雞蛋組分蛋白、半乳糖凝集素—3與過敏原IgE抗體聯(lián)合檢測在雞蛋過敏患兒診斷中的價值

唐川婷

[摘要] 目的 探討雞蛋組分蛋白、半乳糖凝集素-3與過敏原IgE抗體聯(lián)合檢測在雞蛋過敏患兒診斷中的價值。 方法 選擇2017年2月～2018年4月在四川大學華西廣安醫(yī)院進行過敏反應篩查的47例食物過敏患者作為研究組，另選擇同期就診的20例無過敏史，且靜脈抽血化驗、雞蛋血清特異性IgE結(jié)果為陰性者作為對照組。對兩組研究對象血清雞蛋組分蛋白、半乳糖凝集素-3與過敏原IgE抗體進行檢測。 結(jié)果 根據(jù)后期隨訪，研究組47例疑似雞蛋過敏患兒中有42例為雞蛋過敏患兒，其他為誤診。研究組sIgE、總IgE水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05）。研究組食入物IgE陽性率為91.49%，吸入物陽性率為82.98%，食入物與吸入物IgE雙陽性率為70.21%。研究組患兒卵白蛋白、卵類黏蛋白、卵轉(zhuǎn)鐵蛋白、溶菌酶OD值均顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05），且對照組OD值接近空白孔。研究組患兒半乳糖凝集素-3水平顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05）。雞蛋組分蛋白對雞蛋過敏患兒診斷的靈敏度、準確性、特異性分別為0.905、0.872、0.601。過敏原IgE對雞蛋過敏患兒診斷的靈敏度、準確性、特異性分別為0.929、0.894、0.600，聯(lián)合檢測對雞蛋過敏患兒診斷的靈敏度、準確性和特異性分別為0.976、0.957、0.831。 結(jié)論 雞蛋組分蛋白、半乳糖凝集素-3與過敏原IgE抗體聯(lián)合檢測對雞蛋過敏患兒診斷的靈敏度、準確性、特異性均較高，具有較高的臨床應用價值。

[關鍵詞] 雞蛋組分蛋白；半乳糖凝集素-3；過敏原IgE；抗體；聯(lián)合檢測；雞蛋過敏；診斷價值

[中圖分類號] R725 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2018）11（b）-0088-04

[Abstract] Objective To investigate the value of combined detection of egg component protein， galactose agglutinin-3 and allergen IgE antibody in the diagnosis of egg allergy. Methods Forty-seven patients with food allergy who were screened in West China-Guang′an Hospital， Sichuan University from February 2017 to April 2018 were selected as study group. Another 20 patients without allergie history and negative results venous blood test and egg serum-specific IgE were selected as the control group. Serum egg component protein， galactose agglutinin-3 and allergen IgE antibody were detected in two groups. Results According to anaphase follow-up， there were 42 cases of egg allergy and the others were misdiagnosed in 47 suspected children with egg allergy. The levels of sIgE and total IgE in the study group were higher than those in the control group， the differences were statistically significant （P < 0.05）. In the study group， the positive rates of IgE and inhales were 91.49% and 82.98%， respectively. The positive rates of ingestion and inhaled IgE were 70.21%. The OD values of ovalbumin， ovomucoid， otransferrin and lysozyme in the study group were significantly lower than those in the control group， the differences were statistically significant （P < 0.05）， and the OD value of the control group was close to the blank hole. The level of galactose agglutinin-3 in the study group was significantly higher than that in the control group， the difference was statistically significant （P < 0.05）. The sensitivity， accuracy and specificity of egg component protein in the diagnosis of children with egg allergy were 0.905， 0.872， 0.601， respectively. The sensitivity， accuracy and specificity of allergen IgE in the diagnosis of children with egg allergy were 0.929， 0.894， 0.600， respectively. The sensitivity， accuracy and specificity of combined detection of egg allergy were 0.976， 0.957， 0.831， respectively. Conclusion The combined detection of egg component protein， galactose agglutinin-3 and allergen IgE antibody is of high sensitivity， accuracy and specificity in the diagnosis of egg allergy， has high value in clinical application.

