不同化學發光檢測系統測定PCT結果的相關性分析

沈素晶，鄧超，李靄文，譚俊青

(廣東省第二中醫院檢驗科，廣東 廣州 510095)

同一醫院同一項目有多套檢測系統已是相當普遍的現象，各個檢測系統對同一份標本的同一項目檢測結果應具有可比性，這是檢驗人員、所有廠商等共同努力的方向，追求檢驗結果具有可比性是最實在的質量[1]。降鈣素原（PCT）作為炎癥標志物，在鑒別細菌性與非細菌性感染中相對其他炎癥標志物有較高的靈敏度和特異性，具有極大的早期診斷價值[2，3]。PCT的檢測也日漸成為常規檢測項目，為了能夠使檢測方法更加規范，檢驗結果更加準確，我們在本院實驗室2套化學發光檢測系統間進行了PCT的相關性分析，現報道如下。

1 材料與方法

1．1 檢測標本 第三方質控品由郎道公司提供，批號 23745190 和 23748190，有效期均為 2018．9．30；患者血清163例，空腹采集靜脈血，及時分離血清檢測，經羅氏Cobas e 602系統檢測所選血清標本的降鈣素原的濃度范圍在0．01～100ng/ml之間。

1．2 檢測系統 新產業生物的Maglumi 2000 Plus全自動化學發光分析儀Snibe系統及其配套校準品，Snibe 系統檢測 PCT 的范圍是 0．01～100nmol/L。羅氏Cobas 602電化學發光分析系統及Elecsys BRAHMS PCT試劑盒及其配套校準品

1．3 檢測方法 新產業Maglumi 2000 Plus檢測系統Snibe，采用化學發光免疫分析技術，發光標記物異魯米諾及其衍生物直接被激發發光，通過測定光強檢測待測物質。羅氏Cobas 602采用電化學發光法，通過光電倍增器測量發光強度，Elecsys軟件自動通過校準曲線計算得到檢測結果。

以實驗室日常使用的兩個水平的質控物來比較兩個系統的精密度，每天檢測1次，連續檢測20d。另外，以羅氏廠家提供的兩個濃度的定值參考物質做回收實驗驗證準確度。取定值樣本互相配比稀釋兩個濃度連續檢測取定值樣本互相配比稀釋三個濃度連續檢測3次去平均值，計算其回收率R。

以羅氏cobas 602系統檢測從門診，體檢和住院患者的血清標本，從中選擇低中高值標本163例，濃度包含 0．01～100ng/ml。 比較兩個系統的相關性，及評價新產業系統的臨床滿足程度。

1．4 判斷標準 以澳大利亞室間質量評價標準T±4或T±20%作為日間CV的允許范圍；以%SE小于澳大利亞室間質量評價標準規定的允許誤差為臨床可接受標準，以參考值上限、標準檢測系統本次不同濃度標本檢測均值和醫學決定水平處的系統誤差來判斷檢測系統間是否可以接受[4，5]。準確度的評價標準以回收率R在90%～110%為可接受范圍。

NCCLS的EP－9A2文件規定：兩方法的相關系數R2≥0．95，則兩方法結果一致。中國國家食品藥品監督管理局醫療器械審評中心的 《體外診斷試劑分析性能評估（準確度－方法學比對）指導原則》規定：免疫類產品兩方法學的相關系數R2≥0．90，則兩方法測定結果為一致。本文按照上述兩標準對新產業系統和羅氏系統檢測結果一致性進行判斷。

3統計學分析 檢測結果的相關性分析采用線性回歸分析，以兩方法相關系數R作為判斷2種方法一致性的標準。檢測數據采用Excel軟件和SPSS 20．0軟件進行數據可比性分析、線性回歸方程及相關系數R值。

4 檢測結果

4．1 兩套檢測系統測定2個水平PCT質控物測定結果見表1，其日間CV及總CV均小于T±20%的日間CV允許范圍。表1可見新產業Snibe系統在測定PCT質控物時均值與羅氏C602相近，且精密度在允許范圍內。

表1 不同檢測系統2個水平PCT質控物測定結果

4．2 兩套系統正確度比較 選用的兩個定值校準品濃度分別為 0．562ng/ml和 42．165ng/ml， 分別以1：4和4：1的比例混合為兩個濃度的配制樣本，以Snibe系統和C602系統測定3次求平均值計算回收率，結果如下：

