食品中罌粟殼管理現(xiàn)狀及其檢測(cè)方法研究概況

程月紅，鮑連艷，于艷艷，王健，馮煒，李靜，任雪梅

(山東省食品藥品檢驗(yàn)研究院，濟(jì)南 250101)

罌粟殼是罌粟科植物罌粟的干燥成熟果殼，罌粟殼中含有嗎啡、可待因、罌粟堿、那可丁等生物堿類(lèi)物質(zhì)，在治療久咳、久瀉、脫肛等疾病時(shí)，起到了無(wú)可替代的作用，因而廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥行業(yè)。同時(shí)罌粟殼或其提取物，添加到火鍋底料或其他調(diào)味品中，會(huì)使其味道更加美好，口感更足，食用后容易上癮，但是長(zhǎng)期食用會(huì)出現(xiàn)發(fā)冷、出虛汗、乏力、面黃肌瘦、犯困等癥狀，并造成人注意力和記憶力功能衰退，嚴(yán)重時(shí)可能對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)造成損害，出現(xiàn)內(nèi)分泌失調(diào)，甚至導(dǎo)致呼吸停止而死亡，因此食品中禁止添加罌粟殼，但是一些不法商販為牟取最大利益，在食品中違規(guī)添加罌粟殼。為了有效控制罌粟殼在食品或調(diào)味品中的違規(guī)使用，相關(guān)監(jiān)管部門(mén)頒布了一系列的相關(guān)管理辦法，然而仍有食品中檢出罌粟殼的相關(guān)信息被報(bào)出。因此，加強(qiáng)罌粟殼的管理及其檢測(cè)方法研究關(guān)系到人民群眾的身體健康，本文對(duì)罌粟殼在食品中非法使用的相關(guān)規(guī)定及其檢測(cè)方法研究進(jìn)展做了全面的總結(jié)分析，為監(jiān)督管理工作提供了理論和技術(shù)支持。

1 罌粟殼的管理現(xiàn)狀

1.1 罌粟殼管理的相關(guān)規(guī)定

罌粟殼作為藥材原料在《中國(guó)藥典》中有記載，主要用于生產(chǎn)中成藥，特別是鎮(zhèn)咳類(lèi)的藥物，起到了積極的作用，但是非法添加到食品中，長(zhǎng)期食用會(huì)對(duì)人體造成嚴(yán)重的傷害。罌粟殼作為毒品，嚴(yán)重?cái)_亂了食品市場(chǎng)的安全，危害了人民的生命健康，引起了民眾的極大恐慌，損害了社會(huì)穩(wěn)定，為此我國(guó)相繼出臺(tái)了一系列管理措施。最初國(guó)務(wù)院就罌粟的種植問(wèn)題發(fā)布了“關(guān)于嚴(yán)禁私種罌粟和販賣(mài)、吸食鴉片等毒品的通知”，1998年制定了《罌粟殼管理暫行規(guī)定》，就食品及烹飪中非法添加罌粟殼的經(jīng)營(yíng)、研制等環(huán)節(jié)均做了具體規(guī)定。2008年發(fā)布了食品整治辦[2008]3號(hào)，規(guī)定火鍋中不得違法添加罌粟殼。2011年將“火鍋”中不得違法添加罌粟殼擴(kuò)大到“火鍋底料及小吃類(lèi)”。2015年《中華人民共和國(guó)食品安全法》明確指出，嚴(yán)禁“用非食品原料生產(chǎn)食品，在食品中添加食品添加劑以外的化學(xué)物質(zhì)和其他可能危害人體健康的物質(zhì)，或者用回收食品作為原料生產(chǎn)食品，或者經(jīng)營(yíng)上述食品”，罌粟殼不是食品添加劑更不是食品原料，而是危害人體健康的有毒物質(zhì)。2010年上海市食品藥品監(jiān)督管理局頒布了《火鍋食品中罌粟堿、嗎啡、那可丁、可待因和蒂巴因的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》的地方性標(biāo)準(zhǔn)，2018年4月16日，市場(chǎng)監(jiān)管總局發(fā)布《食品中嗎啡、可待因、罌粟堿、那可丁和蒂巴因的測(cè)定》為食品補(bǔ)充檢驗(yàn)方法的公告，該方法仍是液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法，至此食品中罌粟殼的檢驗(yàn)有了統(tǒng)一的檢驗(yàn)方法。

