淺析非洲豬瘟疫苗研究

劉海云

（河南省新野縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所 473500）

非洲豬瘟（ASF） 在東非和南非的Warthogs 和Tampan 已經(jīng)傳播了許多世紀(jì)。自其公開報(bào)告以來，該病在最先在非洲快速的蔓延，給非洲的養(yǎng)豬戶造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失，隨后，非洲豬瘟又傳播到了歐洲，最先在葡萄牙被發(fā)現(xiàn)，之后在歐洲普遍傳播開來[1]。近年來的監(jiān)測(cè)顯示，非洲豬瘟已成為俄羅斯的一種地方病，非洲豬瘟在俄羅斯的疫情十分嚴(yán)重，俄羅斯存在發(fā)病豬及潛在的帶毒豬，非洲豬瘟在俄羅斯很難徹底清除，給俄羅斯養(yǎng)殖業(yè)帶來很大影響。我國(guó)與俄羅斯有較長(zhǎng)的接壤范圍，俄羅斯非洲豬瘟有傳入我國(guó)的趨勢(shì)與危險(xiǎn)性，而且近年來正在增加，越來越具有危險(xiǎn)性[2]。盡管在國(guó)外有成功根除非洲豬瘟這種疾病的例子，但目前由于我國(guó)養(yǎng)殖環(huán)境的條件較差，養(yǎng)殖技術(shù)和管理還跟不上，導(dǎo)致該病在我國(guó)比較難以防控，易于爆發(fā)。目前，世界各國(guó)各個(gè)研究機(jī)構(gòu)都在盡最大的努力致力于研究非洲豬瘟疫苗，以更好的防控該疾病，本文主要綜述了非洲豬瘟目前疫苗的類型、種類和各種疫苗的特點(diǎn)，以期為臨床上非洲豬瘟疫苗的合理使用提供寶貴建議，更好的防控非洲豬瘟的爆發(fā)。

1 滅活疫苗

滅活疫苗是一種最原始的與最經(jīng)典的疫苗類型，其制備方便、快捷，自非洲豬瘟發(fā)現(xiàn)以來一直在開發(fā)，由于早期疫苗技術(shù)不成熟，疫苗的效價(jià)活性等并不特別強(qiáng)，導(dǎo)致非洲豬瘟滅活疫苗在給豬注射之后防治效果并不理想，有些注射了非洲豬瘟滅活疫苗的豬場(chǎng)，在非洲豬瘟全面大面積爆發(fā)時(shí)，仍會(huì)感染非洲豬瘟，爆發(fā)本病。現(xiàn)在已經(jīng)由很多研究發(fā)現(xiàn)，非洲豬瘟的滅活疫苗效果并不好，疫苗免疫效果弱，因此，滅活疫苗研發(fā)較少，臨床使用不多[3]。在某些情況下，非洲豬瘟病毒接種于肺泡巨噬細(xì)胞懸液制備的滅活疫苗沒有保護(hù)作用，或僅起部分保護(hù)作用[4]。Freund 用完全輔助乳化的方法制備的ASFV 感染豬脾臟勻漿得到的滅活疫苗只能使ASF 同源菌株的保護(hù)率提高到70%，存活的豬均出現(xiàn)非洲豬瘟的臨床癥狀。由于非洲豬瘟爆發(fā)時(shí)會(huì)給豬造成巨大的傷害，而非洲豬瘟的滅活疫苗的免疫效果并不佳，因此，建議臨床上盡量少用非洲豬瘟的滅活疫苗。

2 弱毒疫苗

20 世紀(jì)50 年代，科研工作者發(fā)現(xiàn)在爆發(fā)非洲豬瘟之后，那些感染非洲豬瘟病毒之后，抵抗該病并且存活下來的豬，其能對(duì)相同基因型的非洲病毒再次感染產(chǎn)生免疫力與抵抗力。之后多年，科學(xué)家們?cè)谥铝τ谌趸侵挢i瘟病毒的毒力，經(jīng)過不懈的努力，研究者終于發(fā)現(xiàn)了降低非洲豬瘟病毒毒力的方法。科學(xué)家將非洲豬瘟病毒通過18I 細(xì)胞經(jīng)過多次傳代后，接種家豬未引起致命感染。1963 年，研究者證實(shí)，豬骨髓細(xì)胞ASF減毒疫苗能抵抗非洲豬瘟的侵襲。在弱毒疫苗研發(fā)初期，毒力不穩(wěn)定，有些弱毒的疫苗弱毒株會(huì)發(fā)生毒力返強(qiáng)，最開始減毒疫苗在葡萄牙應(yīng)用，產(chǎn)生很多副作用，許多豬在接種后出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)失調(diào)、肺炎、咳嗽等癥狀。科學(xué)家推測(cè)，這可能與接種非洲豬瘟的減毒疫苗有關(guān)，隨后在爆發(fā)非洲豬瘟的豬場(chǎng)分離到減毒株。非洲豬瘟的弱毒疫苗接種有一定風(fēng)險(xiǎn)，接種動(dòng)物后有些動(dòng)物會(huì)很敏感，發(fā)生應(yīng)激，甚至死亡。研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)接種非洲豬瘟減毒疫苗的豬暴露于口蹄疫、牛瘟或豬瘟環(huán)境下時(shí)，豬更容易死亡[5]。非洲豬瘟弱毒疫苗的安全問題一直是人們關(guān)注的焦點(diǎn)，正因如此，非洲豬瘟弱毒疫苗臨床試驗(yàn)失敗次數(shù)較多，臨床應(yīng)用受到限制。目前，通過自然篩選或細(xì)胞通道弱化技術(shù)，已有研究均證實(shí)ASF 減毒疫苗能夠抵抗菌株的強(qiáng)攻擊。目前關(guān)于非洲豬瘟，很多科學(xué)家在研究其致弱機(jī)制。隨著21 世紀(jì)，分子生物技術(shù)的飛速發(fā)展，全基因組測(cè)序技術(shù)的應(yīng)用，非洲豬瘟的基因序列可以被測(cè)定而出，目前通過基因敲除手段，可以對(duì)非洲豬瘟病毒的關(guān)鍵基因進(jìn)行敲除，從而使病毒致弱，這種手段的應(yīng)用前景越來越大。基因敲除致弱非洲豬瘟病毒的主要手段是通過篩選突變基因，敲除的基因往往不是點(diǎn)突變基因，因此，其毒力返強(qiáng)的可能性很低，致弱之后的毒力非常穩(wěn)定，此方法極具應(yīng)用前景。

