2種分析測定右旋苯醚菊酯原藥中右旋體含量的方法比對(duì)研究

史衛(wèi)蓮，陳 萍，孫春燕，張春妮

(江蘇揚(yáng)農(nóng)化工股份有限公司，江蘇揚(yáng)州 225009)

右旋苯醚菊酯ISO通用名稱為d-phenothrin，化學(xué)名稱為：3-苯氧基芐基(1R,3R; 1R,3S)-2,2-二甲基-3-(2-甲基丙-1-烯基)環(huán)丙烷羧酸酯，是世界衛(wèi)生組織推薦用于公共衛(wèi)生的主要?dú)⑾x劑之一。本品為廣譜殺蟲劑，藥效優(yōu)于氯菊酯、甲氰菊酯、丙炔菊酯和氰戊菊酯，具有較強(qiáng)的觸殺、胃毒和殘效性，可用于家庭、公共場所、工業(yè)區(qū)蒼蠅、蚊蟲、蜚蠊等衛(wèi)生害蟲的防治。

圖1 右旋苯醚菊酯的結(jié)構(gòu)式[1]

本試驗(yàn)分別利用高效液相色譜法和氣相色譜法對(duì)右旋苯醚菊酯原藥中右旋體進(jìn)行了手性分離和測定，并對(duì)2種分析方法所測得結(jié)果進(jìn)行了比對(duì)，以期為各生產(chǎn)企業(yè)及各科研單位、檢測單位等選擇適合的分析方法提供參考。

1 試驗(yàn)部分

1.1 右旋體含量的測定——高效液相色譜法[1]

1.1.1 材料與試劑

右旋苯醚菊酯原藥：由江蘇揚(yáng)農(nóng)化工股份有限公司提供；正己烷(色譜純)：美國天地有限公司。

1.1.2 儀器與設(shè)備

Agilent 1260高效液相色譜儀：美國Agilent公司；BT 125D型電子分析天平(雙量程，d=0.01 mg/0.1 mg)：賽多利斯公司；KQ-500型超聲波清洗器：昆山市超聲儀器有限公司。

1.1.3 方法提要

用正己烷溶解試樣，使用裝有Sumichiral OA-2000不銹鋼手性色譜柱和可變波長紫外檢測器分離和測定試樣中的右旋苯醚菊酯。

1.1.4 右旋苯醚菊酯樣品溶液的配制

稱取右旋苯醚菊酯試樣0.02 g (精確至0.000 1 g)的試樣，置于100 mL容量瓶中，用正己烷溶解并稀釋至刻度，搖勻，備用。

1.1.5 高效液相色譜操作條件

色譜柱：250 mm×4 mm(i.d.)手性不銹鋼柱，涂覆有Sumichiral OA-2000的手性色譜柱，粒徑5 μm，兩根串聯(lián)。柱溫：25 ℃；檢測波長：230 nm；檢測器：二極管陣列檢測器；進(jìn)樣體積：5 μL；流速：1.0 mL/min；流動(dòng)相：正己烷，經(jīng)濾膜過濾，并進(jìn)行脫氣。用面積歸一法定量。

1.1.6 測定

在上述條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)注入右旋苯醚菊酯樣品溶液，直至連續(xù)2針樣品保留時(shí)間的變化不大于5%，注入試樣溶液測定。

1.1.7 右旋體含量的計(jì)算

試樣中，右旋苯醚菊酯含量按式(1)計(jì)算：

式中：α1為試樣中，右旋苯醚菊酯含量，以%表示；Aa為試樣溶液中，右旋順式體的峰面積；Ab為試樣溶液中，左旋順式體的峰面積；Ac為試樣溶液中，右旋反式體的峰面積；Ad為試樣溶液中，左旋反式體的峰面積；0.93[1]為順式異構(gòu)體的校正因子(注：校正因子是因?yàn)轫樖疆悩?gòu)體與反式異構(gòu)體的紫外吸收存在差異)。

典型的右旋苯醚菊酯原藥的正相高效液相色譜圖見圖2。

1.2 右旋體含量的測定——?dú)庀嗌V法[2]

1.2.1 材料與試劑

樣品同1.1節(jié)中所述。氫氧化鈉甲醇溶液：w(NaOH)=10%，鹽酸溶液：w(HCl)=10%，石油醚：沸程60～90 ℃，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.2.2 儀器與設(shè)備

