探討LncRNA遺傳多態性及其與結直腸癌風險和預后的相關性

周春燕 黃可可 任妹 劉劍榮 夏洪嬌

【摘要】 目的：探究并分析LncRNA遺傳多態性與結直腸癌風險和預后的相關性。方法：選取2012年1月-2016年1月本院收治的結直腸癌患者123例，對其進行LncRNA遺傳多態性檢測，并探究其與結直腸癌發病及預后的相關性。此外，根據患者基因檢測結果從中選取50例Loc285194基因高表達患者作為觀察組，50例Loc285194低表達為對照組。觀察并記錄所有患者一般資料，分析結直腸癌預后影響因素與預后的相關性，比較兩組術后并發癥發生情況、患者生存情況。結果：對123例結直腸癌預后影響因素進行單因素分析，可見年齡、手術時間、rs6983267（GG）、Loc285194與結直腸癌的預后有關（P<0.05）。根據多因素分析結果，可見手術時間、rs6983267（GG）、Loc285194與結直腸癌的預后有關（P<0.05），其中手術時間、Loc285194與患者預后有較高相關性（P<0.05），而rs6983267（GG）與結直腸癌預后相關性稍低（P<0.05）。觀察組患者吻合口漏/感染、性功能障礙、復發或者轉移、粘連性腸梗阻、排尿功能障礙發生率均明顯低于對照組（P<0.05）。對照組術后6個月、1年、3年的生存率分別為84.0%、64.0%、42.0%，觀察組患者術后6個月、1年、3年分別為90.0%、82.0%、70.0%，觀察組患者術后1、3年生存率均顯著高于對照組（P<0.05）。結論：手術時間、rs6983267（GG）、Loc285194與結直腸癌的預后有關，其中Loc285194基因高表達的結直腸癌患者預后及術后并發癥發生情況顯著優于Loc285194基因低表達的患者，值得臨床關注。

【關鍵詞】 基因型 結直腸癌 預后

[Abstract] Objective： To explore and analyze the relationship between Lncrna genetic polymorphism and colorectal cancer risk and prognosis. Method： From January 2012 to January 2016， 123 patients with colorectal cancer were selected to detect the genetic polymorphism of Lncrna， and its correlation with the incidence and prognosis of colorectal cancer was explored. In addition， 50 patients with high expression of Loc285194 gene were selected as the observation group and 50 patients with low expression of Loc285194 gene were selected as the control group according to the results of gene detection. The general data of all patients were observed and recorded. The correlation between prognosis factors and prognosis of colorectal cancer of all patients were analyzed. The occurrence of postoperative complications and the survival of two groups were compared. Result： Single factor analysis showed that age， operation time， rs6983267 （GG）， Loc285194 were related to the prognosis of colorectal cancer （P<0.05）. According to the results of multi factor analysis， operation time， rs6983267 （GG）， Loc285194 were related to the prognosis of colorectal cancer （P<0.05）. Among them， the operative time and Loc285194 had a higher correlation with prognosis （P<0.05）， while rs6983267 （GG） had a lower correlation with prognosis of colorectal cancer （P<0.05）.The patients in the observation group had significantly lower incidence of anastomotic leakage / infection， sexual dysfunction， recurrence or metastasis， adhesive intestinal obstruction and urination dysfunction than those in the control group （P<0.05）. After operation 6 months， 1 year and 3 years， the survival rate of the control group was respectively 84.0%， 64.0% and 42.0%， in the observation group， 90.0%， 82.0% and 70.0% respectively. The 1 year and three-year survival rate in the observation group were significantly higher than those of the control group （P<0.05）. Conclusion： The operation time， rs6983267 （GG） and Loc285194 are related to the prognosis of colorectal cancer. The prognosis and postoperative complications of colorectal cancer patients with high expression of Loc285194 gene are significantly better than those with low expression of Loc285194 gene， which deserves clinical attention.

[Key words] Gene typeColorectal Cancer Prognosis

First-authors address： Pingxiang Peoples Hospital， Pingxiang 337000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.32.042

結直腸癌（colorectal cancer，CRC）是我國腫瘤發病率和死亡率分別位列第三位和第五位的常見惡性腫瘤[1]。研究表明CRC是環境因素與相關基因共同交互作用的結果[2]。長鏈非編碼RNA（long noncoding RNA， LncRNA）是一類轉錄本長度超過200個核苷酸、缺乏蛋白編碼功能、結構保守的RNA分子。近年來，LncRNA已經成為腫瘤研究中的“熱點”，特別是在結直腸癌、肝癌和食管癌中大量報道[3-4]。在結直腸癌中，已經鑒定出大量的與之相關的LncRNA基因，如CCAT1、CCAT2、CRNDE、 、LncRNA-PCAT、HOTAIR和MALAT1等。上述LncRNA分子，在結直腸癌組織中呈現時空特異差異表達，發揮著癌基因或抑癌基因作用[5-6]。為此，筆者將100例患者納入研究中，并探究基因多態性與結直腸癌預后的相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年1月-2016年1月本院收治的結直腸癌患者123例。（1）納入標準：①符合第八版內科學中結直腸癌的診斷標準[7];②本身有嚴重呼吸或者循環系統疾病;③所有患者均未合并上呼吸道感染;④無消化系統畸形或者手術史。（2）排除標準：①物質濫用或依賴者;②中途退出本研究者;③對本研究所用藥物過敏者;④各種原因引起的凝血功能障礙者。