1.2 罌粟殼屢禁不止的原因分析

罌粟殼添加到食品中對(duì)人體健康危害很大，但為什么還是有檢出罌粟殼成分的信息被報(bào)出，食品中添加罌粟殼事件影響因素魚(yú)骨圖見(jiàn)圖1。

圖1 食品添加罌粟殼事件影響因素魚(yú)骨圖

由圖1可知，食品中罌粟殼屢禁不止的主要原因分為四個(gè)方面：政府監(jiān)管、法律法規(guī)、商家和外部因素[1]，政府監(jiān)管和法律法規(guī)具有強(qiáng)制性，相關(guān)的執(zhí)法部門(mén)可以從宏觀方面監(jiān)管，是加強(qiáng)管理的關(guān)鍵因素。商家和外部因素不能通過(guò)政府部門(mén)強(qiáng)制應(yīng)對(duì)，只能加強(qiáng)普及知識(shí)、說(shuō)服教育，使之真正認(rèn)識(shí)到罌粟殼對(duì)人體的危害。

1.3 罌粟殼管理現(xiàn)狀

目前，隨著經(jīng)濟(jì)的快速增長(zhǎng)和社會(huì)的發(fā)展，人們對(duì)食品口感的要求越來(lái)越高，一些不法商販一方面為了投其所好，另一方面為了牟取利益，違規(guī)在食品中添加罌粟殼。自2016年國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局發(fā)布“關(guān)于35家餐飲服務(wù)單位經(jīng)營(yíng)的食品中檢出罌粟殼成分的通告”以來(lái)，政府部門(mén)意識(shí)到此類(lèi)事件對(duì)社會(huì)造成了重大影響，及時(shí)組織抽查，加大抽查的范圍和頻次，全面摸底了解情況。全國(guó)各省市積極組織火鍋底料、蘸料和小吃類(lèi)等食品中罌粟殼成分的專(zhuān)項(xiàng)抽查，從2016年以來(lái)的監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)顯示，近3年對(duì)食品中非法添加物罌粟殼的抽查力度一直增加，抽查的品種和范圍逐漸擴(kuò)大，懲罰力度增強(qiáng)，宣傳教育進(jìn)一步加大，餐飲服務(wù)單位守法經(jīng)營(yíng)的自覺(jué)性和消費(fèi)者自我防范能力有所提高，群眾舉報(bào)獎(jiǎng)勵(lì)制度進(jìn)一步健全。

從檢測(cè)方法來(lái)看，多數(shù)采用快檢方法初篩，用色譜方法確證，但具體確證方法不統(tǒng)一，致使最終的檢測(cè)結(jié)果數(shù)據(jù)水平參差不齊，直到2018年4月，市場(chǎng)監(jiān)管總局發(fā)布《食品中嗎啡、可待因、罌粟堿、那可丁和蒂巴因的測(cè)定》食品補(bǔ)充檢驗(yàn)方法的公告，食品中罌粟殼的檢驗(yàn)有了統(tǒng)一的檢驗(yàn)方法，該方法采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法定量測(cè)定調(diào)味品中的嗎啡、可待因、罌粟堿、那可丁和蒂巴因。

市場(chǎng)監(jiān)管總局的成立，使得各執(zhí)法部門(mén)之間的權(quán)利和責(zé)任更加明確，對(duì)罌粟殼的管理更有效。信息公布機(jī)制進(jìn)一步完善，定期公布各類(lèi)食品監(jiān)督抽查結(jié)果，特別對(duì)不合格樣品的生產(chǎn)企業(yè)和被抽查企業(yè)同時(shí)公布，對(duì)企業(yè)形成強(qiáng)有效的震懾力，信息公布機(jī)制的完善對(duì)罌粟殼的管理起到了很大的積極作用。