[Key words] Egg component protein； Galactose agglutinin-3； Allergen IgE； Antibody； Combined detection； Egg allergy； Diagnostic value

雞蛋是日常飲食的常見蛋白類食物，雞蛋過敏是目前嬰幼兒及兒童較為常見的一種食物過敏[1-2]。臨床上，雞蛋過敏可累及口腔黏膜、呼吸、皮膚、消化系統(tǒng)，部分病情嚴重患兒的血管也會受到不同程度的損害，部分發(fā)生嚴重速發(fā)型反應的患兒可引起過敏性休克、進而導致死亡[3-4]。此外，過敏還會影響嬰幼兒及兒童對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，進而使患兒的發(fā)育速度明顯慢于正常兒童。部分對雞蛋過敏的兒童在一段較長時期不食用雞蛋后，再進行口服激發(fā)，可耐受，即對雞蛋不再過敏，但仍有相當比例的兒童持續(xù)對雞蛋過敏[5-7]。雞蛋蛋白豐富，且研究表明其主要致敏蛋白存在于蛋清中。已見文獻報道的23種糖蛋白中，有4種能與人類血清免疫球蛋白E（IgE）結(jié)合并引發(fā)過敏反應，他們分別是卵白蛋白、卵類黏蛋白、卵轉(zhuǎn)鐵蛋白和溶菌酶。其中卵白蛋白相對分子質(zhì)量為45 000，約占雞蛋蛋清總蛋白的54%；卵類黏蛋白的相對分子質(zhì)量為28 000，約占蛋清總蛋白含量的11%；卵轉(zhuǎn)鐵蛋白的相對分子量為80 000，其含量約占蛋清總蛋白含量的12%；溶菌酶的相對分子量為14 000，其含量約占蛋清總蛋白含量的3.4%[8-11]。目前，臨床檢驗雞蛋過敏患兒的“金標準”為體外抗原（UniCap）檢測血液中的特異性IgE，但該方法尚不能有效鑒別過敏兒童是否已進展為雞蛋耐受。在此背景下，本研究旨在探討雞蛋組分蛋白、半乳糖凝集素-3與過敏原IgE抗體聯(lián)合檢測在雞蛋過敏患兒診斷中的價值，為臨床對雞蛋過敏患兒進行準確診斷提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2017年2月～2018年4月在四川大學華西廣安醫(yī)院（以下簡稱“我院”）進行過敏反應篩查的食物過敏患者作為研究對象，根據(jù)患兒病史、靜脈抽血化驗、雞蛋特異性IgE檢測結(jié)果，以及食物排除方法，篩選47例對雞蛋過敏且無其他疾病患者作為研究組，其中有男29例，女18例；年齡1個月～10歲，平均（3.42±0.41）歲；臨床癥狀可見過敏性休克、特異性皮炎、慢性蕁麻疹、輕度皮炎伴搔癢、過敏性哮喘、過敏性鼻炎、變應性咳嗽。另選擇我院同期就診的20例無過敏史，且靜脈抽血化驗、雞蛋血清特異性IgE結(jié)果為陰性者作為對照組，其中男13例，女7例；年齡1個月～10歲，平均（3.51±0.43）歲。兩組患兒性別、年齡等一般資料差異無統(tǒng)計學意義（P > 0.05），具有可比性。本研究方案經(jīng)我院醫(yī)學倫理委員會批準，參與研究者及患者家屬均簽署知情同意書。研究組對象均為經(jīng)病史、靜脈抽血化驗、雞蛋特異性IgE檢測確診為疑似雞蛋過敏患者，且排除其他疾病；對照組入組對象均排除雞蛋過敏可能，且不伴有其他疾病。

1.2設備與試劑

全自動過敏原膜條操作儀（北京海瑞祥天生物科技有限公司，J121220061），過敏原IgE抗體檢測試劑盒（7項吸入物，20150712；7項食入物，20161102），購自杭州浙大迪迅生物基因工程有限公司。

