高效液相色譜法在藥物分析實驗中的應用

龔逸奕

【摘要】2015年藥典和加10年藥典相比，越來越多的藥物的檢驗技術依賴于高效液相色譜法，這也在客觀上要求醫藥類職業學院要加強高效液相色譜法的講授。在藥物分析這門課程中，地西泮注射液含量測定，諾氟沙星膠囊含量測定，阿司匹林片劑中雜質含量測定這幾個實驗都要求用HPLC進行，這也是醫藥化工行業的標準操作規范。因此，筆者通過在教學中總結出幾條經驗，為以后實驗教學質量的改進提供一定的理論依據。

【關鍵詞】藥物分析 HPLC 含量測定 經驗總結

高效液相色譜（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）技術始于20世紀60年代末期，是以氣相色譜和經典液相色譜法為基礎的新型分析技術網。高效液相色譜具有分辨率高、速度快、分析精準等優點，從而使其在藥物分析研究中對于物質的分離和分析占據越來越重要的作用，成為目前醫藥行業研究中的一種重要分析手段，也是各大高等學校藥學等相關專業藥物分析課程中的一個重點內容。隨著科學技術的突飛猛進和國家經濟建設的快速發展，高效液相色譜作為一種重要的分離分析技術，需求和應用越來越廣泛[1]。國家對高等教育的投入日益增大，高校的辦學規模、教學質量和基礎設施建設都有了明顯的改善和提高[2-5]，同時對實驗設備的經費投入也逐年增加。我校根據醫藥行業的實際情況，大力支持發展HPLC的實驗教學，購人國產普源儀器八套及進口島津，安捷倫儀器各兩套，基本能夠滿足學生的日常教學要求。但是，在實際教學過程中，還是會遇到各種問題，以下是筆者的一些教學經驗。

一、培養學生預習復習習慣

高職學校的學生數理化成績普遍不高，因此，大多數學生對課堂內容掌握不

深，對于高效液相色譜的基本原理基本不懂，有些學生只是死記硬背所有的操作步驟，由于所有的記憶沒有建立在理解的基礎上，因此課程結束以后，便會忘記所有課程內容，對今后的學習和工作完全沒有幫助。針對于此，筆者要求學生課前預習溶劑組織器，高壓泵，自動進樣器，紫外檢測器的工作原理及操作藥典，并要求課代表實現把學生分成若干小組，分組檢查，上課時，我再對全體學生進行抽查，不合格的學生不得進行操作，本次實驗成績為零分。

二、要求學生進行樣品前處理操作

前處理工作往往相當耗費時間，因此在一些實驗安排中該部分工作都由教師提前完成了，導致很多分學過高效液相色譜實驗的同學都不能很好掌握。一般前處理包括試劑的純化、樣品溶解、樣品的過濾等步驟。這些前處理非常重要，一方面有利于儀器的保護，特別是直接關系樣品分析的有效性。因此，我們綜合考慮實驗學時，要求對樣品的過濾必須進行，讓學生熟悉該過程，并且在過濾過程中講授其它前處理方法和步驟。另外，通過前處理操作可以使學生掌握超聲儀，超濾裝置等儀器的使用，還能訓練學生進行容量瓶的使用，微孔濾膜的選擇，流動相及色譜柱的選擇，為將來的檢驗崗位工作提供一定的經驗。

三、分組教學，逐個輔導和考核

目前我校的實驗條件還無法做到一人一組的教學，一般將學生分為6組，每組四人進行教學工作，但是在實際教學工作中，難免出現有個別同學得不到操作機會，導致在實驗考核過程中什么都不會，為了避免此類情況的發生，筆者將本門課程所要進行的四節HPLC實驗課進行標記，每次的主操作人員必須不同，例如：在進行阿司匹林片劑中雜質含量測定時，主操作人員是學生A，在進行諾氟沙星膠囊含量測定時，主操作人員就是學生B，以此類推，這樣每個學生都會得到均等的練習機會。并且在分組教學的過程中，教師詳細講解第一個實驗操作，接下來的幾個實驗可以輔導學生單獨完成，這樣更培養學生獨立思考的能力和團結協作的精神。實驗考核可采用單獨考核的方式，每個學生必須單獨完成過關，包括理論考試，前處理操作考試和樣品檢驗考試，盡量做到使每一個學生熟悉每一個緩解。

四、學生申報相關大學生課題

對于求知欲比較強，有進一步學歷發展需求的學生，可以鼓勵其報課題，課題內容可與HPLC相關，這樣可以通過查閱資料及反復操作，進一步加深對HPLC的認識，并且將實際運用和科學研究聯系起來，全面加強學生的科研及實際操作水平。目前，學生正在進行《飲料中咖啡因含量測定》及《常見汽水中苯甲酸含量測定》兩項大學生課題，大量的學生參與到了其中，為學生的未來發展提供了中藥的助力。

五、結語

筆者通過和教研室相關教師的討論，共同提出了以上實驗教學改革方案，通過最后實驗考核結果，明顯發現學生操作能力的提升，通過對從事相關崗位的回訪，學生對以上教學改革也頗為滿意。我們在接下來的教學改革過程中堅持以研究問題為中心，開設綜合性、實用性實驗，提高大專生的實際操作和自主學習能力。結合高效液相色譜實驗，教會學生“提出問題分析問題解決問題”的系統學習方法，培養學生系統全面的分析解決問題的能力；培養相關專業學生的使用高效液相色譜儀的實踐動手操作能力，使學生在進入實習后可以獨立操作高效液相色譜儀。

參考文獻：

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