關(guān)系［12-13］。大腦能對(duì)應(yīng)激做出有效的反應(yīng)，從而可以避免氧化損傷［14］。大腦細(xì)胞抗氧化成分水平的降低，可能引起外周血液抗氧化成分水平的降低［15］。本研究失眠癥組患者失眠時(shí)間均在4周以上，結(jié)果表明除MDA外，CAT、GSH-PX及SOD的活性水平均降低，提示大腦存在氧化損傷。而失眠癥組PSQI總分及各成分評(píng)分均高于對(duì)照組，提示失眠可能是大腦氧化損傷的危險(xiǎn)因素，充分的睡眠有益于大腦功能恢復(fù)。

本研究存在一些不足：（1）缺乏多導(dǎo)睡眠（PSG）的篩查，此方法可對(duì)失眠癥患者的臨床診斷提供客觀依據(jù)。（2）本研究結(jié)果未排除可能導(dǎo)致失眠癥患者氧化應(yīng)激水平升高的其他潛在影響因素，如大腦氧化損傷與失眠是否存在雙向關(guān)系，是否可通過(guò)降低顱內(nèi)氧化水平改善睡眠。

表1 失眠癥組與對(duì)照組一般資料比較Table1 Comparison of general personal data between nonorganic insomnia group and control group

表2 失眠癥組與對(duì)照組PSQI評(píng)分比較s，分）Table2 Comparison of PSQI score between nonorganic insomnia group and control group

表2 失眠癥組與對(duì)照組PSQI評(píng)分比較s，分）Table2 Comparison of PSQI score between nonorganic insomnia group and control group

注：PSQI=匹茲堡睡眠質(zhì)量指數(shù)；a為t值

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作者貢獻(xiàn)：陳強(qiáng)負(fù)責(zé)文章的構(gòu)思與設(shè)計(jì)、研究的實(shí)施與可行性分析、文章的質(zhì)量控制及審校、論文撰寫(xiě)及修訂；王新源、潘燕負(fù)責(zé)數(shù)據(jù)整理、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理、結(jié)果的分析與解釋?zhuān)焕盍帷①芮儇?fù)責(zé)數(shù)據(jù)收集。

本文無(wú)利益沖突。