血清RANKL、tP1NP、N-MID、B-CTX及25-羥維生素D在骨質疏松患者中的變化及診斷價值

李自軍

(鄭州市骨科醫院檢驗科，河南 鄭州 450052)

我國骨質疏松癥的發病率位于骨科常見病首位，并且還在不斷攀升[1]。該病后期檢測和治療費用較高，因而尋找影響骨質疏松發病的關鍵因子，加深對骨質疏松發病機制的理解，探尋早期的干預方式和靶點，對骨質疏松的治療至為關鍵。

骨代謝標志物是對骨質疏松早期診斷的重要指標，但因骨質疏松患者常伴有生理上的改變，可能引發漏診。研究發現絕經后雌激素缺失及炎性反應時，腫瘤壞死因子及炎性因子前體白細胞介素1可通過增加間質細胞和成骨細胞核因子κB受體活化因子配體（RANKL）的表達調控骨吸收，并引起單核細胞向骨細胞分化[2]。RANKL的表達變化也越來越受到學者們的重視。本文深入探討了骨質疏松患者血清RANKL及多種骨代謝標志物的水平變化，旨在為骨質疏松的臨床早期診斷和治療提供新的思路。現報告如下。

1 資料與方法

1．1 一般資料 選取我院 2016年 5月－2017年4月收治并確診的骨質疏松患者89例為病例組、正常無骨質疏松人群作為對照組。

病例組，男17例、女72例，年齡56～83歲，平均（70．1±11．0）歲，骨密度（T 值）－3．59±0．61。 對照組，男 20 例、女 70 例，年齡 53～82 歲，平均（68．8±13．1）歲，骨密度（T 值）－1．33±0．52。 兩組研究對象的年齡、性別比較，具有均衡性（P＞0．05）。

1．2 納入排除標準[3]

1．2．1 納入標準 骨質疏松的診斷標準參考人民衛生出版社《診斷學》第八版中的標準[2]；骨質疏松患者的骨密度（T值）≤－2．5SD；對照組來源于體檢健康的自愿者；本研究獲得研究對象的同意及醫學倫理委員會的批準。

1．2．2 排除標準 伴有嚴重的感染性疾病；甲狀腺功能疾病；伴有糖尿病；長期使用糖皮質激素、免疫調節類藥物；伴有骨轉移腫瘤、肝腎功能疾病；伴有其他影響本研究實驗指標的疾病。

1．3 指標檢測方法 所有檢查對象均于入院次日清晨抽取5ml空腹靜脈血，離心后取血清，－80℃條件下備存。使用電化學發光法法對血清中RANKL、tP1NP、N－MID、B－CTX 及 25－羥維生素 D 濃度進行檢測，試劑盒購于南京建成生物研究所。

1．4 統計學方法 統計軟件采用SPSS 16．0，采用均數±標準差（±s）進行統計描述，組間比較采用t檢驗；繪制ROC曲線，計算最佳診斷臨界值及其對應的靈敏度、特異度、漏診率、誤診率、ROC曲線下面積AUC值；P＜0．05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2．1 兩組研究對象的血清 RANKL、tP1NP、N－MID、B－CTX及25－羥維生素D比較 病例組患者的血清RANKL顯著高于對照組，差異具有統計學意義（P＜0．05）；病例組患者的血清 25－羥維生素 D 顯著的低于對照組，差異有統計學意義（P＜0．05）；病例組患者的血清 tP1NP、N－MID、B－CTX 與對照組比較，差異無統計學意義（P＞0．05），見表 1。

2．2 血清RANKL、25－羥維生素D鑒別診斷骨質疏松患者的臨床價值 血清RANKL鑒別診斷骨質疏松的最佳臨界點值為0．175ng/ml，診斷靈敏度為82．14%、 特異度為85．06%、ROC曲線下面積AUC值為0．833；血清25－羥維生素D鑒別診斷骨質疏松的最佳臨界點值為30．50nmol/ml，診斷靈敏度為79．92%、 特異度為83．47%、ROC曲線下面積AUC值為0．814；血清RANKL+25－羥維生素D別診斷骨質疏松的靈敏度為87．42%、特異度為94．01%、ROC曲線下面積AUC值為0．916，見表 2、圖1。

3 討論

骨質疏松是常見老年病，具有發病率高、進程緩慢等特點，隨著我國進一步的老齡化，發病率具有明顯的攀升趨勢。隨著對骨質疏松發病機制和原理的深入，研究重點更趨向于該病的早期診斷和治療的方法的探討，進而延緩病程發展，提高預防能力[4]。

