肝素鋰對電化學發光法測定甲狀腺激素影響的研究

黃 俊，聶 鑫，羅開宏，李貴星

(四川大學華西醫院實驗醫學科，四川 成都 610041)

近年來，我國甲狀腺疾病發病率逐年增高[1]。甲狀腺相關實驗室項目檢查對甲狀腺疾病的診斷和和療效評估非常重要，檢查方法由最初的放免法、酶聯免疫法更換為準確度和靈敏度更高的電化學發光法。為縮短實驗室檢測時間，實驗室采用抗凝血來快速分離血漿，有研究顯示：肝素鈉會導致游離甲狀腺素(FT4)和促甲狀腺激素(TSH)測定結果較血清檢測結果偏高[2]，肝素鋰以及 EDTA-K2對甲狀腺素(T4)及TSH的測定有影響[3，4]。甲狀腺自身抗體是指由于自身免疫紊亂產生的針對甲狀腺某些成分的免疫球蛋白，主要包括促甲狀腺激素受體抗體(TRAb)、抗甲狀腺球蛋白抗體(A-TG)和抗過氧化物酶抗體(A-TPO)，對 Graves 病和橋本氏甲狀腺炎等甲狀腺疾病的鑒別診斷與療效評估非常重要。目前尚未有研究探討抗凝劑對甲狀腺自身抗體的檢測影響。作者采用羅氏Cobas e601 型電化學發光免疫分析儀及配套試劑，比較分析肝素鋰抗凝血漿和無添加劑血清樣本甲狀腺全套功能指標的差異，探究肝素鋰抗凝血漿對甲狀腺指標的影響，指導臨床采血管的正確使用。

1 資料與方法

1.1一般資料選擇 2017 年 8-9 月在華西醫院就診的疑似甲狀腺疾病的門診患者 60 例，其中男 23 例，女 37 例；年齡 10～73 歲，中位年齡 43 歲。同時采用肝素鋰抗凝的綠頭管和無添加劑的紅頭管各采血 3 ml，所得血液樣本均在室溫放置 30 分鐘待紅頭管血清析出后采用 3500 轉/分離心 5 分鐘分別收集綠頭管血漿或紅頭管血清。

1.2儀器及試劑及檢測方法FT3、FT4、T3、T4、TSH、A-TG、A-TPO、TRAb和甲狀腺球蛋白(TG)濃度檢測均采用羅氏 Cobas e601 電化學發光免疫分析儀及配套試劑和校準品進行。所有檢測均嚴格按照儀器操作和試劑說明書等相關 SOP 文件進行，本實驗室通過美國病理學家協會(CAP)認可，保證結果準確可靠。

1.3統計學方法采用 SPSS 20.0 統計軟件進行數據分析。所有指標采用中位數(四分位數間距)表示。兩種標本處理方式之間的數據比較采用秩和檢驗，P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1綠頭管血漿與紅頭管血清中甲狀腺激素檢測水平比較綠頭管血漿與紅頭管血清中FT3、FT4、T3、T4和TSH檢測結果如表 1 所示，兩組各指標檢測差異無統計學意義(P> 0.05)。

表1 綠頭管血漿與紅頭管血清中甲狀腺激素檢測水平

2.2綠頭管血漿與紅頭管血清中TG水平比較綠頭管血漿和紅頭管血清中TG檢測水平分別為 8.24 μg/L[(1.61～18.52)μg/L]和 7.74 μg/L[(1.02～18.31)μg/L]，兩者差異無統計學意義(Z=-0.079，P= 0.937)。見圖 1。

圖1 綠頭管血漿與紅頭管血清中甲狀腺球蛋白檢測水平

2.3綠頭管血漿與紅頭管血清中甲狀腺自身抗體水平比較綠頭管血漿和紅頭管血清中A-TPO檢測水平分別為 14.58 IU/ml[(10.85～98.11)IV/ml]和 11.44 IU/ml[(8.01～86.82)IU/ml]，兩者差異無統計學意義(Z=-1.474，P= 0.141)(見圖 2)。綠頭管血清中A-TG和TRAb檢測水平為 35.00 IU/ml[(22.37～284.70)IU/ml]和 3.55 IU/ml[(3.30～4.08)IU/ml]，明顯高于紅頭管血清中 15.3 IU/ml[(10.00～238.22)IU/ml]和 0.68 IU/ml[(0.41～1.00)IU/ml]，兩者差異有統計學意義(Z=-3.072 和-7.147，P= 0.002和 0.000)(見圖 3)。

3 討論

近年來，甲狀腺相關疾病的發病率逐年增高，甲狀腺激素及相關項目檢查對甲狀腺疾病的診斷、鑒別診斷及療效評估非常重要。在臨床工作中，為縮短標本處理時間及臨床實驗室標本檢驗結果回報時間(Turn Around Time，TAT)，臨床常采用抗凝血來快速分離血漿。為提高檢測的準確性，明確抗凝血是否會對檢測結果產生影響尤為重要。不同的文獻報道不一，并且缺乏抗凝血對甲狀腺自身抗體檢測影響的相關研究。

圖2 綠頭管血漿與紅頭管血清中抗過氧化物酶抗體檢測水平

圖3 綠頭管血漿與紅頭管血清中抗甲狀腺球蛋白抗體和促甲狀腺激素受體抗體檢測水平

本研究的結果顯示：采用肝素鋰抗凝血漿標本和無添加血清標本檢測 FT3、FT4、T3、T4、TSH、TG 和 A-TPO 時，結果差異無統計學意義。說明當患者檢測FT3、FT4、T3、T4、TSH、TG 和 A-TPO 時，可采用肝素鋰抗凝血體進行分析。

TRAb 是針對促甲狀腺素受體(TSHR)的自身抗體，與 Graves 病(GD)和自身免疫性甲狀腺功能減退癥的發病密切相關。目前，TRAb 的檢測主要應用于 GD 的診斷以及治療方案的選擇，連續監測TRAb 還可以反映抗甲狀腺藥物的療效以及預測復發，因此，TRAb 檢測結果可影響臨床醫生對患者的診斷、治療和預后判斷。A-TG 是自身免疫性甲狀腺疾病病人血清中的一種常見自身抗體，臨床上常應用于橋本氏甲狀腺炎等自身免疫性甲狀腺疾病的篩選診斷，也是A-TG陽性甲亢患者 I131治療后發生甲減的主要預測因子[5]，本研究結果顯示：采用肝素鋰抗凝血 TRAb和A-TG檢測結果明顯高于血清樣本，兩者差異有統計學意義(P< 0.05)。我們認為：當患者檢查甲功有 TRAb和A-TG項目時，不能采用肝素鋰抗凝血漿樣本代替血清樣本，應該使用無添加劑的紅頭管。

綜上所述，對于 FT3、FT4、T3、T4、TSH、TG 和 A-TPO，必要時可采用肝素鋰抗凝血漿樣本縮短標本處理時間以提高檢測時效性，測定 TRAb 以及 A-TG 時只能采用血清樣本以保證準確的檢測結果。然而，肝素鋰影響 TRAb 及 A-TG 檢測結果的機制尚不清楚，還需進一步研究。