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蜂蜜酒釀造工藝的研究進展

2019-01-09 09:29:30雷孟子昂李磊磊繆云根
中國蜂業 2019年11期
關鍵詞:酵母菌

雷孟子昂 李磊磊 繆云根│文

1淮北市第一中學, 淮北 235000; 2浙江大學動物科學學院,杭州 310058

蜂蜜酒是一種傳統的酒精飲料,是由蜂蜜加水稀釋后在適當的酵母作用下發酵而成的一種酒精飲料[1]。蜂蜜酒具有悠久的歷史,被稱為是世界上最古老的酒精飲料,甚至比葡萄酒和啤酒都早幾千年[2]。然而,如今蜂蜜酒卻鮮為人知,并沒有像葡萄酒那樣普及,而且關于蜂蜜酒的釀造工藝出現問題的報道很多,如發酵延遲和停滯,二次發酵,酸度升高、不良異味,導致產品感官品質低,以及產品質量不均一等問題[1,3]。究其原因,傳統蜂蜜生產方式以經驗為主,蜂蜜酒科學研究發展滯后,缺乏相關的科學研究這一因素分不開的[4]。因此,如何采用科學的手段來提高蜂蜜酒的品質,應成為研究的關鍵問題,如開發優良穩定充足的添加劑配方,以及優化發酵條件等釀造工藝,是解決當前蜂蜜酒品質問題的關鍵所在[2]。因此,本綜述旨在分析當前蜂蜜酒釀造工藝中的關鍵環節的研究進展,側重于蜂蜜、酵母的選擇、添加劑的配方,以及蜂蜜酒發酵條件優化等方面,為提高蜂蜜酒的品質提供理論基礎,從而為蜂產品的開發提供理論。

一、蜂蜜酒的背景介紹

蜂蜜酒酒精含量在8%~18%[5]。傳統的蜂蜜酒只是簡單的用水和蜂蜜為原料進行發酵,隨著時代的變遷,蜂蜜酒液衍生出許多種類。根據在蜂蜜酒的添加物不同,蜂蜜酒可以分為以下幾類:添加香料或者藥草一起發酵的metheglin、含果汁的蜂蜜酒melomel、添加香草和香料的蜂蜜酒hippocras和含有高濃度蜂蜜的蜂蜜酒sack mead等[6]。

蜂蜜酒具有悠久的歷史,被稱為最古老的酒精飲料,根據文獻和考古學研究,蜂蜜酒的歷史可追溯到3000年以前[7]。蜂蜜酒的起源最早可追溯到非洲,后來遍及地中海盆地和歐洲,在早期古代文明中發揮了重要作用。蜂蜜酒是凱爾特人、盎格魯-撒克遜人和維京人宗教儀式的重要組成部分,被稱為貴族和神的飲料,提供不朽和知識[8],并被認識具有魔力和治愈能力,甚至可以增加力量,勇氣和生育能力。在中世紀的歐洲,新婚夫婦在家里一個月不外出,新娘制作蜂蜜酒給新郎喝,據說可以強壯身體,提高生育質量。因為“蜂蜜的一個月”即“蜜月”,便產生了蜜月的詞語。在我國,據考證,蜂蜜酒最初記錄在西周周幽王宮宴中,這是在猿酒的啟發下釀制成功的。宋代文學家蘇東坡曾寫詩《蜜酒歌》,記錄蜂蜜酒的釀造過程。明代著名醫家李時珍的《本草綱目》中記載了蜂蜜酒的功效,可以強身健體,養身及治療風疹和風癬等疾病,并提供了蜂蜜酒的釀造方法。

二、蜂蜜酒的研究現狀

蜂蜜酒的原料主要是蜂蜜,由于純蜂蜜含糖量高(滲透壓強),而含氮氣量相對低,所以一般方法酵母菌不適合在蜜汁中發酵,所以蜂蜜酒的釀造受多種因素制約,當前國內外學者對蜂蜜酒進行了不少研究,發現蜂蜜酒成功釀造與原料處理,發酵菌種選育、發酵工藝等方面密切。

1.蜂蜜的選擇

蜂蜜是蜂蜜酒唯一的有機香料和糖的來源,因此蜂蜜成分對蜂蜜酒的最終品質起著重要作用。蜂蜜因產地不同和蜂種不同會在各種成分含量上存在差異,從而影響發酵成功與否,時間長度、色澤、香氣等。

