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單因素分析法優化紅景天中紅景天苷提取工藝的探究

2018-11-07 06:46:32劉桂艷
生物化工 2018年5期
關鍵詞:優化影響實驗

劉桂艷

(武漢華夏理工學院,湖北武漢 430223)

紅景天為多年生草本植物,主要生長在海拔1600~4000m的高寒、干燥、缺氧、強紫外線照射、晝夜溫差大的地區,具有極強的環境適應能力和生命力。紅景天苷是從紅景天中提取而來,在醫學中,紅景天苷具有增強免疫力、消除憂郁感、保護心血管、美白、抗輻射等功效,其與其他藥物相互作用還能夠提高T淋巴細胞轉化率和吞噬細胞活力、抑制腫瘤細胞的增長[1],因此具有一定的研究價值。

1 材料與方法

1.1 材料與設備

在市場中購買了紅景天,經過鑒定后,確定其為紅景天,將其作為實驗的主要材料。為制備溶劑準備乙醇(分析醇)、純凈水以及氫氧化鈉[2]。

在實驗中,我們選取的實驗設備為AB135-S天平;6002-8高速粉碎機;高效冷凍離心機以及高效液相色譜儀[5]。

1.2 實驗方法

1.2.1 紅景天苷含量測定

為了確保紅景天提取紅景天苷實驗的精確性,通過單因素實驗的方法對影響提取率的因素進行了排除實驗。然后通過公式計算,得到紅景天苷的提取率。

1.2.2 溶液制備

利用6002-8高速粉碎機將紅景天粉碎,磨成實驗可以用的粉末,利用AB135-S天平稱取5g的紅景天粉末,然后進行水浴回流提取,提取剩余殘渣使用乙醇進行清洗[4],然后使用甲醇溶液對其進行溶解,最后通過濾膜,將濾液進行過濾處理,制定出適宜的濾液,準備在實驗中使用。

1.2.3 響應面優化工藝

在提取過程中料液比、溫度、時間都會對實驗產生一定的影響,因此,采用了單因素變化實驗方法,實驗設計見表1。

表1 響應面因素

2 結果與分析

2.1 pH值對提取的影響

在實驗中,設置溫度為65℃、提取時間為60min,然后將pH值分別設置為6.5、7.0、8.0、8.5和9.0,結果如圖1所示。由圖1可看出,在溫度與提取時間相同時,當pH值為8.2時提取率達到了最高,由此可見,在紅景天苷的提取過程中,pH值最佳設定參數為8.2。

圖1 pH值對提取率的影響

2.2 提取時間的影響

在研究提取時間對提取率的影響時,將pH值固定為7.5,提取溫度固定為65℃,將提取時間分別設置為25min、40min、55min、70min和85min,經過實驗,我們對比了不同時間段的提取值,時間在40min左右時,提取率出現高峰,隨后我們從40min開始觀察,當時間處于45.11min時,提取率最佳,因此得出提取時間為45.11min時,能夠達到3.9%,由此得到了最佳的提取時間為45.11min。

2.3 料液比的影響

對料液比的比值對提取率影響進行了研究,與上述方法相同,將pH值設定為7.5,將提取時間設定為45min,然后將料液比分別設置為1∶39、1∶33、1∶29、1∶22、1∶19,實驗結果表明,1∶39時提取率為3.1%;1∶33時提取率為3.7%;1∶29時提取率能夠達到4.4%;1∶22時提取率為4.0%;1∶19時提取率為3.9%。在料液比為1∶29時,提取率能夠達到4.4%,由此可見,料液比的最佳比值為1∶ 29。

3 結論

通過實驗與對比,最終得到了單因素分析法優化紅景天中紅景天苷提取工藝最佳參數,其中乙醇的濃度為61%,料液比的比值為1:32:90。最佳的提取時間為45.11min,最佳提取溫度為63℃,其最佳pH值為8.2。由此可見單因素分析法優化紅景天中紅景天苷提取方法具有較高的穩定性,提取的過程十分科學,適合在紅景天苷提取過程中使用。通過上述的最佳參數對紅景天中的紅景天苷進行提取,其提取率能夠達到5.72%,由實驗前根據相關實驗進行推測的理論提取率值相比較,兩者能夠吻合,因此響應面法在紅景天苷的提取中確實可行。該提取方法不僅能夠對紅景天苷的提取提供最佳方法,與此同時也為未來的相關實驗研究提供的實踐依據。

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