白金芳
(北票市馬友營農業技術推廣站,遼寧 北票 122107)
在我國農藥中,70%為有機磷農藥,而在生產使用的有機磷農藥中,70%為劇毒、高毒類,而且較多是禁止在蔬菜作物上使用的。
農產品不按規定的用藥量、次數、方法或安全間隔期施藥,或施用不允許在蔬菜上使用劇毒、高毒類農藥;現在標準施行的農藥殘留測定需要通過有機溶劑提取、凈化和用大型分析儀器進行,無法對廉價的蔬菜進行隨時隨地或快速檢測而形成的監管不到位。
農藥殘留是指在農業生產中施用農藥后,一部分農藥直接或間接殘存于谷物、蔬菜、果品、畜產品、水產品以及土壤和水體中的現象。因此制定出有機磷和氨基甲酸酯類農藥的快速檢測方法,加強對農藥殘留的快速檢測已成為十分必要的監管措施。
有機磷或氨基甲酸酯類農藥能抑制昆蟲中樞和周圍神經系統中乙酰膽堿酯酶的活性,造成神經傳導介質乙酰膽堿的積累,影響正常傳導,使昆蟲中毒致死。根據這一昆蟲毒理學原理,用在對農藥殘留的檢測中。通過測定該酶的活性被抑制的程度即可知樣品中含有農藥的殘留情況。目前,農殘速測標準有國家標準和農業行業標準。由于本檢測單位采用的是農業行業標準,因此我們使用的速測藥品是丁酰膽堿酯酶試劑。丁酰膽堿酯酶的抑制率范圍在<70%為不超標,≥70%為殘留量可能超標。
取樣科學規范,并具有代表性。所采樣品符合農藥安全間隔期的要求,并且是待上市樣品。根據要求所檢測的蔬菜共有六大類:甘藍類、白菜類、茄果類、豆類、瓜類和綠葉菜類(除韭菜)。
緩沖劑:用1000mL純凈水溶解,常溫下保存并使用。
丁酰膽堿酯酶:根據酶活性情況用10ml緩沖液溶解。
底物:用10mL緩沖液溶解。
顯色劑:用10mL緩沖液溶解。
波長為410nm±3nm專用農藥殘留速測儀。
用不銹鋼管取樣器取來自不同植株葉片 (至少8至10片葉子)的樣本;果菜從表皮至果肉 1~1.5cm處取樣;芹菜、香菜、蘑菇及番茄液汁中含有對酶有影響的植物次生物質,容易產生假陽性。處理這類樣品時,可采取整株(體)浸提,避免次生物物質干擾。
空白對照液:取緩沖液3ml,酶50ul,加入專用反應瓶中,再加入顯色劑50ul,于37~38℃恒溫培養箱中放置30min后再加入50ul底物,倒入比色皿中,搖勻后即用農殘速測儀器進行檢測。空白液吸光值控制在 0.4~0.8之間。【備注】當空白值<0.4時,在保證酶的活性情況下適當加大酶試劑的使用量;當空白值>0.8時,表明試劑可能被污染,建議更換酶試劑。
待測樣品液:取2g切碎的樣本(非葉菜類取4g),放入提取瓶內,加入20ml緩沖液,手動震蕩1~2min,倒出提取液,靜止3~5min;在小試管內分別加入50ul丁酰膽堿酯酶,3ml樣本提取液,50ul顯色劑,于37~38℃恒溫培養箱中放置30min后再加入50ul底物,倒入比色皿中,震蕩后即用農殘速測儀器進行測定。

其中:△Ac-對照組3min后與3min前吸光值之差;
△As-樣本3min后與3min前吸光值之差。
當抑制率<70%時,蔬菜中不含有某種有機磷或氨基甲酸酯類農藥殘毒。當抑制率≥70%時,蔬菜中可能含有某種有機磷或氨基甲酸酯類農藥殘毒,此時該樣本要有2次以上的重復檢測,經多次重復檢測,<70%的重現性應在 80%以上,則判定合格。如多次檢測其結果≥70%,則建議使用氣相色譜等儀器分析法作進一步定量的確認。
加入底物后,應迅速混勻,立即測試;所有的檢測液對皮膚均具有不同程度的傷害,使用時請做好防護,不慎沾到皮膚應立即擦干并用大量清水沖洗;檢測試劑請務必在2~4℃冷藏柜中保存。