不明原因反復自然流產患者外周血凝血相關因子水平及臨床意義

周偉

（上饒市婦幼保健院，江西 上饒 334000）

復發性流產（recurrent spontaneous abortion，RSA）是妊娠常見的并發癥之一，是指孕齡婦女連續2次及2次以上12周妊娠以內自然流產的情況，發生率約為1%，占所有妊娠丟失的15%～20%[1]。反復自然流產的發病原因較為復雜，包括染色體因素、解剖因素、內分泌因素、免疫因素、炎癥因素及病因不明因素，臨床上將這部分病因不明的RSA稱為原因不明反復自然流產（URSA）[2]。有研究表明，高凝狀態可能是RSA發病的原因之一[3]。經文獻檢索，國內外目前關于URSA與外周血凝血相關因子關系的報道較少。本課題擬對此進行探究，旨在探討URSA患者外周血凝血相關因子的水平情況，具體報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2016年3月～2017年2月本院收治的53例反復自然流產患者作為試驗組，選取健康早孕女性作為早孕組，另選取同期本院體檢科查體至少有一次活產史的非妊娠健康女性作為正常未孕組。試驗組53例，其中年齡21～39歲，平均年齡為（28.52±5.14）歲，孕周6～12周，自然流產次數≥2次；早孕組50例，其中年齡22～36歲，平均年齡為（27.28±4.72）歲，孕周＜12周；正常未孕組50例，其中年齡20～37歲，平均年齡為（28.16±5.21）歲，有2次或2次以上妊娠史（至少有1次正常妊娠史）。3組患者臨床基本資料對比差異無統計學意義，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 所選患者均于入院后禁食禁水12 h后，于次日凌晨在本院檢驗科抽取肘部淺靜脈血5 ml。將抽取的靜脈血置于無菌含3.8%枸櫞酸鈉抗凝管中，以3 000 r/min的離心速度離心10 min，取上清液，置-80℃冰箱冷凍保存，待測。

1.2.2 檢驗方法 通過酶聯免疫吸附法檢測患者外周血凝血相關因子水平，通過發色底物法檢測患者AT-Ⅲ水平。檢測儀器是由奧地利公司提供的型號為ANTHOSHT11的全自動酶標儀，試劑盒均由武漢默沙克生物科技有限公司提供，AT-Ⅲ發色底物法測定試劑盒由天津市美德太平洋科技有限公司提供，所有具體操作方法嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.3 觀察指標 觀察記錄3組受試者外周血凝血酶片段（Prothrombin fragment 1+2，F1+2）、凝血酶－抗凝血酶（Thrombin-antithrombin,TAT）、纖溶酶原激活物抑制劑－1（Plasminogen activator Inhibitor-1，PAI-1）及抗凝血酶（AntithrombinⅢ,AT-Ⅲ）的水平，同時比較3組受試者F1+2、TAT、PAI-1及AT-Ⅲ水平間的差異。

1.4 統計學方法 選用SPSS 21.0軟件對研究資料進行統計學分析。計量資料采用獨立樣本t檢驗進行統計推斷；計數資料采用χ2檢驗進行統計推斷。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

試驗組外周血F1+2、TAT、PAI-1水平均高于早孕組與正常未孕組，3組間比較差異有統計學意義（P＜0.05）；試驗組外周血AT-Ⅲ水平低于早孕組與正常未孕組，3組間比較差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

3 討論

反復自然流產是指孕齡婦女連續2次及2次以上12周妊娠以內自然流產的情況。大量研究資料表明，自然流產易反復發生于同一個體，RSA患者流產次數越多，復發率也會隨之升高[4]。隨著分子生物學研究的發展，血液高凝狀態與原因不明復發性自然流產的關系已引起了國內外大量學者的關注。有研究發現，部分URSA患者存在單純的高凝狀態，排除遺傳性及獲得性血栓傾向，沒有凝血因子及相關凝血酶和蛋白的缺乏或變異[5-6]。

表1 3組受試者外周血F1+2、TAT、PAI-1及AT-Ⅲ水平的比較情況（±s）

表1 3組受試者外周血F1+2、TAT、PAI-1及AT-Ⅲ水平的比較情況（±s）

注：與試驗組比較，aP＜0.05

組別試驗組早孕組正常未孕組F值P值AT-Ⅲ（ng/ml）255.74±51.61 315.43±41.53a 287.52±48.86a 20.280 0.000例數53 50 50 F1+2（mg/L）142.16±8.07 40.22±5.19a 38.71±4.93a 15.711 0.000 TAT（ng/ml）4.47±0.55 2.50±0.41a 2.41±0.36a 9.749 0.008 PAI-1（mg/L）9.74±0.84 5.83±0.41a 5.77±0.45a 32.570 0.000

高凝狀態是指由于人體內血中促聚集和促凝因子均增加，而凝血-纖溶系統平衡機制受損的臨床和病理狀態。RSA患者的高凝狀態可通過相關標志物進行檢測判斷，其中F1+2就是這種檢測標志物[7]。F1+2是一種由因子Xa復合物水解凝血原后所生成的凝血酶原片段，是凝血酶原激活特異性分子標志物[8]。本次研究結果顯示，試驗組外周血F1+2水平均高于早孕組與正常未孕組，從結果可以看出，外周血F1+2水平的升高會造成凝血酶的過度激活及凝血功能的過度增強，使URSA患者處于高凝狀態，增加流產的概率。

AT-Ⅲ是一種由血管內皮細胞、肝臟、巨噬細胞合成的重要抗凝物質，可以抑制活化的蛋白酶，包括FIXa、FXa和凝血酶。有研究表示，AT-Ⅲ的活性在妊娠期間沒有明顯變化，但AT-Ⅲ缺乏妊娠婦女出現早中期流產的風險是正常妊娠婦女的2倍，發生死產的風險增加了5倍左右[9]。TAT是凝血酶形成后與AT-Ⅲ以1:1比例結合形成的復合物，是反映凝血酶已形成的敏感指標。當機體內TAT水平出現增加時，此時機體凝血系統處于被激活狀態[10]。本次研究結果顯示，試驗組外周血TAT水平高于早孕組與正常未孕組，外周血AT-Ⅲ水平低于早孕組與正常未孕組。從本次研究結果可以看出，當URSA孕婦處于高凝狀態時，凝血酶水平會隨之增高，而外周血AT-Ⅲ會被大量消耗生成TAT，增加TAT水平。

PAI-1是一種多功能絲氨酸蛋白抑制物，是纖溶酶激活物主要的生理抑制因子。正常情況下，妊娠期母-胎界面血管網絡的雙向物質交換的血流灌注依賴于凝血與纖溶間的平衡，滋養細胞通過表達和產生一些重要物質來維持這種平衡，PAI-1就位于滋養細胞中。當這種平衡被打破，則可導致胎盤床血流不暢，發生血栓栓塞，出現胎兒供血、供氧不足，從而引發流產。本次研究結果顯示，試驗組外周血PAI-1水平均高于早孕組與正常未孕組，提示當URSA患者體內凝血與纖溶間的平衡被打破后，胎盤床局部的PAI-1水平會呈現增高狀態，直接導致胎盤組織發生血栓。

綜上所述，不明原因RSA患者外周血F1+2、TAT、PAI-1、AT-Ⅲ水平處于異常狀態，說明URSA患者血液處于一種高凝狀態，妊娠后胎盤床微血管易發生血栓，導致流產。