30年冷凍湖羊“復(fù)蘇”記—“湖羊冷凍精液和冷凍胚胎保存效果驗(yàn)證試驗(yàn)”項(xiàng)目通過(guò)驗(yàn)收

文│本刊記者 劉源

2018年，全國(guó)畜牧總站在浙江省湖州市、杭州市等地組織實(shí)施了“國(guó)家家畜基因庫(kù)湖羊冷凍精液和冷凍胚胎保存效果驗(yàn)證試驗(yàn)”項(xiàng)目，本項(xiàng)目由國(guó)家家畜基因庫(kù)和浙江省畜牧技術(shù)推廣總站共同承擔(dān)，杭州華麗牧業(yè)有限公司和長(zhǎng)興永盛牧業(yè)有限公司兩個(gè)湖羊種羊場(chǎng)參與實(shí)施。為科學(xué)客觀評(píng)估試驗(yàn)效果，進(jìn)一步做好家畜地方品種保種工作，10月22～24日，全國(guó)畜牧總站組織由浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院、揚(yáng)州大學(xué)、內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院、內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧場(chǎng)科學(xué)技術(shù)推廣站、浙江省湖州市畜牧獸醫(yī)局組成的專家組一行五人，前往湖州、杭州兩地，對(duì)項(xiàng)目進(jìn)行驗(yàn)收。農(nóng)業(yè)農(nóng)村部種業(yè)管理司畜禽種業(yè)處周曉鵬、全國(guó)畜牧總站畜禽資源處處長(zhǎng)劉長(zhǎng)春、全國(guó)畜牧總站畜禽遺傳資源保存利用中心（國(guó)家家畜基因庫(kù)）常務(wù)副主任孫飛舟、浙江省畜牧技術(shù)推廣總站副站長(zhǎng)任麗等參加了項(xiàng)目驗(yàn)收鑒定。

認(rèn)真謀劃，推動(dòng)首例活體驗(yàn)證試驗(yàn)順利實(shí)施

孫飛舟向?qū)＜医M介紹，2017年年底，全國(guó)畜牧總站就開(kāi)始謀劃在2018年對(duì)國(guó)家家畜基因庫(kù)長(zhǎng)期保存的湖羊冷凍胚胎、冷凍精液開(kāi)展復(fù)蘇試驗(yàn)，檢查保存效果。湖羊是我國(guó)特有的羔皮和多胎綿羊品種，也是首批列入《國(guó)家畜禽遺傳資源保護(hù)目錄》的珍貴地方畜禽品種之一。為加強(qiáng)湖羊品種資源保護(hù)工作，針對(duì)浙江省湖羊部分個(gè)體純度不夠等問(wèn)題，在2018年年初，浙江省畜牧獸醫(yī)局向農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧業(yè)司申請(qǐng)使用湖羊冷凍精液和冷凍胚胎。之后，全國(guó)畜牧總站兩次派專家考察試驗(yàn)點(diǎn)條件，2月初，經(jīng)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部批準(zhǔn)，國(guó)家家畜基因庫(kù)與浙江省畜牧技術(shù)推廣站合作，開(kāi)展湖羊冷凍胚胎保存效果驗(yàn)證試驗(yàn)。

試驗(yàn)使用了制作于1988年5只公羊的27劑顆粒凍精、1998年3只公羊的75劑細(xì)管凍精以及1998年4對(duì)公母羊組合的22枚胚胎。到2018年，這些冷凍精液和冷凍胚胎已經(jīng)保存長(zhǎng)達(dá)30年、20年，是我國(guó)最早一批保存在國(guó)家家畜基因庫(kù)的冷凍精液和冷凍胚胎之一。同時(shí)，這也是首次用國(guó)家家畜基因庫(kù)保存的冷凍精液和冷凍胚胎進(jìn)行活體驗(yàn)證試驗(yàn)，首次驗(yàn)證了1988年、1998年制作的冷凍精液和1998年制作的冷凍胚胎保存質(zhì)量。