1.3 檢測方法

1.3.1 過敏原IgE檢測 采集兩組患兒空腹靜脈血，室溫靜置30 min，使用80-2電動離心機（常州翔天實驗儀器廠）離心分離血清，放置于-20℃保存，進行集中檢測，應用酶聯(lián)免疫吸附法對所采集標本同時檢測食入物、吸入物過敏原sIgE抗體，總IgE抗體，7項食入物包括蛋清/蛋黃、牛奶、鱈魚/蛙魚/鱸魚、蝦/蟹/扇貝、牛肉/羊肉、芒果、花生，7項吸入物包括屋塵螨/粉塵螨、屋塵、柏樹、豚草、點青霉、貓/狗毛皮屑、蟲類/飛蛾和蜜蜂。所有實驗操作均嚴格按照試劑盒操作說明書進行，結(jié)果使用過敏原膜條判讀軟件系統(tǒng)進行判讀。

1.3.2 雞蛋組分蛋白檢測 采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測患者血清中卵白蛋白、卵類黏蛋白、卵轉(zhuǎn)鐵蛋白、溶菌酶含量，在450 nm處測定OD值。

1.3.3 半乳糖凝集素-3水平測定 采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清中半乳糖凝集素-3的含量，試劑盒購自杭州浙大迪迅生物基因工程有限公司，所有操作嚴格按照說明書進行。

1.4 結(jié)果判定

1.4.1 過敏原IgE結(jié)果判定 食入物、吸入物過敏原sIgE抗體≥0.35 U/mL即可判定為陽性，<0.35 U/mL則為陰性。年齡<3歲的患者，總IgE≥20 U/mL為陽性；年齡3～<6歲的患者，總IgE≥35 U/mL為陽性；年齡6～20歲時，總IgE≥51 U/mL則可判定為陽性，反之則判定為陰性[12]。

1.4.2 血清半乳糖凝集素-3結(jié)果判定 參考相關文獻[13]，當血清半乳糖凝集素-3水平≥5 ng/mL時即為陽性，反之則為陰性。

1.4.3 診斷效能判斷 根據(jù)資料性質(zhì)，以四格表進行相關性診斷評價。以實驗室檢測指標結(jié)合后期隨訪最終確診結(jié)果為“金標準”，敏感度=真陽性/（真陽性+假陰性）×100%，準確度=（真陽性+真陰性）/總例數(shù)×100%，特異度=真陰性/（假陽性+真陰性）×100%。

1.5 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 22.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料用均數(shù)±標準差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組過敏原IgE水平及IgE陽性率分析

根據(jù)后期隨訪，研究組47例疑似雞蛋過敏患兒中有42例為雞蛋過敏患兒，其他為誤診。研究組sIgE、總IgE水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05），見表1。研究組食入物IgE陽性率為91.49%，吸入物陽性率為82.98%，食入物與吸入物IgE雙陽性率為70.21%。

2.2 兩組雞蛋組分蛋白、半乳糖凝集素-3水平比較

研究組患兒卵白蛋白、卵類黏蛋白、卵轉(zhuǎn)鐵蛋白、溶菌酶的OD值均顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05），且對照組各項指標的OD值接近空白。研究組患兒半乳糖凝集素-3水平顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05）。見表2。

2.3不同診斷方法對雞蛋過敏患兒的診斷結(jié)果

以雞蛋組分蛋白診斷的40例雞蛋過敏患兒中有2例為陰性，以過敏原IgE診斷的41例雞蛋過敏患兒中有2例為陰性，聯(lián)合檢測診斷的42例雞蛋過敏患兒中有1例為陰性，見表3。由表4可以得出聯(lián)合檢測診斷的靈敏度、準確性和特異性均最高。

