將樂縣牛羊布魯氏菌病血清學(xué)檢測(cè)與流行病學(xué)分析

邱成文 將樂縣古鏞鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心 福建將樂 353300

1 前 言

布魯氏菌病（以下簡(jiǎn)稱布病）是由布魯氏菌屬細(xì)菌引起牛、羊、豬、鹿、犬等哺乳動(dòng)物和人類共患的一種傳染病。我國將其列為二類動(dòng)物疫病。我國在20世紀(jì)50年代曾廣泛流行，部分地區(qū)人畜感染率高達(dá)50%；20世紀(jì)八九十年代，國家對(duì)布病的防控力度加大，疫情降至歷史最低水平。但近幾年隨著我國家畜飼養(yǎng)量不斷增加、動(dòng)物及其產(chǎn)品流通頻繁，部分地區(qū)動(dòng)物及人感染布病呈持續(xù)上升勢(shì)頭，不僅嚴(yán)重影響畜牧業(yè)生產(chǎn)，也嚴(yán)重危及人民身體健康和公共衛(wèi)生安全。根據(jù)農(nóng)業(yè)部對(duì)我國布病重點(diǎn)地區(qū)22個(gè)縣的248個(gè)定點(diǎn)場(chǎng)群的監(jiān)測(cè)結(jié)果，牛羊的個(gè)體陽性率分別達(dá)到3.1%和3.3%，群體陽性率分別達(dá)到29%和34%[1]。2015年福建省牛、羊布病場(chǎng)群陽性率分別為0%和3.4%，2016年分別為0%和1.19%。為摸清將樂縣牛羊布魯氏菌病流行狀況，本縣開展了牛羊布魯氏菌病調(diào)查，現(xiàn)將調(diào)查情況報(bào)道如下。

表1 2017年度將樂縣牛羊養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）養(yǎng)殖存欄匯總表

表2 2017年度將樂縣牛羊布魯氏菌病抽檢養(yǎng)殖場(chǎng)及數(shù)量表

2 基線調(diào)查

2.1 養(yǎng)殖現(xiàn)狀 按照業(yè)務(wù)部門的部署，2017年對(duì)轄區(qū)內(nèi)所有牛、羊養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）進(jìn)行一次梳理和登記造冊(cè)。將牛存欄20頭以上的養(yǎng)牛場(chǎng)和羊存欄在50頭以上的養(yǎng)羊場(chǎng)認(rèn)定為養(yǎng)殖場(chǎng)，以場(chǎng)為單位進(jìn)行調(diào)查登記；將存欄20頭以下的養(yǎng)牛戶、存欄在50頭以下的養(yǎng)羊場(chǎng)戶，認(rèn)定為養(yǎng)殖散戶，以村為單位進(jìn)行調(diào)查登記。

調(diào)查結(jié)果顯示，2017年將樂縣牛羊養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）總計(jì)38個(gè)，年存欄3 318頭。按養(yǎng)殖種類分類：山羊養(yǎng)殖戶34場(chǎng)（戶）、乳山羊養(yǎng)殖戶2戶、乳牛養(yǎng)殖戶2戶；按養(yǎng)殖規(guī)模分類：養(yǎng)殖場(chǎng)28個(gè)，養(yǎng)殖散戶10個(gè)（見表1）。我縣沒有種牛（羊）場(chǎng)，養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）內(nèi)的種用牛、羊必須全部抽檢，有流產(chǎn)癥狀的母畜全檢。隨著我縣農(nóng)用機(jī)械的推廣，散養(yǎng)水牛逐年減少，現(xiàn)存欄量很少，遂不作統(tǒng)計(jì)和抽樣。