看到取得成績(jī)的同時(shí)還應(yīng)認(rèn)識(shí)到管理的不足，目前我國(guó)法律法規(guī)不健全，對(duì)違法違規(guī)事件懲罰力度太輕，致使不法商販為了牟取最大利益不惜鋌而走險(xiǎn)。也有些商販?zhǔn)且驗(yàn)樽陨淼闹R(shí)水平不高，認(rèn)識(shí)不足，缺乏對(duì)罌粟殼的了解，沒(méi)有認(rèn)識(shí)到罌粟殼添加到食品中對(duì)人體健康造成的重大影響。另一方面，消費(fèi)者對(duì)罌粟殼的認(rèn)識(shí)不夠，對(duì)自己依法享有的權(quán)利認(rèn)識(shí)不清，當(dāng)自己的權(quán)利受到侵害時(shí)，本著多一事不如少一事的原則，不去維護(hù)自己的權(quán)利，致使不法商販的行為更加猖獗。

2 食品中罌粟殼的檢測(cè)方法研究

近幾年，食品中添加罌粟殼對(duì)人體的危害引起了大家的廣泛關(guān)注，對(duì)其檢測(cè)方法的研究越來(lái)越多，主要有快速檢測(cè)法、氣相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、薄層色譜法、比色法等。

2.1 快速檢測(cè)法

快速檢測(cè)方法主要包括化學(xué)法和免疫法[2]，其中免疫法因其快速、操作簡(jiǎn)單、靈敏度高和特異性強(qiáng)的特點(diǎn)，在檢驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)用較多。嗎啡快速檢測(cè)的作用原理是膠體金單克隆抗體與抗原免疫競(jìng)爭(zhēng)，來(lái)檢測(cè)嗎啡類(lèi)物質(zhì)，特異性強(qiáng)[3]。嗎啡免疫膠體金試紙板用于吸食毒品者尿液的初步篩查[4]，但因火鍋底料等調(diào)味品中蛋白質(zhì)、脂肪等雜質(zhì)含量較高，無(wú)法應(yīng)用到食品檢測(cè)，如果對(duì)食品中嗎啡做進(jìn)一步提取、濃縮，過(guò)程復(fù)雜化，就不具備快檢方法本身的優(yōu)點(diǎn)。鄭向梅等[5]用膠體金法做初篩，高效液相色譜法做確證，縮短了檢驗(yàn)周期，提高了效率。李錦清等[6]發(fā)明了“一種快速鑒別涼茶中非法添加罌粟殼的方法”的專(zhuān)利，該專(zhuān)利能夠簡(jiǎn)單快速地準(zhǔn)確定性定量涼茶中添加的罌粟殼成分，提高了檢測(cè)效率。盧浩等[7]發(fā)明了一種移動(dòng)終端，該移動(dòng)終端載有罌粟殼的檢測(cè)方法，使得隨處可以進(jìn)行罌粟殼的檢測(cè)，為執(zhí)法行政部門(mén)的管理工作提供了便利。

2.2 色譜法

近年來(lái)，隨著社會(huì)的快速發(fā)展和人們生活水平的逐步提高，食品的消費(fèi)方式逐漸由家庭轉(zhuǎn)向社會(huì)，使得食品安全事件的影響范圍更大，危害更加嚴(yán)重，于是相關(guān)部門(mén)的監(jiān)管以及為監(jiān)管提供技術(shù)支撐的檢測(cè)工作已經(jīng)上升到一個(gè)非常重要的地位，要求有高精端的大型檢測(cè)儀器提供更精準(zhǔn)的數(shù)據(jù)支持，在這種背景下，毫無(wú)疑問(wèn)色譜法起著無(wú)法替代的作用。

色譜分離的本質(zhì)是待測(cè)組分在固定相和流動(dòng)相之間分配平衡的過(guò)程，不同的物質(zhì)在兩相之間的作用力不同，隨著流動(dòng)相的運(yùn)動(dòng)，不同組分逐漸被分離。食品中罌粟殼的檢測(cè)研究較多的方法有氣相色譜法、氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法、液相色譜法、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法、薄層色譜法等。決定色譜法優(yōu)劣的因素主要是樣品預(yù)處理和儀器條件。