3討論

食物過敏是臨床常見的過敏性疾病之一，臨床調(diào)查顯示，在發(fā)達國家約有1/3的兒童至少有1次食物過敏史經(jīng)歷。根據(jù)報告，美國每年約發(fā)生超過30 000例次食物引起的嚴重過敏反應，其中約有150例會因此而失去生命。雞蛋營養(yǎng)價值高，在日常食物中占有一定的比例，因此在眾多食物過敏中有著特殊的地位和意義。作為一種常見的食物過敏原，雞蛋不僅是各類蛋白制品的來源，而且也作為多種副食的添加輔料，除此之外，蛋清還是絕大多數(shù)嬰幼兒疾病疫苗培養(yǎng)基的主要成分。當雞蛋過敏患兒攝入以上制品時，可引起呼吸、皮膚以及消化系統(tǒng)過敏癥狀，部分患兒甚至出現(xiàn)多系統(tǒng)過敏性癥狀及過敏性休克。雞蛋過敏不僅對患兒的營養(yǎng)吸收功能和生長發(fā)育產(chǎn)生影響，且由于患兒進食障礙可引起父母及其他監(jiān)護人心理焦慮，對整個家庭的生活也會產(chǎn)生不同程度的影響。臨床對雞蛋過敏患兒的診斷目前主要依靠血清過敏性IgE抗體水平，但臨床實踐發(fā)現(xiàn)其診斷存在一定的誤診率，因此尋找一種高靈敏度、高準確性、高特異性的診斷雞蛋過敏患兒的方法具有重要意義。在此背景下，本研究旨在探討雞蛋組分蛋白、半乳糖凝集素-3與過敏原IgE抗體聯(lián)合檢測在雞蛋過敏患兒診斷中的價值。

有研究表明，在雞蛋過敏患者體內(nèi)，血清半乳糖-3凝集素表達水平明顯高于健康人群，且其表達水平與雞蛋特異性IgE含量呈顯著正相關[14-16]。對于臨床表現(xiàn)為過敏性哮喘、過敏性鼻炎以及慢性蕁麻疹的雞蛋過敏患者，其血清中的半乳糖凝集素-3水平也明顯升高。因此，目前臨床認為血清半乳糖凝集素-3水平可在一定程度上反映雞蛋過敏的程度[15-16]。本研究結(jié)果也顯示，研究組患兒半乳糖凝集素-3水平顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05）。此外，雞蛋組分蛋白是目前公認的蛋清過敏原，主要有4類，分別為卵類黏蛋白、卵白蛋白、卵轉(zhuǎn)鐵蛋白和溶菌酶。有研究表明臨床雞蛋過敏患者體內(nèi)以卵類黏蛋白、卵白蛋白陽性居多[17-18]。本研究結(jié)果顯示，研究組患兒卵白蛋白、卵類黏蛋白、卵轉(zhuǎn)鐵蛋白、溶菌酶的OD值均顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05），且對照組OD值接近空白，上述結(jié)果提示雞蛋組分蛋白可作為診斷雞蛋過敏患兒的一個指標。

本研究分別分析了雞蛋組分蛋白、半乳糖凝集素-3及過敏原IgE抗體對雞蛋過敏患兒的診斷價值，結(jié)果顯示，以雞蛋組分蛋白診斷的40例雞蛋過敏患兒中有2例為陰性，以過敏原IgE診斷的41例雞蛋過敏患兒中有2例為陰性，聯(lián)合檢測診斷的42例雞蛋過敏患兒中有1例為陰性。雞蛋組分蛋白對雞蛋過敏患兒診斷的靈敏度、準確性、特異性分別為0.905、0.872、0.601。過敏原IgE對雞蛋過敏患兒診斷的靈敏度、準確性、特異性分別為0.929、0.894、0.600，聯(lián)合檢測對雞蛋過敏患兒診斷的靈敏度、準確性和特異性分別為0.976、0.957、0.831。從上述結(jié)果可以看出，聯(lián)合檢測對雞蛋過敏患兒診斷具有較高的準確性和特異性。

綜上所述，可以得出結(jié)論：雞蛋組分蛋白、半乳糖凝集素-3與過敏原IgE抗體聯(lián)合檢測對雞蛋過敏患兒診斷的靈敏度、準確性、特異性均較高，具有較高的臨床應用價值。

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（收稿日期：2018-06-06 本文編輯：任 念）