2.2 抽樣要求 結(jié)合本縣牛羊養(yǎng)殖現(xiàn)狀，遵循流行病學(xué)調(diào)查的統(tǒng)計(jì)學(xué)和隨機(jī)抽樣原則，首先確定采樣的養(yǎng)殖場(chǎng)數(shù)及行政村數(shù)，再確定養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)和行政村內(nèi)的采樣個(gè)體數(shù)。以隨機(jī)為原則，兼顧覆蓋全縣各鄉(xiāng)鎮(zhèn)，同時(shí)滿足基線調(diào)查方案中的其他條件，最終確認(rèn)抽檢21個(gè)場(chǎng)村，共計(jì)采樣556頭份（見表2）。

3 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

3.1 樣品來源及處理 待檢血清樣本分別來自全縣2戶乳牛散養(yǎng)戶、2戶乳山羊散養(yǎng)戶、17個(gè)山羊養(yǎng)殖場(chǎng)（戶），涉及10個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的養(yǎng)殖場(chǎng)和散養(yǎng)戶。待檢牛羊采用頸靜脈采集血樣，共采集556頭份。采用3 500～4 000 r/min離心10 min分離血清，-20℃保存待檢。

3.2 主要試劑及設(shè)備 布魯氏菌病虎紅平板凝集試驗(yàn)抗原及試管凝集試驗(yàn)抗原，布魯氏菌病標(biāo)準(zhǔn)陽性血清、陰性血清（生產(chǎn)廠家：青島易邦生物工程有限公司）。一次性塑料板、吸管、牙簽、0.5%石碳酸生理鹽水、試管、試管架、溫箱、酒精棉、1 mL注射器、工作服、一次性帽子、一次性口罩、膠靴、記錄表等。

3.3 檢測(cè)方法 采集血清樣品采用動(dòng)物布魯氏菌病診斷技術(shù)（GB/T18646-2002）進(jìn)行虎紅平板凝集試驗(yàn)初檢，平板凝集試驗(yàn)因其簡(jiǎn)便易行、方便快捷，常用于現(xiàn)場(chǎng)初步檢驗(yàn)。但因其常伴有假陽性，檢出率較高，因而根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)GB/T18646-2002采用試管凝集試驗(yàn)對(duì)陽性樣品進(jìn)行復(fù)核[2]。

3.4 結(jié)果判定

3.4.1 虎紅平板凝集試驗(yàn) 經(jīng)4 min內(nèi)出現(xiàn)肉眼可見凝集現(xiàn)象者判斷為陽性；無凝集現(xiàn)象，呈均勻粉紅色者判定為陰性。

3.4.2 試管凝集試驗(yàn) 凝集物無沉淀，液體均勻混濁，判定為陰性；出現(xiàn)“++”以上凝集現(xiàn)象時(shí)，受檢血清判定為陽性。

4 結(jié)果與分析

布魯氏菌病初檢及復(fù)檢結(jié)果見表3。共計(jì)檢測(cè)牛羊血清556份，初檢結(jié)果中有10份疑似陽性樣品，再使用試管凝集試驗(yàn)復(fù)檢后均為陰性。結(jié)果為陰性556份，陽性0份。

表3 2017年度將樂縣牛羊布魯氏菌病檢測(cè)結(jié)果

5 存在問題

5.1 宣傳力度不夠 從將樂縣對(duì)牲畜飼養(yǎng)員、屠宰以及與動(dòng)物密切接觸布病的高危人群發(fā)放布病防控問卷調(diào)查表來看，掌握的防控知識(shí)都偏低，養(yǎng)殖戶了解布病相關(guān)知識(shí)比散養(yǎng)戶（村）的更多些，但比例都很低，養(yǎng)殖戶知曉率在30%，散養(yǎng)戶（村）的在10%。

5.2 防護(hù)意識(shí)不強(qiáng) 養(yǎng)殖戶對(duì)布病的防控意識(shí)和自我保護(hù)意識(shí)相對(duì)薄弱，尤其是在日常養(yǎng)殖過程中預(yù)防意識(shí)薄弱，如在流產(chǎn)物處理、接生時(shí)，不戴手套和口罩等防護(hù)用品，而是直接接觸，且不消毒。牲畜飼養(yǎng)員等重點(diǎn)人群基本沒有參加布病血清學(xué)抗體檢測(cè)和預(yù)防接種操作。

