一例仔豬水腫病的病原分離鑒定及藥敏試驗

刁富花

摘要：從大通縣某規模養豬場患病仔豬分離病原菌，根據病原菌形態、培養特性和生化特性，鑒定為大腸桿菌。同時進行藥敏試驗表明該菌對氧氟沙星、丁胺卡那霉素和慶大霉素高度敏感，為臨床用藥提供科學依據。

關鍵詞：仔豬；水腫??；大腸桿菌；分離鑒定；藥敏試驗

1發病情況

2017年2月，大通縣某規模養豬場飼養的斷乳仔豬陸續發病。臨床癥狀主要是頭、眼瞼、頸部和腿部水腫，喜臥；個別病豬晚上食料，次日清晨死于欄舍，發病急，死亡快。豬場獸醫人員使用青霉素等治療，效果不明顯，截止化驗室就診，發病豬總共30頭，死亡16頭。對病死豬剖檢可見胃大彎、賁門部水腫，胃黏膜層與肌肉層間水腫，呈膠凍樣，胃底彌漫性出血；結腸腸系膜及其淋巴結水腫；心包、腹腔和胸腔積液。為確定病原菌，對病死豬進行了病原分離鑒定與藥敏試驗。

2材料與方法

2.1實驗材料

麥康凱培養基、伊紅美藍瓊脂培養基、肉湯瓊脂培養基、三糖鐵瓊脂培養基；糖發酵管、普通肉湯培養基、藥敏紙片；實驗仔豬由大通縣某規模養豬場提供。

2.2病原菌分離鑒定

2.2.1細菌分離無菌采集病死仔豬大腸內容物、腸系膜淋巴結、肝臟、脾臟等組織接種在麥康凱培養基，經37℃培養24h后，選取可疑菌落分別接種在肉湯瓊脂培養基、伊紅美藍瓊脂培養基上，于37℃培養12-24h，對菌落形態進行觀察，并且選取培養菌落通過生理鹽水稀釋后涂片，革蘭氏染色、鏡檢。

2.2.2生化鑒定將病原菌接種在三糖鐵瓊脂培養基、甘露醇、麥芽糖、葡萄糖、蔗糖、水楊苷、V-P、M.R.、乳糖、阿拉伯糖、果糖、木糖以及尿素酶反應管，經37℃反應72h。

2.2.3致病性實驗選取該規模養豬場斷乳仔豬8頭，設實驗組和對照組，每組4頭。將分離的病原菌的普通肉湯培養物通過超聲波破碎后離心，取上清液以一定劑量靜脈注射給實驗組斷乳仔豬；采用生理鹽水注射對照組斷乳仔豬，臨床觀察結果。

2.2.4血清型鑒定在血瓊脂平板上培養分離菌24h后，添加福爾馬林3mL/L，經37℃滅活24h，選取適量菌液進行無菌檢測，檢驗合格后，按0.3mL/只肌注于小白鼠腿部，10d后采集小白鼠血液并分離血清，同標準大腸桿菌0141K88菌液進行平板凝集試驗。

2.3藥敏試驗

將致病性分離菌通過生理鹽水稀釋后，均勻地涂抹在營養肉湯瓊脂平板上，然后將藥敏紙片（氨芐西林、紅霉素、頭孢唑啉、慶大霉素、氧氟沙星、硫酸卡那霉素、丁胺卡那霉素、磺胺甲基異惡唑、頭孢呋辛）平鋪在肉瓊脂培養基上，在37℃生化培養箱中培養24h，觀察并記錄藥敏試驗結果。依據有無抑菌圈和抑菌圈直徑大小，判定病原菌對不同試驗藥物的敏感程度。

3結果

3.1培養特性

麥康凱培養基上的菌落通過肉眼觀察可見表面光滑、濕潤且圓整，呈粉紅色；伊紅美藍瓊脂培養基上可見圓整、暗黑色菌落；革蘭氏染色鏡檢可見兩端鈍圓、成對或單個存在的革蘭氏陰性小桿菌。

3.2生化試驗結果

病原菌在三糖鐵培養基上產酸產氣，不產生H2S；病原菌的生化試驗結果見（表1）。由表1可知，蔗糖、阿拉伯糖、果糖、木糖、乳糖、甘露醇發酵試驗為陽性，葡萄糖產酸產氣，M.R.試驗為陽性，水楊苷、尿素酶試驗和V-P試驗為陰性，同大腸桿菌的生化特性相符合。

3.3致病性實驗結果

實驗組的4頭斷乳仔豬全部出現典型水腫病癥狀及病理變化；而對照組4頭斷乳仔豬沒有異常癥狀。

3.4血清型鑒定結果

小白鼠血清同標準大腸桿菌0141K88菌液出現凝集。表明該菌血清型為0141。

3.5藥敏試驗結果

藥敏試驗結果見（表2）。病原菌對氧氟沙星、丁胺卡那霉素和慶大霉素高度敏感；對頭孢唑啉、頭孢呋辛中度敏感；對氨芐西林、紅霉素、磺胺甲基異惡唑和硫酸卡那霉素具有耐藥性。

4治療

經藥敏試驗，選用高度敏感藥物進行注射治療，同時為達到利尿消腫和保肝解毒的目的，可采用葡萄糖、維生素等進行輔助治療；為強化治療效果，還可在飼料中添加中草藥或微生態制劑。通過上述治療方案，發病豬于7d后精神和食欲逐步恢復正常，水腫消失，2周后回訪，未出現新病例，有效控制了豬場疫情。

5小結與討論

1）豬水腫病是一種急性腸毒血癥，多發于斷奶仔豬，主要特征是發病突然，頭部、耳部、頸部等處紅腫，胃壁、腸系膜顯著水腫。本病致死率高達90%以上，給養殖業造成嚴重的經濟損失。

2）仔豬水腫病的血清型多樣，具有易變性和地域性，對豬場定期進行病原菌的分離鑒定，旨在有針對性地使用常見的優勢菌株制成自家滅活疫苗進行免疫，效果良好；通過對大通縣該豬場仔豬水腫病進行細菌學和血清學調查，明確了仔豬水腫病病原的主要血清型（O141）和藥物敏感性，為本地區仔豬水腫病的防治提供了科學依據。