EDTA抗凝對(duì)凝聚胺交叉配血結(jié)果的影響分析

黎海江，馮學(xué)冠，符曉玲，楊藝偉，黃 植

交叉配血是輸血前必須檢查的項(xiàng)目之一，其結(jié)果的準(zhǔn)確性直接影響著輸血治療的安全。近年來，凝聚胺試驗(yàn)廣泛應(yīng)用于交叉配血中，并且與其他交叉配血方法如卡式法、微柱凝膠法等比較，具有靈敏度和特異性高、配血符合率高的優(yōu)點(diǎn)[1-2]。但是在交叉配血時(shí)，由于補(bǔ)體的激活，可能導(dǎo)致溶血或凝集不全的現(xiàn)象發(fā)生，干擾試驗(yàn)結(jié)果。EDTA抗凝劑可與鈣離子及鎂離子螯合，從而抑制補(bǔ)體的激活，可減少溶血的發(fā)生，使得交叉配血的成功率和準(zhǔn)確性增高[3]。目前有關(guān)EDTA抗凝血樣對(duì)凝聚胺交叉配血結(jié)果影響的相關(guān)報(bào)道較少，本研究比較了采用EDTA抗凝與無抗凝劑血樣的凝聚胺交叉配血結(jié)果，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 血樣采集 選擇醫(yī)院2017年1～12月進(jìn)行輸血治療的患者120例，輸血治療前每例抽取靜脈血液標(biāo)本2管，各2 ml。1管采用EDTA抗凝真空采血管（江西洪達(dá)醫(yī)療器械集團(tuán)有限公司，規(guī)格2 ml），1管為不加任何抗凝劑的真空采血管（生產(chǎn)廠家及規(guī)格同上），4℃保存，6 h內(nèi)完成測(cè)定。排除肝硬化、血液系統(tǒng)疾病、惡性腫瘤患者。其中血型鑒定為A型、AB型、B型、O型各30例；男性62例，女性58例；年齡 18～72（43.2±23.6）歲。 本研究已通過醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)，所有患者在納入研究前均簽署知情同意書。

1.2 主要試劑 凝聚胺試劑盒購自上海博普生物技術(shù)有限公司，內(nèi)含低離子強(qiáng)度溶液（LIM）、凝聚胺溶液、重懸液、陽性對(duì)照及陰性對(duì)照。抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)血清購自北京中聯(lián)安華科技公司。

1.3 配血實(shí)驗(yàn) 對(duì)每管樣本與同血型及不同血型供血樣本進(jìn)行凝聚胺交叉配血，具體操作步驟按照試劑盒說明書進(jìn)行。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：樣本混合后1 min內(nèi)不能被懸浮液散開為凝集；無紅細(xì)胞凝集或1 min內(nèi)能被懸浮液散開，顯微鏡下觀察證實(shí)紅細(xì)胞無凝集為不凝集；凡出現(xiàn)肉眼可見的溶血判定為溶血。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，每例2管血樣結(jié)果以配對(duì)資料形式表示，進(jìn)行配對(duì)資料χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 同血型交叉配血結(jié)果及溶血發(fā)生率 同血型交叉配血結(jié)果顯示，每例2管血樣主側(cè)與次側(cè)均無凝集；EDTA抗凝血樣主側(cè)與次側(cè)均無溶血發(fā)生，而無EDTA血樣中有6例主側(cè)與次側(cè)均發(fā)生溶血，二者溶血率有顯著差異（P＜0.05，表1）。

表1 同血型交叉配血結(jié)果比較［n（%）］

2.2 不同血型交叉配血結(jié)果及溶血發(fā)生率 分別將每管血樣與其他3種不同血型進(jìn)行交叉配血，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，無論有無EDTA抗凝，血樣主側(cè)或次側(cè)均出現(xiàn)凝集；EDTA抗凝血樣主側(cè)或次側(cè)均無溶血發(fā)生，而無抗凝血樣中有14例次主側(cè)或次側(cè)均發(fā)生溶血，二者溶血率也有顯著差異（P＜0.05，表2）。

表2 不同血型交叉配血結(jié)果比較［n（%）］

3 討論

凝聚胺同血型交叉配血相合表現(xiàn)為無凝集無溶血，只有在這種情況下，輸血是最安全可靠的[4]。但由于多種因素影響，如血樣中存在不規(guī)則抗體、凝集素、自身抗體、溶血、抗凝劑等，可能會(huì)造成與同血型交叉配血不合發(fā)生，影響輸血的可靠性和安全性[5]。本組資料對(duì)每位患者均采取有無EDTA抗凝的采血管采取2管血樣，構(gòu)成配對(duì)資料，避免了血樣本身因素對(duì)交叉配血結(jié)果的影響，更具有對(duì)比性。

EDTA是一種常用的血液抗凝劑，用于血型鑒定或交叉配血時(shí)，能夠有效抵抗血液的自身凝集，保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。本研究發(fā)現(xiàn)，有無EDTA抗凝血樣與同血型交叉配血時(shí)均不出現(xiàn)凝集，與不同血型的供血交叉配血時(shí)均發(fā)生凝集，表明EDTA抗凝不影響交叉配血的結(jié)果，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[6]。然而，無抗凝血樣在與同血型或不同血型交叉配血時(shí)，溶血的發(fā)生率較EDTA抗凝血樣均增高，表明EDTA抗凝有助于防止溶血的發(fā)生。交叉配血時(shí)，溶血的發(fā)生主要原因在于補(bǔ)體的激活，補(bǔ)體的激活需要鈣離子及鎂離子的參與，而EDTA能與鈣鎂離子相結(jié)合，從而抑制補(bǔ)體的激活，抑制溶血的發(fā)生。有研究表明，EDTA抗凝較加熱法更有助于抑制補(bǔ)體的激活，減少溶血的發(fā)生[3]。本組資料中，EDTA抗凝血樣無論與同血型或不同血型供血樣本交叉配血過程中均無溶血現(xiàn)象發(fā)生，表明EDTA抗凝有助于減少凝聚胺交叉配血過程中溶血的發(fā)生，增加了交叉配血結(jié)果的可靠性。

綜上所述，EDTA抗凝有助于防止凝聚胺交叉配血過程中溶血的發(fā)生，提高結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，值得臨床推廣應(yīng)用。