2.2.1 樣品預(yù)處理

罌粟殼中的生物堿，在堿性條件下溶于有機(jī)溶劑，在酸性條件下易溶于水，據(jù)此可以進(jìn)行樣品的提純和濃縮。

很多時(shí)候先把樣品溶液酸化超聲，使樣品中待測(cè)組分溶于酸性水溶液中，用正己烷、乙醚或石油醚等有機(jī)溶劑，除去油脂，然后調(diào)至堿性，使待測(cè)組分易于進(jìn)入有機(jī)相，用有機(jī)溶劑充分萃取待測(cè)組分，最后再經(jīng)過(guò)凈化濃縮，以備上機(jī)檢測(cè)[8-11]。這種方法能充分提取待測(cè)組分，避免了目標(biāo)物的丟失，但是處理過(guò)程相對(duì)繁瑣。林黛琴等[12]直接用5%的氨化甲醇提取待測(cè)組分，然后用甲醇飽和的正己烷除去油脂，過(guò)膜上機(jī)，此方法大大簡(jiǎn)化了樣品的前處理過(guò)程，節(jié)約了時(shí)間，提高了效率。

2.2.2 儀器條件

儀器條件設(shè)置的合理與否，很大程度上決定了食品檢測(cè)方法的優(yōu)劣，對(duì)檢測(cè)能起到事半功倍的效果。

2.2.2.1 氣相色譜法

范翔等開(kāi)發(fā)了雙柱定性罌粟堿的方法，有效解決了普通氣相色譜在鑒定罌粟殼檢測(cè)中靈敏度有限和定性能力弱的問(wèn)題，可應(yīng)用于基層實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展火鍋底料等食品在違法添加罌粟殼的初篩檢測(cè)。杜黎明等[13]用大口徑毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定罌粟殼中的生物堿，研究了各項(xiàng)儀器條件，提高了分析速度和分離度，而且靈敏度高、定量準(zhǔn)確可靠。

2.2.2.2 氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(GC-MS)是將氣相色譜(GC)與質(zhì)譜檢測(cè)器(MS)聯(lián)合使用，同時(shí)GC具有的高分離能力和MS對(duì)未知化合物的鑒定能力，彌補(bǔ)了GC定性、定量能力差的同時(shí)也解決了MS對(duì)待測(cè)組分要求純度高、組分單一的不足，相互促進(jìn)成為處理復(fù)雜化合物分析檢測(cè)問(wèn)題的有力手段[14]。

沈平等選擇峰較對(duì)稱(chēng)、半峰寬窄、峰形較好的TG-5MS色譜柱，對(duì)嗎啡選擇特征碎片離子285作為定量離子，162，215作為定性離子，在0.05～1.0 mg/L內(nèi)線性良好。張艷萍等通過(guò)對(duì)初始柱溫、進(jìn)樣口溫度、進(jìn)樣方式、離子源溫度等條件的考察，對(duì)全掃描和選擇離子掃描進(jìn)行對(duì)比分析，結(jié)果顯示，選擇離子掃描分離效果好，有效提高了檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確度。

2.2.2.3 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法，簡(jiǎn)稱(chēng)LC-MS，它具有強(qiáng)的組分鑒定能力，并能有效分離熱不穩(wěn)定性和高沸點(diǎn)化合物，是分離分析復(fù)雜有機(jī)混合物的有效手段。趙丹霞等[15]對(duì)液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定調(diào)料中罌粟殼生物堿含量做了不確定度評(píng)價(jià)，通過(guò)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制、樣品稱(chēng)量以及被測(cè)組分響應(yīng)值的不確定度評(píng)價(jià)，結(jié)果顯示，標(biāo)準(zhǔn)溶液配制所引入的不確定度最大，這說(shuō)明選購(gòu)純度較高的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制非常重要。林黛琴等采用Capcell PAK C18 TYPE MG Ⅱ色譜柱分離，電噴霧離子源，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)器(MRM)模式檢測(cè)，得到嗎啡和可待因的線性范圍為1.0～20.0 μg/L，蒂巴因、罌粟堿和那可丁的線性范圍為0.2～4.0 μg/L，相關(guān)系數(shù)均在0.999以上。食品中嗎啡、可待因、蒂巴因、罌粟堿和那可丁的定量限分別為7.5，7.5，1.5，1.5，1.5 μg/kg，回收率在72.2%～111.4%之間。 楊雯筌等選用phenomenex C18色譜柱，質(zhì)譜離子源為H-ESI源，正離子掃描模式，質(zhì)譜掃描模式為選擇離子反應(yīng)監(jiān)測(cè)SRM，在0.1～100 ng/L濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。劉艷琴等[16]采用液相色譜-串聯(lián)四級(jí)桿質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定方法，測(cè)定食品中罌粟堿殘留，以ZORBAX Aq-C18柱分離，電噴霧正離子MRM模式檢測(cè)，得到線性范圍為0.01～20.0 ng/mL，加標(biāo)回收率為93.9%～101.2%，方法定量限為0.1 μg/kg。祝偉霞等采用Accucore aQ 色譜柱分離，電噴霧模式下通過(guò)靜電場(chǎng)軌道阱全掃描得到5種生物堿的準(zhǔn)分子離子峰，同時(shí)設(shè)定閾值自動(dòng)觸發(fā)二級(jí)質(zhì)譜進(jìn)行定性確證，同位素內(nèi)標(biāo)法定量，實(shí)現(xiàn)了食品中罌粟殼主要特征成分的篩查。