為確保試驗(yàn)效果，國(guó)家家畜基因庫(kù)和浙江省畜牧技術(shù)推廣總站前期進(jìn)行了充分溝通，做了大量細(xì)致的準(zhǔn)備工作，精心設(shè)計(jì)試驗(yàn)方案，明確項(xiàng)目進(jìn)度和各單位職責(zé)分工。項(xiàng)目啟動(dòng)后，國(guó)家家畜基因庫(kù)立即對(duì)試驗(yàn)用冷凍精液按照不同個(gè)體、不同批次進(jìn)行活力、劑量、前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子數(shù)和畸形率4項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行了質(zhì)量檢測(cè)；3月15日，冷凍精液和冷凍胚胎一同運(yùn)抵杭州，浙江省畜牧技術(shù)推廣總站保存；4月11日開(kāi)始，國(guó)家家畜基因庫(kù)邀請(qǐng)國(guó)內(nèi)頂尖專家，采用內(nèi)窺鏡子宮角輸精手術(shù)操作方式，在兩個(gè)試驗(yàn)種羊場(chǎng)進(jìn)行了胚胎移植和凍精配種；8月29日至9月14日，凍精配種和胚胎移植羔羊陸續(xù)出生。

浙江省畜牧技術(shù)推廣總站副站長(zhǎng)任麗介紹，試驗(yàn)人工授精母羊共79只，其中麗華牧業(yè)配種46只，永盛牧業(yè)配種33只，配種成功48只母羊，共產(chǎn)羔羊94只，凍精配種受胎率達(dá)到61%；胚胎移植母羊共9只，移植胚胎22枚，懷孕6只，分娩9只，胚胎復(fù)蘇率41%。下一步，項(xiàng)目組還將制作凍精3000份、冷凍胚胎200枚，返還國(guó)家家畜基因庫(kù)；同時(shí)對(duì)試驗(yàn)羔羊生長(zhǎng)發(fā)育、繁殖性能、生產(chǎn)性能、市場(chǎng)需求等做好綜合評(píng)估。

利用現(xiàn)代保種技術(shù)，讓基因活起來(lái)

目前為止，國(guó)內(nèi)外還沒(méi)有對(duì)保存時(shí)間長(zhǎng)達(dá)20年的羊冷凍胚胎和30年的冷凍精液進(jìn)行復(fù)蘇效果驗(yàn)證的相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，試驗(yàn)也沒(méi)有現(xiàn)成的經(jīng)驗(yàn)?zāi)Ｊ娇梢詤⒖肌Ｒ虼耍斜匾獙?duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行認(rèn)真評(píng)估，指出成績(jī)，尋找不足，提出有針對(duì)性的改進(jìn)措施，為下一步保種工作提供指導(dǎo)和遵循。在聽(tīng)取了項(xiàng)目組匯報(bào)后，專家組認(rèn)真審閱了試驗(yàn)相關(guān)檔案資料和保存的試驗(yàn)材料，實(shí)地察看了胚胎移植和冷凍精液人工授精生產(chǎn)的湖羊羔羊。

經(jīng)過(guò)一整天緊張的評(píng)估與討論，專家組對(duì)試驗(yàn)成果給予了充分肯定。經(jīng)過(guò)超低溫長(zhǎng)期冷凍的精液和胚胎，受胎率和產(chǎn)羔率都高于預(yù)期，甲級(jí)羔皮羊比例達(dá)到34%。與對(duì)照組相比，冷凍精液和冷凍胚胎活羔的毛色更加潔白、波浪形花紋更加突出，再現(xiàn)了20、30年前湖羊的典型特征，就像20、30年前的湖羊“復(fù)蘇”在眼前，這也表明冷凍精液和冷凍胚胎保存對(duì)種群恢復(fù)保留原有遺傳資源特征，豐富原產(chǎn)地群體的血統(tǒng)，開(kāi)展異地保種具有十分重要的作用。專家們一致同意項(xiàng)目通過(guò)驗(yàn)收。對(duì)下一步工作，專家們建議，要加強(qiáng)對(duì)試驗(yàn)羊的飼養(yǎng)管理和跟蹤觀察，采用分子生物學(xué)手段研究評(píng)估湖羊保種效果，設(shè)立家畜冷凍精液和冷凍胚胎保種效果評(píng)價(jià)專項(xiàng)，讓基因活起來(lái)，進(jìn)一步做好遺傳資源保護(hù)利用工作。