5.3 檢疫申報(bào)不足 養(yǎng)殖戶調(diào)入動(dòng)物及其產(chǎn)品存在隨意性，許多養(yǎng)殖戶在調(diào)入之前極少與當(dāng)?shù)孬F醫(yī)部門聯(lián)系，沒有提供牲畜布病《檢驗(yàn)報(bào)告》，調(diào)入后也不配合監(jiān)測(cè)，存在疫病發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。

6 防控對(duì)策

通過該次檢測(cè)分析，將樂縣牛羊基本上不存在布病。但不能放松對(duì)布病的防控工作，要樹立牲畜布病防控的長(zhǎng)期性和復(fù)雜性，堅(jiān)決克服厭戰(zhàn)情緒和麻痹思想，還要重點(diǎn)做好五個(gè)方面工作。

6.1 加強(qiáng)宣傳教育 加大科普宣傳教育，尤其是對(duì)與動(dòng)物密切接觸者等重點(diǎn)人群的布病防控基本知識(shí)的宣傳教育和技術(shù)推廣，提高防控意識(shí)和自我保護(hù)意識(shí)。同時(shí)，加大對(duì)《中華人民共和國動(dòng)物防疫法》、《動(dòng)物檢疫管理辦法》、《反芻動(dòng)物產(chǎn)地檢疫規(guī)程》等有關(guān)法律法規(guī)宣傳教育和執(zhí)法力度。

6.2 堅(jiān)持自繁自養(yǎng) 強(qiáng)化自繁自養(yǎng)意識(shí)，需引種時(shí)，首先要了解引種地區(qū)牛、羊布病防控情況，并抽樣檢測(cè)布病為陰性，方可引進(jìn)，同時(shí)要隔離飼養(yǎng)觀察30 d以上，無疫病才能并群。

6.3 嚴(yán)格檢疫監(jiān)測(cè) 切實(shí)加強(qiáng)外購牲畜監(jiān)管，落實(shí)報(bào)檢和抽檢工作，官方獸醫(yī)必須認(rèn)真查驗(yàn)免疫標(biāo)識(shí)，經(jīng)過檢疫檢測(cè)合格并取得《檢驗(yàn)報(bào)告》，方可出具檢疫證明上市流通，防止患畜及陽性畜進(jìn)入養(yǎng)殖區(qū)。定期對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）開展布魯氏菌病流行病學(xué)調(diào)查和血清學(xué)檢測(cè)，對(duì)監(jiān)測(cè)出陽性的牲畜堅(jiān)決撲殺，對(duì)其相關(guān)產(chǎn)物、排泄物、污染的墊料按照《病害動(dòng)物和病害動(dòng)物產(chǎn)品生物安全處理規(guī)程》（GB 16548-2006）進(jìn)行無害化處理。

6.4 強(qiáng)化消毒滅源 定期對(duì)生產(chǎn)用具和場(chǎng)地進(jìn)行徹底消毒，可采用1%來蘇爾、20%漂白粉等消毒。對(duì)牛羊圈舍環(huán)境、接羔點(diǎn)，特別是接觸流產(chǎn)胎兒、胎盤、羊水、流產(chǎn)物、排泄物等污染場(chǎng)地，必須徹底消毒滅源和無害化處理。

6.5 強(qiáng)化技術(shù)支撐 獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室診斷為動(dòng)物疫病防控提供重要理論依據(jù)和數(shù)據(jù)憑證，加大對(duì)基層獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的規(guī)范化建設(shè)，進(jìn)一步提升基層獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室裝備和落實(shí)畜牧獸醫(yī)工作人員衛(wèi)生津貼等待遇。將虎紅平板凝集試驗(yàn)和試管凝集試驗(yàn)有機(jī)結(jié)合起來，就能有效防止布魯氏菌病的誤診和漏診。