雞新城疫與禽流感免疫程序效果分析

林福忠 林秋娟 蔡鶴鳴

（福建省福州市農業科學研究所 350018）

雞新城疫是由新城疫病毒引起的急性、高度接觸性傳染病，禽流感是由A型流感病毒的禽類傳染病。兩者均能引起禽類呼吸道和消化道疾病，造成禽類生產重大損失。目前，針對雞新城疫和禽流感主要采取接種疫苗的方法進行防控，而疫苗免疫效果影響因素很多，免疫程序就是其中之一。因此，通過生產實踐制定一個在臨床上有效的雞新城疫和禽流感免疫程序。為了客觀評判其免疫效果，采用血凝抑制試驗來監測其免疫抗體水平，為各養殖場做好雞新城疫和禽流感的預防工作提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗6批次桂鳳雞均來自福州市農業科學研究所畜禽養殖場。雞新城疫與禽流感免疫程序為：7日齡，新城疫--禽流感（H9N2）二聯滅活苗，肌注，1頭份/只；15日齡，禽流感（H5N1）滅活苗，肌注，1頭份/只；20日齡，新城疫Ⅳ系，滴鼻，2頭份/只；33日齡，新城疫--禽流感 （H9N2）二聯滅活苗，肌注，1頭份/只；60日齡，新城疫Ⅰ系，肌注，1頭份/只；新城疫--禽流感 （H9N2）二聯滅活苗，肌注，1頭份/只。

1.2 血清樣本采集

1.2.1 采集時間與數量

雞采血時間為40日齡與81日齡。樣本采集數為每批次60只，共計720份。

1.2.2 血樣采集與處理

翅下靜脈采血，每只雞采血2ml，分別標記密封，靜置30min，待血清析出后，用低溫離心機4000轉進行血清分離，-18℃冰箱貯藏。

1.3 檢測方法

新城疫和禽流感的免疫抗體檢測方法均采用血凝抑制試驗（HI）方法。新城疫采用GB/T16550-2008《新城疫診斷技術》進行操作，禽流感采用GB/T18936-2003《高致病性禽流感診斷技術》進行操作。

1.4 實驗試劑

新城疫、禽流感抗原和標準血清來自哈爾濱維科生物技術開發公司，檸檬酸鈉抗凝劑和1%紅細胞液自制。

1.5 結果判定

以100%抑制凝集的血清最大稀釋度為該血清的抗體滴度。新城疫抗體滴度≧5㏒2判定為合格，禽流感抗體滴度≧5㏒2判定為合格。

2 結果與分析

2.1 新城疫抗體檢測

新城疫抗體檢測結果見表1。由表1可知，6批次雞群40日齡平均免疫合格率為93.6%、平均抗體滴度為8.5；81日齡平均免疫合格率為94.2%、平均抗體滴度為8.6。40日齡和81日齡HI抗體效價均大于70%，平均抗體滴度均大于8.0；40日齡和81日齡的95%滴度7.9～9.1。說明該新城疫免疫程序合理，抗體效價和平均抗體滴度較高，能夠形成有效保護力。

2.2 H5N1/Re-5禽流感抗體檢測

H5N1/Re-5禽流感抗體檢測結果見表2。由表2可知，6批次雞群40日齡平均免疫合格率為89.2%、平均抗體滴度為7.4；81日齡平均免疫合格率為86.7%、平均抗體滴度為7.1。40日齡和81日齡HI抗體效價均大于70%，平均抗體滴度均大于7.0，95%滴度范圍6.6～8.0。說明該H5N1禽流感免疫抗體有保護力，但保護力較弱。

2.3 H9N2禽流感抗體檢測

H9N2禽流感抗體檢測結果見表3。由表3可知：6批次雞群40日齡平均免疫合格率為91.4%、平均抗體滴度為8.3；81日齡平均免疫合格率為89.7%、平均抗體滴度為8.0；40日齡和81日齡HI抗體效價均大于70%；除了3、4批次81日齡的平均抗體滴度為7.8和7.9，其他40日齡和81日齡的抗體平均滴度均大于8.0；95%滴度為7.4～8.8。說明該H9N2禽流感免疫程序合理，抗體效價和平均抗體滴度較高，能夠形成較強保護力。

3 討論

（1）本免疫程序生產實踐中應用于禽類養殖場比較密集、新城疫疫情較重的區域，雞新城疫、禽流感免疫合格率均大于70%，可形成有效的免疫保護力，說明免疫程序合理。但免疫效果具有動態性，容易受到雞群免疫應答能力、疫苗種類、地域、疾病流行狀況、雞舍環境衛生、應激等因素影響[1]。為了雞群的生物安全，有條件的養殖場要制定定期的常規檢測和不定期的抽檢監測制度，可有效判定抗體效力，控制和減少疫病發生。

表1 40日齡和81日齡各批次新城疫抗體檢測結果 （S±X）

表2 40日齡和81日齡各批次H5N1/Re-5禽流感抗體檢測結果 （S±X）

表3 40日齡和81日齡各批次H9N2禽流感抗體檢測結果 （S±X）

（2）本試驗新城疫免疫程序密度較大，活苗和滅活苗同時配合使用，全程活苗免疫3次、滅活苗免疫2次，這樣既可快速建立局部免疫屏障，又能使機體產生高滴度的免疫抗體。另外，不同時間段采用滴鼻、肌注等不同免疫方法可形成全方位有效的保護力。因此，在禽類養殖場比較密集、新城疫疫情較重的區域可參考使用本免疫程序。

（3）本試驗H5N1禽流感疫苗免疫1次，H9N2禽流感疫苗免疫3次。從抗體監測分析H5N1抗體保護效力不如H9N2，H9N2抗體效價和平均抗體滴度較高能夠形成較強保護力，而H5N1保護力較弱。對禽流感免疫程序如此設計是因為在我國H9N2亞型禽流感是當前禽流感流行的主型，持續變異，可協同致病，還可以為H7N9提供重配的基因庫，造成豐富的新型基因型，因此，控制H9病毒污染勢在必行[2]；高致性H5N1亞型禽流感人畜共患。雖然全球關于H5N1亞型疫情報道逐年遞減，但疫情逐漸呈現地方流行態勢，每年均有發生[3]。因此，不能忽視，當國家H5N1禽流感疫情監測有暴發時應加強免疫。