使用Cella Vision DI60系統估算血小板計數應用評價

黃繼偉 黃婧芫 陳喻

【摘 要】目的：評價Cella Vision DI60系統在血小板計數方面的可靠性及準確性進行驗證及評價。方法：對100例外周血涂片分別使用人工顯微鏡計數血小板、SysmexXN10血液分析儀計數血小板及Cella Vision DI60系統估算血小板計數。并對三種計數血小板的方法進相關性及統計分析。結果：Cella Vision DI60系統血小板估算計數結果與顯微鏡手工血小板計數的相關系數r2=0.998；Cella Vision DI60系統血小板估算計數結果與Sysmex XN10血液分析儀計數結果的相關系數r2=0.995，Cella Vision DI60系統血小板估算計數與Sysmex XN10儀器計數血小板和顯微鏡下手工血小板計數均有非常好的相關性。結論：使用Cella Vision DI60系統在外周血血小板計數有利于實現血小板計數的自動化與標準化，提高工作效率，具有較好的臨床應用價值。

【關鍵詞】 血小板計數； Cella Vision DI60系統；SysmexXN10；顯微鏡手工計數；實驗室自動化

【中圖分類號】R969.4 【文獻標志碼】A 【文章編號】1005-0019（2018）17-270-01

（前言）外周血細胞計數是實驗室常規檢查項目之一，其中血小板計數為術前檢查、術后監測、血栓形成、器官移植等具有重要作用。隨著血細胞分析儀技術的不斷成熟，大部分患者的血小板計數可由血細胞分析儀進行，但顯微鏡鏡檢仍是金標準。對血常規異常或出現危急值時，尤其在病理條件下，必須進行人工顯微鏡下手工計數血小板。隨著臨床實驗室臨檢復檢規則的嚴格執行以及臨床標本量的增加，以自動化儀器進行細胞形態分析是實驗室自動化發展的必然趨勢。Cella Vision DI60是模擬人工在顯微鏡下對外周血涂片進行鏡檢的閱片系統。本研究選取本院100例患者外周血標本，使用Cella Vision DI60估算血小板計數，Sysmex XN10血細胞分析儀血小板計數與顯微鏡下手工計數進行血小板計數結果進行比較，評價Cella Vision DI60系統在外周血血小板計數的臨床應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機選取2016年12月到2017年2月，我院血常規標本100例（PLT<50×109/L50例，PLT50～200×109/L42例，PLT201～840×109/L18例），其中男性患者54名，女性患者46名，年齡為8至81歲，中位年齡為42歲。采集靜脈血2mL，使用含乙二胺四乙酸二鉀鹽（EDTA-K2）抗凝劑的真空采血管，排除不合格標本（如采集量不足、肉眼觀察可見凝塊、溶血、脂血；顯微鏡下有血小板聚集的標本）的影響[1]。

1.2 儀器與試劑 OLYMPU光學顯微鏡CX-21；牛鮑計數板；草酸銨稀釋液；微量吸管；SysmexXN10（B3）血細胞分析儀；Cella Vision DI60系統全自動閱片機；SysmexSP-10全自動制片機；Sysme原裝玻片；SysmexXN10血液分析儀使用配套試劑及其質控液（日本Sysmex 公司） ；瑞氏‐吉姆薩染液（珠海貝索生物技術有限公司）；SysmexDCL稀釋液及去離子水。

1.3 方法 工作前對Cella Vision DI60閱片機、SysmexXN10（B3）血液分析儀和SysmexSP-10自動制片機、Cella Vision DI60閱片機進行校準、調試及報警信息設置。將顯微鏡鏡頭擦拭干凈，準備草酸銨稀釋液、微量吸管、牛鮑計數板。并對上述100份外周血標本分別使用SysmexXN10血液分析儀自動計數血小板、由經板結果作為計數金標準）和使用SysmexSP-10自動推制片及染色（珠海貝索瑞氏-吉姆薩染液）并對制好的血片使用Cella Vision DI60系統估算血小板計數。

