老年冠心病患者內皮祖細胞CD34+水平與冠狀動脈病變程度相關分析

李 明，賴金川，鄭 偉，譚 剛，楊秀云，趙小渝，程 標

(1.四川省醫學科學院·四川省人民醫院東院心內科，四川 成都 610101；2.四川省醫學科學院·四川省人民醫院老年心血管內科，四川 成都 610072)

冠心病是嚴重危害生命健康的疾病之一，其冠脈病變程度影響著患者預后。對于老年冠心病患者，往往動脈粥樣硬化程度重，累及多支冠脈血管，且冠脈狹窄程度也相對較重，預后也較差。內皮祖細胞(endothelial progenitor cells，EPCs)是一種能分化為血管內皮細胞的前體細胞，有研究發現[1，2]血液中的EPCs具有參與內皮組織修復和血管新生的能力，并且有助于損傷血管的再內皮化進程。本研究以CD34+作為EPCs表面標志，來探討老年冠心病患者冠脈病變程度與CD34+水平相關性及其臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料選擇2015年4～11月在四川省人民醫院心內科就診并行冠脈造影的老年患者127例，年齡61～72歲[(66.4±3.3)歲]。依據冠脈造影結果，分為冠心病組91例和正常對照組36例。冠心病診斷標準為：冠脈造影至少一支冠狀動脈或其主要分支狹窄程度≥50%。其中冠心病組男57例，女34例，年齡(66.39±3.71)歲；正常對照組男19例，女17例，年齡(65.58±2.95)歲。排除標準：嚴重肝腎疾病、器質性心臟病、感染性疾病、嚴重外周血管疾病、結締組織疾病、腫瘤、貧血以及2周內服用激素藥物者。

1.2方法

1.2.1冠狀動脈病變不同類型及結合 SYNTAX 積分、Gensini積分分組：①根據冠狀動脈造影結果按ACC/AHA冠狀動脈病變形態劃分標準分為A、B、C三種病變類型[3]。②采用SYNTAX 積分系統將冠狀動脈病變劃分為三組，總分83分，0～22分為低危組，23～33分為中危組，≥33分為高危組[4]。③根據冠狀動脈造影結果計算冠狀動脈病變Gensini積分：每支血管狹窄≤25%為1分，25%～49%為2分，50%～74%為4分，75%～89%為8分，90%～99%為16分，100%為32分。不同節段冠狀動脈評分系數：前降支第1、2對角支、右冠近、中、遠段及后降支、左室后支各記1.0分，前降支近段記2.5分，中段記1.5分，遠段記1.0分，左主干記5.0分，回旋支開口記3.5分，回旋支近段記2.5分。將各段系數乘以與之相對應的狹窄程度記分，再將各狹窄段總積分相加，最終得到冠狀動脈Gensini總積分，Gensini積分越高，冠狀動脈病變越重[5]。

1.2.2觀察指標 所有患者清晨空腹檢測總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、血尿酸(UA)等生化指標，采用貝克曼公司生產S600型全自動生化分析儀進行檢測。

1.2.3CD34+檢測 冠狀動脈造影時取外周血約2 ml在4 h內送我院中心實驗室，由不知曉造影結果的同一名技師負責CD34+標本檢測。流式細胞儀(CYTOMICS FC500)由BECTON DICKINSON公司生產。①吸取CD34單克隆抗體5 μl加入加樣管底部。②吸取EDTA抗凝管中全血25 μl加入加樣管底部與CD34單抗混勻。③加樣管放入“電熱恒溫培養箱”25 ℃下孵育20分鐘。④吸取溶血劑A液300 μl/B液133 μl加入加樣管中與全血混勻，以溶解全血中的紅細胞，常溫下放置5分鐘后上流式細胞儀檢測。⑤流式細胞儀自動計數、分析10000個細胞，之后自動計算出CD34+所占百分率。