表1 兩組研究對象的血清RANKL、tP1NP、N-MID、B-CTX及25-羥維生素D比較（±s）

表1 兩組研究對象的血清RANKL、tP1NP、N-MID、B-CTX及25-羥維生素D比較（±s）

組別 n病例組對照組t值P值89 90 RANKL（ng/ml） tP1NP（ng/ml） N－MID（ng/ml） B－CTX（ng/ml） 25－羥維生素 D（nmol/ml）0．214±0．031 0．085±0．026 30．178＜0．001 53．17±11．62 50．84±9．71 1．456 0．147 17．53±4．63 16．90±4．98 0．876 0．382 0．53±0．23 0．48±0．21 1．519 0．131 32．61±13．39 41．84±14．50 4．423＜0．001

表2 血清RANKL、25-羥維生素D鑒別診斷骨質疏松患者的臨床價值

圖1 血清RANKL、25-羥維生素D單獨及聯合應用鑒別診斷骨質疏松患者的ROC曲線

骨質疏松的診斷主要依靠骨代謝因子及其他相關因子為參考。受體活化因子RANKL及RANK歸屬以TNF受體超家族，兩者可在破股前體細胞和破骨細胞中結合，并在破骨細胞的溶骨、分化及生存過程發揮重要作用[5，6]。RANKL及RANK結合后還可召集伴侶蛋白TNF受體相關因子6至漿膜，三者的有機結合對成骨細胞的分化和形成作用明顯，嚴芳娜[7]的研究發現大鼠缺乏上述因子就會出現嚴重的破骨功能障礙。RANK除了能與RANKL結合外，還可活化NF－KB、蛋白激酶 B、T細胞核因子C1及細胞外信號調節酶等多個信號通路，并在破骨細胞的溶骨、分化及生存過程發揮作用[8，9]。本結果顯示病例組患者的血清RANKL顯著的高于對照組，差異具有統計學意義（P＜0．05）。上述結果提示RANKL具有成為骨質疏松早期診斷的生物標志物的可能性。

骨代謝標志物可有效反映破骨細胞和成骨細胞功能、骨代謝變化速率及骨轉換的速率和頻率。最初骨代謝指標被認為是一類重要的可替代骨密度變化率的指標，現在更被認為是一類評估骨質量的有效指標并可用來評估未來發生骨折的風險性，還可被用來作為一種評估藥物治療效果的有效指標[10]。本研究結果顯示病例組患者的血清25－羥維生素D顯著低于對照組，差異有統計學意義（P＜0．05）。 上述結果提示，25－羥維生素 D 具有成為骨質疏松早期診斷的代謝標志物的可能性。這可能與正常生理濃度的25－羥維生素D具有有效地防止骨質疏松，保護骨的作用有關。25－羥維生素D作為調節鈣磷代謝的脂溶性維生素，在維持體內鈣磷濃度穩定及鈣的吸收方面具有重要作用。Nan等[11]的研究證實其還具有增強肌力、優化骨重建、促進正常骨細胞的分化等多重作用。

病例組患者的血清 tP1NP、N－MID、B－CTX 與對照組比較，差異無統計學意義（P＞0．05）。 這可能因為人體的骨量峰值不同有關，達到峰值骨量后，經過一段時間進入骨量丟失期后，表現為絕對或相對的骨吸收和骨形成，而血清tP1NP、N－MID、BCTX主要反映的是骨代謝情況[12－14]。現階段骨質疏松的診斷金標準是骨密度，一個處于骨量峰值的患者雖然處在骨高轉換狀態，但可因較好的骨量儲備而未發生骨質疏松，同理一個處于骨量低值的患者雖然處在骨低轉換狀態，但可因未有較好骨量儲備而出現骨質疏松，血清tP1NP、N－MID、BCTX只反映骨轉換情況，而對骨質疏松的診斷效果較差[15]。

對血清RANKL、25－羥維生素D鑒別診斷骨質疏松患者的臨床價值研究結果顯示，血清RANKL鑒別診斷骨質疏松的最佳臨界點值為0．175ng/ml，診斷靈敏度為 82．14%、特異度為 85．06%、ROC曲線下面積AUC值為0．833；血清25－羥維生素D鑒別診斷骨質疏松的最佳臨界點值為30．50nmol/ml，診斷靈敏度為 79．92%、特異度為 83．47%、ROC曲線下面積AUC值為0．814；血清 RANKL+25－羥維生素D別診斷骨質疏松的靈敏度為87．42%、特異度為 94．01%、ROC曲線下面積 AUC值為0．916。上述結果提示血清 RANKL、25－羥維生素 D對骨質疏松的診斷均具有較高的特異度和靈敏度，若兩種指標聯合應用，特異度和靈敏度均可得到有效提高。

綜述所述，骨質疏松患者血清RANKL、25－羥維生素D水平較正常人群變化較為明顯，二者聯合應用對于鑒別診斷骨質疏松具有一定的臨床價值。