不同免疫檢驗方法用于檢測抗HIV結果的可靠性比較探究

郭仁明

（鐵法煤業集團總醫院檢驗科，遼寧 調兵山 112700）

艾滋病又被稱為獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS），是由于人體感染HIV病毒而引發的一種傳染性疾病[1]。T淋巴細胞是構成人體免疫系統最重要的因素，HIV病毒正是通過入侵機體T淋巴細胞，以破壞人體免疫系統，使人體抵抗力和免疫力降低，因而極易感染各種類型疾病，甚至會引發惡性腫瘤，因而具有較高的致死率，嚴重影響人們的身體健康及生活質量[2-3]。隨著艾滋病患者的不斷增多，我國對艾滋病的重視程度也越來越高，通過宣傳教育提升人們的疾病防范意識，并采取較多的治療和預防措施，使得艾滋病的發病情況逐漸得到改善。目前，臨床上對于AIDS病還缺乏特效的治療手段，因而臨床篩查和及早確診，預防通過性及血液制品等途徑的繼續傳播，是控制AIDS病進一步傳播的有效措施。臨床上對于HIV檢測的方法主要有三種，即雙抗原夾心ELISA法、金免疫層析試驗、和間接酶聯免疫吸附試驗，然而這三種方法檢測結果的可靠性還存在一定的爭議[4]。鑒于此，本研究以我院所收治的75例感染HIV患者作為研究對象，提取血清后分別給予上述三種方法予以檢測，對比檢測結果的可靠性。現將整個研究結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取我院在2014年8月至2017年6月所收治的75例HIV患者作為研究對象，所有患者均經嚴格的檢查，并確診感染HIV。其中男性42例，女性33例，患者年齡18～55歲，平均年齡為（31.4±2.5）歲。通過免疫印跡法檢查，發現75例患者中49例HIV抗體陽性，26例HIV抗體陰性。

1.2 方法

1.2.1 材料、儀器、試劑：抗HIV陽性質控血清，由北京康徹思坦生物技術有限公司提供，濃度4 NCU/mL；血液保存液Ⅱ、Ⅲ，由廣州費森尤斯卡比醫療用品有限公司提供；人類HIV抗原抗體診斷試劑盒，由法國Bio-Rad公司提供；340Rt酶標儀（奧地利）、DEM-Ⅲ型自動洗板機（北京拓普）、可調移液器、恒溫水箱；國產免疫金標試紙卡等。

1.2.2 檢測方法：①ELISA檢測：包括雙抗原夾心法與間接酶聯免疫吸附法兩種類型，在對抗HIV進行檢測時，應當嚴格依照試劑使用說明實施操作。②膠體金免疫層析試驗：首先將免疫金標試紙相應加樣區放置于患者血清樣本中，放置時間為10 s左右，然后觀察并記錄試紙的顏色變化，如果觀察到2條紅線，則表明檢測結果為陽性，如果僅觀察到l條紅線，則表明檢測結果為陰性，而對于陰性標本其觀察時間應控制在30 min以上。③免疫印跡法[5]：采集患者血液，并經PAGE分離出血清，然后將患者血清轉移至固相載體，其中固相載體通過非共價鍵形式進行蛋白質吸附，且不會影響蛋白質多肽類型及其生物活性。將固相載體中蛋白質及多肽作為抗原，將其與所對應的抗體進行免疫反應，然后與酶或是同位素標記的另一抗體進行反應，通過底物顯色及放射自顯影技術對電泳分離出的蛋白成分進行檢測。

1.3 評價指標：以免疫印跡法的檢測結果作為金標準，觀察并記錄三種檢測方法對于抗HIV檢測結果的敏感性、特異度、準確度，評價三種檢測方法的可靠性。

表1 三種檢測方法檢測結果比較

1.4 統計學方法：運用SPSS19.0統計分析軟件對此次所觀察的數據資料進行統計學分析，其中計數資料以百分比（%）表示，并施以χ2檢驗，若結果有P＜0.05，則表示組間比較差異明顯，具有統計學意義。

2 結 果

雙抗原夾心ELISA法檢測的敏感度為96.08%（49/51）、特異度為92.31%（24/26）、準確度為97.33%（73/75）；金免疫層析試驗法檢測的敏感度為96.0%（48/50）、特異度為96.15%（25/26）、準確度為97.33%（71/73）；酶聯免疫吸附試驗法檢測的敏感度為92.16%（47/51）、特異度為84.62%（22/26）、準確度為92.0%（69/75）。見表1。

3 討 論

艾滋病是由于人體感染HIV病毒而引發的一種嚴重的傳染性疾病。T淋巴細胞是人體免疫系統最重要的構成部分，HIV病毒可以通過入侵機體T淋巴細胞，使其溶解、凋亡，從而對人體的免疫系統造成嚴重的破壞，使人體抵抗力和免疫力降低，因而極易感染各種類型疾病，甚至會引發惡性腫瘤，因而具有較高的致死率，嚴重影響人們的身體健康及生活質量。AIDS病具有較強的傳染性，其傳播途徑主要包括垂直傳播、母嬰傳播、性傳播及血液傳播等，目前，臨床上對于AIDS還缺乏特效的治療方法，因而，加大臨床篩查力度和及早確診，預防通過性及血液制品等途徑的繼續傳播，是控制AIDS病進一步傳播的有效措施。

對艾滋病進行有效的預防和控制，其前提是要有一種有效的檢查方法，目前臨床上常用的HIV檢測方法包括雙抗原夾心ELISA法、金免疫層析試驗和間接酶聯免疫吸附試驗法，而予以確診的金標準為免疫印跡法[6]。臨床上對于上述三種檢測方法用于抗HIV檢測結果的可靠性方面還存在一定的爭議，本研究以我院所收治的75例HIV患者作為研究對象，對其分別予以上述三種方法進行檢測，結果表明，雙抗原夾心ELISA法檢測的敏感度、特異度及準確度分別為96.08%、92.31%、97.33%；金免疫層析試驗法檢測的敏感度、特異度及準確度分別為96.0%、96.15%、97.33%；酶聯免疫吸附試驗法檢測的敏感度、特異度及準確度分別為92.16%、84.62%、92.0%。三種方法在檢測抗HIV的敏感性、特異度、準確度均較高，而雙抗原夾心ELISA法具有更高的敏感性和特異度，且操作過程簡便，對設備及試劑的要求也較低，適宜實驗室中進行大規模的檢驗。

綜上所述，三種檢測方法中，雙抗原夾心ELISA法在HIV檢測中的靈敏度比另兩種方法均偏高，并具有較強的特異度和準確度，且其操作簡便，可靠性高，具有廣闊的臨床的應用價值。