Pereira[1]等在比較了深色蜂蜜(石楠蜜)和淺色蜂蜜(迷迭香蜜)這兩種不同的蜂蜜對產生蜂蜜酒的影響,發現深色蜂蜜(石楠蜜)產生的蜂蜜酒品質更好。

何瑞等通過響應面法優化發酵工藝,測定出了重慶三峽庫區生態7種不同種蜜源的蜂蜜酒的風味組份以及抗氧化性能的差異。具體為通過GC-MS檢測了7種蜂蜜的總共146種揮發性成分以及230種風味物質。蜂蜜酒總抗氧化能力順序從高到低依次為:蕎麥、羅布麻、向日葵、五倍子、益母草、柑橘、洋槐。同時認為柑橘、洋槐、蕎麥是蜂蜜酒釀造最佳蜜源。

由于王漿擁有著優于蜂蜜的保健效果,如穩定血壓,抗癌,調整機體免疫功能,蜂王漿也逐漸成為蜂蜜酒的蜜源選擇之一。查青青等實驗得出了王漿蜂蜜酒的發酵工藝。發現在葡萄酒用高活性干酵母、安琪耐高溫活性干酵母、黃酒專用釀酒高活性干酵母、安琪葡萄酒、果酒專用酵母四種酵母,葡萄酒用高活性干酵母為最適菌種,最適成分劑量為蜂王漿添加量為16g/L,酵母菌株添加量為1.4%,胃蛋白酶添加量為0.6g/L,二氧化硫添加量為30%。

2.酵母菌選擇

蜂蜜中的主要成分是葡萄糖、果糖和蔗糖,都可以為酵母直接利用的發酵底物。具有良好發酵性能的酵母菌株必須耐高溫和高糖,這是進行工業發酵生產的前提。正常情況下,酵母菌有很好耐高溫和高糖的性能,因此要對發酵酵母進行馴化、分離、篩選和培養。然后利用選育后的酵母對蜂蜜進行發酵,從而使蜂蜜中含有的糖類完全轉化,提高發酵性能和風味。因此,蜂蜜酒釀造過程中酵母菌的選擇,對于蜂蜜的成功釀制起著決定性的作用。

研究表明,從蜂蜜中分離出的釀酒酵母菌株適合蜂蜜生產。然而Pereira[1]等通過研究發現,從蜂蜜中分離出來的酵母與商業化的酵母相比,并沒有表現出任何優勢。此外,田景芝比較了從荔枝原蜜中篩選到的菌株A1 和葡萄酒酵母、安琪耐高溫活性干酵母、黃酒專用釀酒高活性干酵母的發酵結果,發現葡萄酒酵母更適合蜂蜜酒的發酵。

張敏[9]等分別采用5種商業活性干酵母(FX10、EC1118、BO213、KD、QA)釀造蜂蜜酒,研究其對酒中總黃酮和總酚含量的影響。結果表明,不同單菌和混菌發酵對蜂蜜酒中總黃酮和總酚含量影響較大,其中單菌以EC1118最佳,混菌以EC1118和BO213按1∶1比例添加最佳,且效果優于單菌。

李禮等[10]研究了3株葡萄酒酵母D24、C19和CHP對蜂蜜酒發酵的影響,確定了優選葡萄酒酵母菌株為C19;并以C19發酵蜂蜜酒作為對照, 在發酵過程中分別進行添加兩種酵母營養物Helper和酵母浸膏的處理,結果說明,濃度為10g/hL的Helper為最佳選擇,可提高蜂蜜酒的發酵速度,使蜂蜜酒獲得最佳的感觀品質。

細胞固定可以增加酵母對高濃度乙醇,糖和抑制劑的抗性。固定化可以增加酵母對壓力因子的抵抗力。另外,細胞的固定使得能夠連續發酵。與游離發酵系統相比,固定化酵母表現出更高的乙醇產量。固定化的主要好處之一是菌株的再利用,可以為蜂蜜生產者帶來經濟優勢。

3.添加物

由于蜂蜜酒釀造中的原料蜂蜜中的碳源含量充足,但是氮、磷、鉀元素偏少,因此需要添加合適的營養物質來提高發酵效率,酒精產量。此外,蜂蜜酒發酵過程中,需要減弱發酵環境壓力的緩沖物質保持酵母的活性,碳酸鈣、碳酸鉀、碳酸氫鉀和酒石酸的添加有利于pH 值保持在3.7~4.0范圍,有時也會加入檸檬酸或乳酸。