1.4 統計學處理 采用Microsoft office Excel 2007整理數據，采用回歸方程對實驗結果進行統計分析。分別對Cella Vision DI60系統估算血小板計數結果與人工顯微鏡計數血小板結果進行相關性分析、Cella Vision DI60系統估算血小板計數結果與SysmexXN10血細胞分析儀計數血小板結果進行相關性分析。

2 結果

2.1 Cella Vision DI60系統估算血小板計數結果與人工顯微鏡鏡檢的相關性y=0.980 X+2.727，r2=0.998 （見圖1）

2.2 Cella Vision DI60系統估算血小板計數結果與SysmexXN10全自動血液分析儀計數結果的相關性y=0.978X+0.351，r2=0.995（見圖2）

2.3 Cella Vision DI60系統血小板估算計數血小板與Sysmx XN10血液分析儀自動計數血小板、顯微鏡下手工血小板計數均有非常好的相關性。

3 討論

血細胞數字圖像分析技術從問世至今已有近50年的歷史，尤其近十幾年出現了突飛猛進的發展。在1966年，Prewitt等[]首先報道應用自動顯微鏡掃描系統進行血細胞形態分析。隨后的幾十年中，相關的研究和報道一直沒有停止，但由于計算機軟件和硬件水平受限以及自動化程度不高，該項技術并未常規用于臨床試驗中。直到Cella Vision DI60系統的出現，實現了血涂片上的自動化、單細胞層定位、細胞圖像掃描與獲取、細胞識別與預分類、報告自動生成等功能，并顯著提高了檢測速度和細胞圖像質量[1]。針對DI60的多項研究均證實該儀器與血細胞分析儀XN1000與顯微鏡下手工計數血小板具有較好的相關性。從此全自動閱片機真正進入臨床實驗室，并廣泛投入使用。

在檢測過程中發現，使用DI60進行血小板計數，對推片、染色滴油的要求較高，尤其受染色質量影響較大。在計數中發現因染色不均導致計數方格的數量不準確，影響最終計算出的結果。因此，在實際工作中應盡量將儀器參數設置在最佳狀態，以保證儀器的運行，實現檢查過程中的自動化、標準化。[2]

Cella Vision DI60系統采用數字掃描拍攝將細胞形態顯示在電腦屏幕上，與顯微鏡相比存在一定的視差，操作人員需要適應在電腦屏幕上觀察細胞形態。對Cella Vision DI60外周血血小板計數效果評估表明，DI60能夠準確地計算出血小板的數量，與SysmexXN10全自動血細胞分析儀計數血小板、顯微鏡下手工計數血小板具有較好的相關性。

此外，Cella Vision DI60系統的細胞圖庫（包括自帶的參考細胞圖庫和日常工作中遇到的有借鑒價值的細胞圖像）便與借鑒學習、回顧對比，有利于實驗室人員鑒別細胞形態學能力的提高。雖然Cella Vision DI60不能完全替代人工，其結果必須經過人工審核才能出報告，但其自動化分析模式有助于降低操作人員的漏檢或經驗不足帶來結果報告的差異。

Cella Vision DI60的優勢在于：1.閱片效率高。據相關資料顯示，Cella Vision DI60的閱片效率為每小時30-60張，人工計數為每小時5-8張，與人工顯微鏡下計數瀏覽全片相比節省大量時間。本實驗室使用Cella Vision DI60以來，臨檢組形態學檢驗工作的效率明顯提高。2.使形態學分析趨于標注化。細胞分類計數存在主觀差異性，不同實驗室、不同工作人員之間，都難以做到標準完全一致，儀器標準化分析過程可降低此類問題的發生。此外，Cella Vision DI60細胞圖像保存在數據庫中，便于同事、專家進行交流討論，也可用于后期查詢、教學培訓等、。

綜上所述，通過對Cella Vision DI60的系統評價，表明其具有操作簡便、速度快、相關性好，不受主觀因素影響等優點，其應用有利于緩解實驗室工作人員緊缺，工作強度大的現狀。因此，采用標準化工作輔助檢查，可以用于外周血血小板鏡檢計數。

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