1.3統計學方法采用SPSS 16.0統計軟件進行分析。計量資料以均數±標準差表示，兩組間比較先進行正態分布檢驗，若服從正態分布采用t檢驗，若不服從正態分布采用非參數檢驗；多組間比較采用單因素方差分析；計數資料采用χ2檢驗；相關性分析采用Pearson相關分析。以P< 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1冠心病組和對照組臨床資料及CD34+水平比較冠心病組和對照組在性別、年齡、吸煙史、高血壓史、TC、TG、HDL-C、UA之間比較差異無統計學意義(P> 0.05)；冠心病組血清LDL-C水平高于對照組(P< 0.05)，CD34+百分率低于對照組，差異有統計學意義(P< 0.05)，見表1。

表1 冠心病組與對照組臨床資料及CD34+水平比較

2.2不同冠狀動脈病變分型組間CD34+比較CD34+百分率在C型病變組低于A型病變組，兩組間比較差異有統計學意義(P< 0.05)；C型病變組和B型病變組、A型病變組和B型病變組之間比較差異無統計學意義(P> 0.05)，見表2。

2.3不同SYNTAX積分組間CD34+比較在SYNTAX積分中，高危組CD34+百分率低于低危組，差異有統計學意義(P< 0.05)；而中危組與低危組、高危組與中危組之間比較差異無統計學意義(P> 0.05)，見表2。

2.4不同冠狀動脈Gensini積分組間CD34+比較在Gensini積分分組中，高分組CD34+百分率低于低分組，差異有統計學意義(P< 0.05)；而中分組與低分組、高分組與中分組比較差異無統計學意義(P> 0.05)，見表2。

表2 CD34+在A、B、C型冠脈病變分型、SYNTAX積分及Gensini積分各組間比較

2.5冠心病患者Gensini積分與CD34+相關性分析冠心病患者血清CD34+百分率與冠脈Gensini積分呈負相關(r=-0.378，P< 0.01)。

3 討論

冠狀動脈粥樣硬化目前認為是冠心病發生、發展的重要因素，而內皮功能障礙則是動脈粥樣硬化的起始和關鍵環節[6～8]。外周血CD34+細胞作為EPCs的表面標志是一群具有游走特性，并且能增殖、分化的幼稚內皮細胞，可歸巢于血管損傷或血管新生部位，并在該區域增殖、分化為內皮細胞，當血管內皮損傷后各種趨化因素促使外周血CD34+細胞動員、遷移到受損血管部位，參與血管內皮損傷后的修復、再生及血管新生[6，9，10]。文獻報道在冠心病患者中EPCs數量、功能皆明顯下降[11，12]，也有研究報道隨著年齡增加動脈粥樣硬化程度加重，EPCs數量、功能也進一步降低[13]。本研究發現在老年冠心病患者中CD34+百分率較正常對照組明顯降低，考慮與年齡增加EPCs生成減少及冠心病多種危險因素持續損傷血管內皮并削弱EPCs功能從而導致外周血EPCs數量進一步減少，而EPCs數量減少及功能障礙則影響了血管內皮修復及血管新生，從而加重了冠狀動脈病變。本研究同時結合ACC/AHA冠狀動脈病變A、B、C形態分型、SYNTAX評分、Gensini 積分來比較分析各組冠心病患者CD34+水平，發現隨著冠狀動脈病變狹窄程度加重、累及冠狀動脈支數增多，CD34+水平下降更為顯著，并且通過相關分析發現CD34+百分率水平與Gensini 積分呈負相關。由此提示EPCs數量減少以及功能降低與冠心病的發病以及冠狀動脈病變狹窄嚴重程度、累及冠狀動脈支數具有一定相關性，而檢測外周血CD34+百分率水平在一定程度上可作為預判斷冠狀動脈病變程度的一種新的檢測指標。

綜上所述，在老年冠心病患者冠狀動脈病變嚴重程度評估中，檢測外周血CD34+百分率水平可在一定程度上反映冠狀動脈病變狹窄嚴重程度。但由于本研究入選樣本例數較少，需要更大樣本量加以證實。