氮源可分無機氮源和有機氮源兩類,氮源的種類及濃度對蜂蜜酒的發酵有著一定的影響。陶樹興[11]等比較了磷酸銨、磷酸氫二銨、硫酸銨、乙酸銨、蛋白胨、酵母膏、豆芽汁7種氮源物質在不同濃度時,對蜂蜜酒發酵和雜醇油含量的影響, 實驗得出,有機氮源酒精含量高于無機氮源銨鹽,無機氮源中以磷酸氫二銨酒精度最高,有機氮源以豆芽汁含量最高;對于雜醇油而言,銨鹽中以硫酸銨雜醇油含量最高,有機氮源以豆芽汁含量最高,但是總的來說,銨鹽雜醇油含量低于有機氮源。

張麗珍向山烏桕蜂蜜酒中添加了蓮花花粉作為氮源,阿米諾酶來測定蜂蜜酒的品質,并以另一種無機氮源硫酸銨作為比較對象,發現添加花粉和阿米諾酶后,產酒量高,殘糖低,感官評定好,而硫酸銨在提高產酒量方面高于花粉,也可以降低殘糖含量,但成品酒,口感澀苦。

此外,通過向蜂蜜中添加不同天然成分,如香料或草藥或者果汁,之后一并發酵,可以調制蜂蜜酒的口味,滿足更多人的感官需求。

4.發酵條件

(1)消毒

蜂蜜水混合物在發酵前首先要進行消毒,對于保證形成酵母優勢菌群有著決定性的作用,最常見的滅菌方法是煮沸,但是熱處理有可能改變蜂蜜酒中的酚類成分,從而影響蜂蜜酒抗氧化能力和風味香型[6]。

此外,采用速凍方法也可進行消毒,SARBA等[12]探究了以百花蜜為原料,采用速凍工藝,經發酵制成蜂蜜酒的殺菌方法。速凍工藝在-80℃下進行1小時。對蜂蜜的微生物條件進行了檢測,以防止蜂蜜在發酵過程中受到污染。將該樣品接種在DRBC瓊脂培養基上,并與非冷凍的多花蜂蜜樣品進行比較。在冷凍瓊脂平板上,沒有發現任何易感菌落的酵母菌和霉菌。在最終產品蜂蜜酒中,由于冷凍處理,感官性能沒有顯著差異。

除了煮沸和速凍兩種較為極端的滅菌方法,釋放二氧化硫的方法也被廣泛運用,通過添加焦亞硫酸鹽(鈉鹽或鉀鹽或作為商品化的坎普登片(Campden tablets))來釋放二氧化硫,從而殺死或抑制大多數微生物的活動,以此達到消毒目的的方法[1,13]。此外巴氏消毒,超濾具有50KDa 的分子量濾除,這些方法也除去了蜂蜜中的蛋白質,使蜂蜜酒在成熟后可以更快的澄清[4]。

(2)pH值

消毒后就是加入酵母進行發酵,由于蜂蜜的pH值很低,缺乏緩存體系,因此在發酵過程中,蜂蜜水混合物的pH值會降低,從而限制酵母的效率,雖然pH值的快速下降抑制了有害微生物的活性,但是也減緩了酵母的代謝作用。因此,在整個發酵過程,pH值在3.7~4.0的范圍內非常重要。因此需要添加碳酸鉀、碳酸氫鉀和酒石酸等維持穩定的pH值。

(3)發酵后處理

接種酵母菌后,定期進行無菌采樣,對發酵過程進行監測生長參數(8、24)。最后,過濾/離心得到最終的蜂蜜酒[14]。一旦發酵結束,調整和成熟的條件是強制性的,盡管生產成本增加。澄清常用膨潤土和明膠[1,13]。

綜上,蜂蜜酒的發酵取決于酵母菌株的選擇與營養、消毒方式、發酵的pH值等多種因素。因此,在進行蜂蜜酒的發酵時,應對發酵過程的生長條件進行優化。

三、展望

蜂蜜酒釀造歷史悠久。傳統的釀造方法沿用至今。蜂蜜酒的發酵過程中,酵母需要充足的營養物質,因此渾濁,富含懸浮物質的低質蜂蜜是很好的選擇,但這些低質蜂蜜正好是蜂農們無法銷售的,因此蜂蜜酒的出現很好地緩解了蜂蜜的滯銷,為蜂農們帶來了更多的收入。蜂蜜酒如今鮮為人知,沒有葡萄酒那樣普及,因此開發蜂蜜酒具有巨大的商業潛力。雖然釀造工藝簡單,但是質量不穩定,且存在許多問題。因此,優化蜂蜜酒的制造工藝,開展蜂蜜酒釀造的科學研究,優化蜂蜜酒的釀造工藝,在蜂蜜、酵母的選擇以及添加物對于蜂蜜酒質量、規模化生產成為可能,從而為蜂產品的開發提供新的思路。

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