高通量測序在新生兒遺傳性疾病診治中的應用進展

王暉 天津市水閣醫院 （天津 300090）

內容提要： 高通量測序技術是近些年發展起來的新型DNA測序技術，對于新生兒遺傳性疾病的診治具有明顯的優勢。因此本文對近些年關于高通量測序在新生兒遺傳性疾病診治中的應用進展進行綜述，以期提高臨床新生兒遺傳性疾病的整體醫療水平。

高通量測序又被稱之為下一代測序或者大規模平行測序，是近些年發展起來的新型DNA測序技術[1]。該技術可以同時對上百萬的DNA分子開展平行測序，已經成為當年遺傳性疾病診斷的主要方法，其主要技術優勢為高通量和敏感性[2]。該技術為新生兒遺傳學疾病的診治提供了新思路，有助于對那些疑似遺傳性疾病的危重新生兒提高診療準確性和有效性。本文對近些年關于高通量測序在新生兒遺傳性疾病診治中的應用進行綜述如下。

1.高通量測序技術

美國ABI高通量測序技術的核心為四種基于熒光標記的寡核苷酸的連接反應。在高通量測序之前，需要構建文本庫以及采用乳化PCR進行擴增，以8個堿基熒光探針混合物作為連接測序的底物，樣品DNA按照序列位置被探針所標記，在測序過程中DNA連接酶首先選擇與模板相匹配的探針進行連接，引發該探針位置處產生熒光信號。高通量測序的優點為讀長僅為50～75bp，精確度高達Q40，對于單核苷酸多態性（SNP）檢測以及基因組重測序特別適用[3]。同時ABI高通測序儀在測序過程中對于每個堿基判讀重復兩次，有效降低了原始數據讀取錯誤，采用連接酶取代傳統的聚合酶，有效降低了堿基錯配失誤，同時在測序過程中加入了更換引物，能夠有效提高測序精度。……