3 DNA 疫苗

DNA 疫苗（DNA vaccine），是主要主要用于基因治療為目的研究出的疫苗，是當(dāng)今疫苗研究領(lǐng)域的新方向與新技術(shù)，DNA 疫苗是一種突破性技術(shù)。目前科學(xué)家正在研究各類病毒的DNA 疫苗，有關(guān)豬瘟病毒的DNA 疫苗研究也已經(jīng)開始。J.M.Argilaguet 等將P30 和P54 連接到真核表達(dá)質(zhì)粒pCMV-PQ 中，然而該DNA 疫苗在對(duì)豬進(jìn)行免疫后不能良好的抵抗豬瘟病毒的攻擊。隨后，科學(xué)家把非洲豬瘟病毒的血凝素基因和泛素基因連接到上述DNA 疫苗中，結(jié)果仍不能達(dá)到完全的保護(hù)作用，一些免疫的豬仍然會(huì)感染豬瘟病毒。Lacasta 等利用表達(dá)文庫(kù)（Expression library） 構(gòu)建了4029 個(gè)表達(dá)質(zhì)粒，并對(duì)其進(jìn)行了豬瘟病毒的免疫保護(hù)試驗(yàn)，結(jié)果保護(hù)率僅為60%[6]。目前有關(guān)非洲豬瘟的DNA 疫苗還無法抵抗高毒力的非洲豬瘟病毒，但對(duì)于表達(dá)質(zhì)粒的研究，這標(biāo)志著有效非洲豬瘟DNA 疫苗的研制向前邁出了一大步。目前有很多的研究在探索非洲豬瘟基因組和保護(hù)抗原，以及表達(dá)載體的不斷修飾和優(yōu)化，這些研究將會(huì)使DNA 疫苗將在未來的非洲豬瘟疫苗市場(chǎng)上占有一席之地。

4 其他新型疫苗

復(fù)制缺陷型病毒疫苗是近年來備受關(guān)注的一種新型疫苗。非洲豬瘟復(fù)制缺陷疫苗是一種通過去除非洲豬瘟減毒株復(fù)制過程中必需基因的基因工程方法所研制的疫苗。因此，它只能在為復(fù)制提供必要基因的輔助細(xì)胞系中進(jìn)行有效復(fù)制，而不能在受感染的動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行復(fù)制，因此這種疫苗可以最大化的保持病毒的原始狀態(tài)，保證完整病毒的免疫原性，不產(chǎn)生免疫副作用。

5 展望

非洲豬瘟只傳染豬不傳染人。非洲豬瘟不是“人畜共患病”，不傳染人，但對(duì)豬來說非常致命。非洲豬瘟是一種烈性傳染病，感染后病豬的體溫升高、呼吸急促、皮膚發(fā)紺、內(nèi)臟器官出血，對(duì)于病豬的影響非常大，而且傳染性與病死率很高，會(huì)給養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的損失。對(duì)于非洲豬瘟疫苗的研制迫在眉睫，然而研制穩(wěn)定良好的疫苗需要一個(gè)長(zhǎng)期的過程，目前用于非洲豬瘟的疫苗已經(jīng)被研制出來多種，然而在使用過程中可能會(huì)出現(xiàn)病毒變異等，對(duì)疫苗的效應(yīng)產(chǎn)生影響，因此，對(duì)于非洲豬瘟的疫苗研究仍在不懈努力與向前發(fā)展。防范非洲豬瘟，需要從政府到養(yǎng)殖場(chǎng)各部門共同進(jìn)行協(xié)作，才能更好地防范[7]。