2.2.2.4 薄層色譜法

罌粟殼提取液在薄層板上點(diǎn)樣后展開(kāi)，于紫外光燈下觀察藍(lán)綠色熒光或顯色后觀察色斑，以Rf定性，根據(jù)斑點(diǎn)大小和顏色深淺做概略定量，也可用薄層掃描儀定量。TLC法分離效果好，可同時(shí)測(cè)定多種生物堿，但檢測(cè)靈敏度相對(duì)較低。

利用薄層色譜法對(duì)罌粟殼成分進(jìn)行鑒定[17,18]，該方法專(zhuān)屬性較強(qiáng)，各色譜斑點(diǎn)清晰且分離度良好，陰性均無(wú)干擾。謝周濤等[19-21]用薄層色譜法對(duì)罌粟殼成分定性，用高效液相色譜法定量，一定范圍內(nèi)峰面積呈良好線性關(guān)系，回收率為98.9%～100.2%。

2.3 比色法

朱山寅等[22]在堿性條件下用氯仿提取，制成供試品溶液，同樣方法制取陰性對(duì)照液和陽(yáng)性對(duì)照液，然后經(jīng)過(guò)薄層層析，得出不同濃度的陰性、陽(yáng)性對(duì)照液和供試品溶液的顯示結(jié)果。根據(jù)薄層層析結(jié)果，選取相應(yīng)的供試品溶液、陰性、陽(yáng)性對(duì)照液，進(jìn)行紫外吸收光譜分析。

該方法操作過(guò)程繁瑣，且對(duì)照溶液較多，容易混淆，所用氯仿對(duì)環(huán)境和人體的危害大。張忠會(huì)等[23]同樣采用氯仿提取待測(cè)成分，然后與溴甲酚綠顯色，可見(jiàn)分光光度法測(cè)定罌粟殼中總生物堿的含量，其提取過(guò)程復(fù)雜和采用的氯仿都不可取。

3 結(jié)論

經(jīng)過(guò)監(jiān)管部門(mén)堅(jiān)持不懈的努力，管理措施的不斷改進(jìn)，食品行業(yè)中違規(guī)添加罌粟殼的態(tài)勢(shì)得到較大程度的改善，但違規(guī)添加的現(xiàn)象仍然存在，因而監(jiān)管部門(mén)需要進(jìn)一步加大懲治力度，從源頭上杜絕罌粟殼在食品中添加使用，普及相關(guān)知識(shí)，提高消費(fèi)者的維權(quán)意識(shí)。檢測(cè)食品中罌粟殼成分的諸多方法中，快速檢測(cè)方法能夠快速篩查，提高工作效率，但無(wú)法進(jìn)一步確證；薄層色譜法雖然能夠概略定量，但其靈敏度低；比色法過(guò)程復(fù)雜，檢測(cè)結(jié)果差；氣相色譜法、液相色譜法、氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法的相關(guān)研究較多，但與液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法相比，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法定性準(zhǔn)確，特異性強(qiáng)，靈敏度高，檢出限低，已經(jīng)被市場(chǎng)監(jiān)管總局指定為檢測(cè)食品中嗎啡、可待因、罌粟堿、那可丁和蒂巴因的補(bǔ)充檢驗(yàn)方法。