表2 Snibe準確度驗證結果

表3 C602準確度驗證結果

從表2表3可見兩個系統的回收率均在90%～110%范圍內，表明兩個系統的準確度在臨床可接受范圍內。

4．3 PCT檢測結果相關性分析 用新產業Snibe系統和羅氏coba 602電化學發光法同時對受檢血清標本進行定量分析見表4。結果表明，兩種方法檢測結果的差異無統計學意義（P＜0．05）。

4．4 新產業Snibe系統與羅氏602系統比對的敏感度、相對特異性、總體符合率結果：新產業Snibe系統的相對敏感度為98．8%，相對特異性為100%，與羅氏C602系統測定結果的總體符合率為99．3%，兩者一致性很好，結果見表5。

表4 兩個系統測定不同濃度的新鮮血清PCT結果（ng/ml）

表5 新產業Snibe與羅氏C602比對結果（例數）

4．5 新產業Maglumi Snibe系統與羅氏C602系統在陰性結果（PCT＜0．05ng/ml）內的符合率結果：新產業Snibe系統與羅氏602系統測定結果的符合率為97．1%，相關系數R2為0．968兩者一致性較好，見圖1。

圖1 新產業Snibe系統與羅氏602在PCT＜0.05ng/ml檢測區間內的相關性

4．6 新產業Snibe系統與羅氏602系統在低、高風險膿毒血癥范圍內的相關性比對 德國重癥學會在膿毒血癥診斷中提出 0．5ng/ml和 2．0ng/ml作為診斷截點，PCT＜0．5ng/ml表明膿毒癥不可能；PCT＞2．0ng/ml表明膿毒癥高風險，非常有可能成為嚴重膿毒癥或膿毒血癥休克。

結果表明，兩種方法檢測結果的差異無統計學意義（P＜0．05），當在 PCT＜0．5 ng/ml范圍內，相關系數 R2=0．949 （見圖 2）；在 PCT＞2．0 ng/ml，相關系數 R2=0．977（圖 3）。 根據 NCCLS 的 EP－9A 規定，兩種方法檢測結果相關性良好。表明新產業檢測降鈣素原在預測臨床疾病效果與羅氏相當。

圖2 新產業Snibe與羅氏602檢測PCT結果在膿毒癥低風險范圍PCT＜0.5ng/ml內比對結果

圖3 新產業Snibe與羅氏602檢測PCT結果在膿毒癥高風險范PCT＞2.0ng/ml比對結果

5 討論

PCT作為感染性疾病的診斷指標，具有敏感度高、特異度好、操作簡單、結果準確快速等優點，已經逐漸被臨床所接受并廣泛應用，在感染性疾病的早期診斷、治療效果監測及預后判斷等方面有重要的臨床意義。隨著臨床研究的不斷進展，PCT也得到廣泛應用[6]。如在肝衰竭合并感染[7]、人中樞神經系統感染診斷[8]、克羅恩病[9]及指導抗生素的使用等[10]。目前檢測PCT的實驗室檢測方法包括：放射免疫法[11]、雙抗夾心免疫熒光法[12]、膠體金標法[13，14]、透射免疫濁度法[15]。目前最常用的檢測方法是電化學發光法[16]，而且這種免疫檢測系統不會受到溶血、脂血和黃疸標本的影響。但其中的相關性仍未有全面的相關性分析。

新產業Maglumi系統采用化學發光免疫標記的方法檢測降鈣素原。近年來，化學發光免疫分析發展速度極快，結合化學發光的高靈敏度和抗體技術的高特異性，以靈敏度高、分離效果好、測定時間短、批間誤差小、無放射污染等特點，已經從實驗室進入臨床醫學的常規應用逐步發揮主流作用。加之其檢測成本比羅氏系統低，檢測時間僅19min，可大大減少患者的經濟壓力和縮短檢測時間。

本試驗中，經過驗證，新產業的化學發光法與羅氏的電化學法在檢測PCT時精密度和準確度均能滿足臨床要求并能達到比較高的水平。新產業在檢測病人血清標本與羅氏系統相關性達99%以上，在預測膿毒血癥的相關性也達95%。表明新產業系統與標準化的羅氏系統具有良好的等效性，并且能滿足臨床需求。

綜上所述，本實驗新引進的新產業Maglumi 2000 Plus在檢測PCT時敏感度，精密度和相關性均可滿足臨床需求，可投入臨床使用。但因所選臨床病例不夠大量，日后使用過程中仍需密切觀察其性能，及時做好校準和維護，以便更好服務于臨床。