1.2 方法 對123例結直腸癌患者進行LncRNA遺傳多態性檢測，并探究其與結直腸癌發病及預后的相關性。此外，根據患者基因檢測結果從中選取50例Loc285194基因高表達患者作為觀察組，50例Loc285194低表達為對照組。觀察并記錄所有患者一般資料（年齡、性別、婚姻狀況、收入情況、文化程度、BMI指數、手術時間、rs6983267、Loc285194表達情況），分析兩組患者結直腸癌預后影響因素與預后的相關性，術后并發癥發生情況、患者生存情況。實驗室檢查：采用PCR-RFLP和DNA測序等方法對以上患者進行基因分型。患者于本院進行手術，術后筆者對其進行連續3年的電話隨訪工作，以獲得患者生存預后資料（術后并發癥發生情況以及術后6個月、1年、3年的生存率），通過連續三年電話隨訪獲得部分患者生存預后資料。利用q-RT-PCR檢測LncRNA和相關基因的表達情況。本研究涉及的基因檢測，全部外包檢測，試劑均購自北京藍派生物技術有限公司。

1.3 預后評價標準 預后良好：術后出現并發癥數量≤2個，或者患者3年后未死亡，將其歸為預后良好組。預后不良：術后出現并發癥數量>2個，或者患者三年內死亡，將其歸為預后不良組。

1.4 統計學處理 使用SPSS 21.0統計學軟件進行數據分析，計數資料以率（%）表示，患者文化程度比較采用方差分析，預后影響高危因素分析采用單因素分析、多因素采用Logistic回歸分析，術后并發癥發生情況、生存情況比較采用字2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組基線資料比較 對照組男27例，女23例;年齡45～65歲，平均（55.5±7.1）歲;體重40～75 kg，平均（60.5±9.3）kg。觀察組男29例，女21例;年齡44～64歲，平均（55.3±7.2）歲;體重41～74 kg，平均（55.1±7.2）kg。兩組基線資料比較，差異均無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 患者預后影響因素單因素分析 對100例結直腸癌患者預后影響因素進行單因素分析，根據單因素分析結果，可見年齡、手術時間、rs6983267（GG）、Loc285194與結直腸癌的預后有關（P<0.05），見表1。

2.3 患者術后預后影響因素Logistic多因素回歸分析 根據多因素分析結果，可見手術時間、rs6983267（GG）、Loc285194與結直腸癌的預后有關（P<0.05），其中手術時間、Loc285194與患者預后有較高相關性（P<0.05），而rs6983267（GG）與結直腸癌預后相關性稍低（P<0.05）。見表2。

2.4 兩組患者術后并發癥發生情況比較 觀察組患者吻合口漏/感染、性功能障礙、復發或者轉移、粘連性腸梗阻、排尿功能障礙發生率均明顯低于對照組，兩組比較差異均有統計學意義（P<0.05），見表3。

2.5 兩組患者生存情況比較 觀察組患者術后

1、3年生存率顯著高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表4。

3 討論

結直腸癌組織中差異表達的LncRNA基因的遺傳變異位點可通過增強或抑制轉錄因子、miRNA靶點的結合能力或改變其空間構象等方式，影響腫瘤組織中LncRNA的表達含量和功能[8-12]。然而，與腫瘤相關的LncRNA遺傳變異相關性研究還僅僅出于起步階段，LncRNA基因的遺傳變異和結直腸癌的關聯報道甚少[13-15]。

Loc285194是一個p53轉錄靶點，Loc285194的異常表達抑制體外和體內腫瘤細胞的生長。同時，這個Loc285194介導的生長抑制在某種程度上歸因于miR-211的特異性抑制。研究發現Loc285194和miR-211間的一個相互抑制;與Loc285194相反，miR-211促進細胞生長[16-17]。而定量PCR實驗和組織微陣列原位雜交檢測再一次證實了Loc285194在結腸癌樣品中的存在下調現象。

本研究中，對100例結直腸癌預后影響因素進行單因素分析，根據單因素分析結果，可見年齡、手術時間、rs6983267（GG）、Loc285194與結直腸癌的預后有關（P<0.05），根據多因素分析結果，可見手術時間、rs6983267（GG）、Loc285194與結直腸癌的預后有關（P<0.05），其中手術時間、Loc285194與患者預后有較高相關性（P<0.05），而rs6983267（GG）與結直腸癌預后相關性稍低（P<0.05）。此結果表明，Loc285194的表達與患者預后呈負相關，Loc285194低表達能有效提示結直腸癌患者預后不良。Bahadir等[18]也在研究中得出相似結論，可能與Loc285194基因的高表達有效抑制了miR-211的表達有關，而miR-211的高表達能促進癌癥因子的表達。觀察組患者吻合口漏/感染、性功能障礙、復發或者轉移、粘連性腸梗阻、排尿功能障礙發生率均明顯低于對照組（P<0.05）。此結果表明，Loc285194高表達患者術后并發癥發生率顯著低于Loc285194低表達患者，提示Loc285194基因的表達與患者預后密切相關，Moossavi等[19]也在研究中得出相似結論。對照組術后6個月、1年、3年生存率分別為84.0%、64.0%、42.0%，觀察組患者術后6個月、1年、3年分別為90.0%、82.0%、70.0%，觀察組患者術后1、3年生存率均顯著高于對照組（P<0.05）。此結果表明，Loc285194高表達患者術后生存率顯著高于Loc285194低表達患者，這在術后1年以后差距更加明顯，Irsan等[20]也在研究中發現，Loc285194高表達患者比Loc285194低表達患者生存時間更長，這可能與Loc285194低表達狀態下，癌癥細胞接觸抑制作用解除有關，而這有利于癌癥細胞的擴散，不利于患者預后。

綜上所述，手術時間、rs6983267（GG）、Loc285194與結直腸癌的預后有關，其中Loc285194基因高表達的結直腸癌患者預后及術后并發癥發生情況顯著優于Loc285194基因低表達的患者，值得臨床關注。

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（收稿日期：2019-08-21） （本文編輯：周亞杰）