Agilent 7890B氣相色譜儀：美國Agilent公司；BT 125D型電子分析天平(雙量程，d=0.01 mg/0.1 mg)：賽多利斯公司。

1.2.3 方法提要

樣品經(jīng)皂化、酸化處理后，使用涂有β DEX-120石英毛細(xì)管柱、分流進(jìn)樣裝置和氫火焰離子化檢測器，對(duì)上述酸化產(chǎn)物進(jìn)行手性分離和測定。

1.2.4 右旋苯醚菊酯樣品溶液的制備

稱取右旋苯醚菊酯原藥0.4 g于三角稱量瓶中，加10 mL 10%氫氧化鈉甲醇溶液后置于50～60 ℃水浴中皂化2 h，加10 mL水溶解，用5 mL石油醚萃取2次，取2次下層萃取液合并，再用2 mL 10%鹽酸溶液將萃取液酸化，再用5 mL石油醚萃取一次，取上層萃取液，備用。

1.2.5 氣相色譜操作條件

毛細(xì)管色譜柱：30 m×0.25 mm(i.d.)熔融石英柱，內(nèi)壁涂有β DEX-120，膜厚0.2 μm。柱溫：150 ℃；汽化室溫度：250 ℃；檢測室溫度：250 ℃；載氣(He)流量：100 kPa；氫氣流量：30 mL/min；空氣流量：400 mL/min；分流比：30∶1；進(jìn)樣體積：0.6 μL。面積歸一法定量。

1.2.6 測定

在上述氣相色譜操作條件下，待儀器穩(wěn)定后，注入上述制備溶液，進(jìn)行分析測定。

1.2.7 右旋體含量的計(jì)算

右旋體含量按式(2)計(jì)算：

式中：α1為試樣中，右旋苯醚菊酯含量，以%表示；A1為右旋反式體的峰面積；A2為右旋順式體的峰面積；A3為左旋反式體的峰面積；A4為左旋順式體的峰面積。

典型的右旋苯醚菊酯原藥皂化后酸化產(chǎn)物的氣相色譜圖見圖2。

2 試驗(yàn)結(jié)果與討論

2.1 試驗(yàn)結(jié)果

取批次不同的五批右旋苯醚菊酯原藥，按照上述試驗(yàn)條件分別對(duì)五批次樣品進(jìn)行分析與檢測，測定結(jié)果見表1。

2.2 結(jié)果討論

從表1可以看出，無論是高效液相色譜法還是氣相色譜法，2種手性分析方法對(duì)于同一批次樣品的測定結(jié)果基本一致。因此，對(duì)于右旋苯醚菊酯原藥中右旋體含量的測定而言，2種手性分析方法均是可行的。

圖2 右旋苯醚菊酯原藥(左)及其皂化后(右)的高效液相色譜圖

表1 用2種分析方法測定右旋苯醚菊酯原藥中右旋體含量結(jié)果比對(duì)表

對(duì)于使用高效液相色譜法分析右旋苯醚菊酯原藥中右旋體的含量，最大的優(yōu)勢是對(duì)右旋苯醚菊酯原藥直接分離，所測得右旋體的含量直接反映原藥產(chǎn)品的質(zhì)量，也更為科學(xué)。其不足是Sumichiral OA-2000不銹鋼手性色譜柱維護(hù)較困難，且需2根色譜柱串聯(lián)進(jìn)行分離。無論是色譜柱還是系統(tǒng)的維護(hù)，該分析方法的費(fèi)用均較高。

對(duì)于使用氣相色譜法分析右旋苯醚菊酯原藥中右旋體的含量，最大的優(yōu)勢是分析方便、快捷，且內(nèi)壁涂有β DEX-120的毛細(xì)管色譜柱較Sumichiral OA-2000不銹鋼色譜柱便宜，且易維護(hù)。不足是該方法分析的是右旋苯醚菊酯皂化酸化后的產(chǎn)物——右旋DE菊酸，而非右旋苯醚菊酯本身。但是產(chǎn)物右旋DE菊酸中右旋體含量與右旋苯醚菊酯原藥中右旋體基本一致，這點(diǎn)在表1數(shù)據(jù)中可以得到證實(shí)。

因此，對(duì)于各生產(chǎn)企業(yè)及各科研單位、檢測單位等，可結(jié)合自身的實(shí)際情況，選擇適合自身的分析方法。