專家們表示，此次試驗(yàn)成功代表著我國(guó)畜禽保種技術(shù)的重大突破。采用冷凍精液和冷凍胚胎技術(shù)保存相關(guān)家畜遺傳資源，對(duì)進(jìn)一步探索我國(guó)特有畜禽品種，特別是珍貴、稀有、瀕危畜禽品種的保種具有深遠(yuǎn)意義。

農(nóng)業(yè)農(nóng)村部種業(yè)管理司畜禽種業(yè)處周曉鵬指出，此次評(píng)估只是對(duì)試驗(yàn)的階段性評(píng)價(jià)，今后還有很多工作需要持續(xù)開(kāi)展下去。畜禽遺傳資源保護(hù)是一項(xiàng)投入大、持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)的基礎(chǔ)性工作，需要長(zhǎng)期堅(jiān)持，不間斷地進(jìn)行檢測(cè)評(píng)估，怎樣保護(hù)好、用好這些遺傳物質(zhì)是一大關(guān)鍵。

隨著現(xiàn)代畜牧業(yè)發(fā)展，散戶逐漸退出，生產(chǎn)效率不能滿足現(xiàn)在市場(chǎng)需要的品種逐漸被大量選育淘汰，畜禽遺傳資源保護(hù)利用的壓力也越來(lái)越大。全國(guó)畜牧總站畜禽資源處處長(zhǎng)劉長(zhǎng)春表示，這次試驗(yàn)另辟蹊徑，一方面驗(yàn)證了利用超低溫冷凍技術(shù)可以長(zhǎng)期保存種質(zhì)資源；另一方面也驗(yàn)證了國(guó)家家畜基因庫(kù)連續(xù)30年的保種工作沒(méi)有出現(xiàn)紕漏。同時(shí)，證明了當(dāng)初設(shè)立國(guó)家家畜基因庫(kù)的設(shè)想是正確的，超低溫冷凍技術(shù)在保種工作中可以發(fā)揮獨(dú)特的重要作用。

據(jù)了解，全國(guó)畜牧總站畜禽遺傳資源保存利用中心在2008年被農(nóng)業(yè)農(nóng)村部授予首批國(guó)家級(jí)家畜基因庫(kù)。主要從事全國(guó)畜禽遺傳資源冷凍精液、冷凍胚胎和體細(xì)胞等遺傳物質(zhì)的制作、收集和保存工作。國(guó)家家畜基因庫(kù)是目前亞洲最大的以現(xiàn)代生物技術(shù)為主要手段，進(jìn)行異地基因保種的基因庫(kù)，也是我國(guó)保存畜禽品種遺傳物質(zhì)數(shù)量最多、范圍最廣的基因庫(kù)。截至2018年6月，已保存牛、羊、豬、馬（驢）、犬等遺傳物質(zhì)，涉及品種共計(jì)104個(gè)。其中牛、羊、豬、驢的冷凍精液55萬(wàn)余劑；冷凍胚胎1.5萬(wàn)余枚；牦牛、綿山羊品種的成纖維細(xì)胞系5000余頭份；收集了60個(gè)豬品種、88個(gè)牛品種、74個(gè)綿羊、山羊品種和55個(gè)馬（驢）品種、共計(jì)2萬(wàn)余份DNA和血樣等。（更多資訊，請(qǐng)關(guān)注微信公眾號(hào)：中國(guó)畜牧業(yè)）