市售雞蛋中氟喹諾酮類藥物殘留的調查分析

◎ 李 婧，劉 正，張 磊

（天津市乳品食品監(jiān)測中心，天津 300381）

環(huán)丙沙星、達氟沙星、恩諾沙星、沙拉沙星均是常見的氟喹諾酮類藥物，主要對革蘭氏陰性菌和大多數(shù)革蘭氏陽性菌有效[1]，可有效抑制DNA螺旋酶的活性。DNA螺旋酶又稱拓撲異構酶Ⅱ，由A、B兩個亞基組成四聚體（A2B2），是DNA復制所必需的酶。氟喹諾酮類藥物主要作用于A亞基，使DNA無法形成雙螺旋結構，導致菌體無法進行DNA復制，從而抑制細胞分裂，達到抑菌的目的[2]。氟喹諾酮類藥物作用范圍廣，抗菌活性強，在現(xiàn)代畜禽養(yǎng)殖業(yè)中得到廣泛應用。

實際生產中，氟喹諾酮類藥物濫用的現(xiàn)象普遍存在，不僅會造成畜禽中毒、人產生過敏反應、病原菌對該類藥物產生耐藥性等問題，還會造成藥物在畜禽產品中殘留，藥物隨畜禽排泄物排出污染環(huán)境，嚴重影響人類健康和生態(tài)環(huán)境。

基于此，本文對市售雞蛋中氟喹諾酮類藥物殘留情況進行了調查分析，為今后生產、流通環(huán)節(jié)的市場監(jiān)管提供參考。筆者分別在A、B、C三地的市場、超市隨機抽取共20批次的樣品，對雞蛋中的氟喹諾酮類藥物殘留進行液相色譜檢測，并對結果進行分析。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

島津LC-20AD液相色譜儀，配RF-20A熒光檢測器。磷酸鹽提取液：稱取磷酸二氫鉀6.8 g，加水溶解并稀釋至500 mL，用5.0 mol·L-1氫氧化鈉溶液調pH至7.0。

磷酸 /三乙胺溶液 0.05 mol·L-1（pH 2.4）：取 85%的磷酸3.4 mL，加水稀釋到1 000 mL，攪拌下滴加三乙胺，調pH至2.4。

乙腈（30%）緩沖液：量取30 mL的乙腈和70 mL的磷酸/三乙胺溶液（pH 2.4），混合振蕩均勻。

1.2 樣品的制備與凈化

取適量新鮮的雞蛋，將蛋清和蛋黃攪拌均勻，稱取2 g試料，置于勻漿杯中，加磷酸鹽提取液2.0 mL，攪勻振蕩混合10 min，5 000 r·min-1離心10 min。上清液轉入另一離心管中。用磷酸鹽提取液2.0 mL洗殘渣，攪勻，振蕩，離心。合并上層清液于同一離心管中，加入10 mL水飽和的正己烷，振蕩5 min，5 000 r·min-1離心10 min，用吸管將上層正己烷吸出棄去，將絮凝狀固體吸出并轉移至另一離心管中，用2.0 mL磷酸鹽提取液清洗絮凝狀固體，振蕩，離心，清液與之前的下層提取液合并。在下層溶液中再加入10 mL水飽和的正己烷，振蕩，離心。棄去上層正己烷，下層為備用液。

C18固相萃取柱依次用5 mL乙腈，5 mL乙腈（30%）緩沖液和5 mL磷酸鹽提取液潤洗。備用液過柱，用5 mL水洗，真空抽干。加1.00 mL流動相洗脫，真空抽干，收集洗脫液作為試樣溶液，溶液過濾膜后，供高效液相色譜分析。在淋洗和洗脫過程中流速控制在1 mL/min左右。

1.3 液相色譜工作條件

色譜柱：C18，250 mm×4.6 mm，粒徑5 μm；流動相：0.05 mol·L-1磷酸/三乙胺溶液-乙腈（81+19），用前過0.45 μm濾膜；流速：1.0 mL·min-1；檢測波長：激發(fā)波長280 nm，發(fā)射波長450 nm；進樣量：20 μL。

2 結果與分析

2.1 標準曲線

在本次檢測過程中，選取了5個濃度水平做標準曲線，標準曲線方程見表1。

表1 環(huán)丙沙星、達氟沙星、恩諾沙星、沙拉沙星標準曲線表

2.2 質控樣品的加標回收實驗

根據(jù)實際檢測結果，設計了3個濃度水平的加標回收實驗作為檢測過程的質量控制，回收率見表2。

表2 質控樣品加標回收結果表

2.3 檢測結果

隨機抽檢的雞蛋中氟喹諾酮類藥物殘留檢測共涉及20批次樣品，檢測結果顯示，在這次隨機抽樣檢測中，A、B、C三地市售雞蛋均沒有上述4種氟喹諾酮類藥物檢出，符合國標規(guī)定的不得檢出的要求。見表3。

表3 雞蛋中氟喹諾酮類藥物檢測結果統(tǒng)計表（抽樣批次/檢出批次）

3 討論

氟喹諾酮類藥物在動物及人體蓄積到一定程度時，會產生不良反應和副作用，危害動物和人體健康[3]。長期食用氟喹諾酮類藥物殘留超標的畜禽產品可造成人體長期吸收該類藥物，藥物蓄積到一定程度時就會對人體產生直接危害，引發(fā)不良反應。氟喹諾酮類藥物殘留不但對人體有直接的危害，而且會使致病菌和人體的耐藥性逐漸增強，不利于該類藥物對人類相關疾病的治療[4]。

目前，我國對氟喹諾酮類藥物殘留檢測的研究還處于發(fā)展階段，隨著研究的深入，今后氟喹諾酮類藥物殘留檢測技術獎逐步向更高靈敏度、更方便于現(xiàn)場大規(guī)模快速篩選和多殘留組分同時檢測等方向發(fā)展。