生津片對口干癥模型大鼠唾液分泌的影響

張燚曼，馮 青，呂宏亮，王 云，于智莘

（長春中醫藥大學，長春 130117）

口干癥是一種多以口干為主的自覺病癥[1]，而其唾液分泌減少主要原因是由于分泌唾液腺體出現異常，常見口腔干燥并伴有舌部燒灼感、口唇干裂、表面結痂等[2]。臨床統計顯示，口干癥患者以老年人居多，并且在大于65歲的老齡人群中，口干癥患者的比率約為30%～40%[3-4]。由于口干癥病因較為復雜，現代醫學主要以局部對癥治療為主[5-6]。中醫治療口干癥有養陰活血生津法、氣陰雙補法、調理陰陽法等[7-9]，療效顯著。生津片中主藥為麥冬，具有益胃生津、滋陰潤燥的功效[10]。本實驗主要通過建立免疫誘導模型，觀察生津片對口干癥大鼠模型所致口干癥的治療作用。

1 材料與方法

1.1 動物與試劑 清潔級SD大鼠（2月齡）60只，SD大鼠（8月齡）5只，雌性，由吉林大學實驗動物中心提供，SCXK（吉）2009-0006。生津片，由長春中醫藥大學研發中心制備，弗氏完全佐劑（Sigma公司），考馬斯亮藍G-250（上海赫彭生物有限公司），卡介苗（長春生物制品研究所），小牛血清（上海依赫科技有限公司），強的松（浙江仙琚有限公司，批號：20160321）。

1.2 造模方法與分組給藥 將大鼠隨機分為 6 組，正常對照組（生理鹽水 20 mL/kg），模型組（生理鹽水20 mL/kg），生津片低、中、高12、24、36 g/（kg·d）劑量組，可的松組（0.30 mg/d）。將5只SD大鼠（8月齡），取頜下腺，將其中的組織和包膜取0.1 g 放入10 mL無菌試管中，加入氯化鈉注射液2 mL，在冰水浴下勻漿，4 ℃低溫離心機離心后通過考馬斯亮藍比色法對蛋白含量進行測定。將上清液加至滅菌生理鹽水中配制濃度為0.4 g/L，再與弗氏完全佐劑混合，制成質量濃度為0.3 g/L乳化抗原液。于大鼠后足足趾部及兩側腹股溝注射乳化抗原，每只0.2 mL（含卡介苗3.25 g/L），同時注射百日咳疫苗，每只0.3 mL。在免疫后的第3、7、21天時，用抗原對模型組及各給藥組進行二次免疫，用量與首次一致[11-14]。

1.3 檢測指標

1.3.1 唾液分泌量 給藥后一定時間間隔測定各組大鼠的唾液分泌量。測量前稱量棉球干重，測定唾液分泌時將稱重后的棉球塞至各組大鼠口頰內，3 min后稱取濕重[15-18]。 濕重-干重=唾液分泌量（mg）

1.3.2 頜下腺指數的測定 首次免疫31 d后頸動脈放血處死動物，取出大鼠的頜下腺，稱重，計算頜下腺指數。 頜下腺指數=頜下腺的重量（mg）/體質量（g）。

1.3.3 組織形態學觀察評價（HE染色） 將大鼠頜下腺制成切片，HE染色。通過光鏡觀察頜下腺的病變情況[19]。病變類型共分4個等級，參照文獻[20]方法評價：0分，頜下腺體正常，幾乎無淋巴細胞浸潤；1分，腺體稍有萎縮，并有少量淋巴細胞浸潤；2分，腺體萎縮至正常形態三分之一左右，淋巴細胞輕度浸潤；3分，腺體中度萎縮，腺泡部分壞死并伴有中度損傷；4分，腺體重度萎縮，腺泡完全壞死并伴有重度損傷。

1.4 統計學方法 全部數據均用SPSS 21.0統計軟件進行處理。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組大鼠唾液分泌量變化比較 見表1。

表1 各組大鼠唾液分泌量變化比較（x± s ，n = 10）

2.2 各組大鼠頜下腺指數變化比較 見表2。

表2 各組大鼠頜下腺指數變化比較（x± s ，n = 10）

2.3 各組大鼠組織形態學變化比較 造模31 d時，將大鼠頸動脈放血處死，光鏡下觀察一側頜下腺形態特征。結果表明，正常對照組的頜下腺無變化，淋巴細胞無浸潤，腺泡正常，未見病理變化。模型組有多數腺體發生病理收縮，半數以上淋巴細胞異常且腺泡出現壞死情況。組織學評分為（2.89±0.64）分。給藥中、高劑量組及強的松組腺體萎縮程度減輕，頜下腺腺體輕度萎縮，腺泡周圍組織有輕度淋巴細胞浸潤，3組比較，差異無統計學意義。

3 小結

生津片由黨參、麥冬、山豆根、天花粉、生地黃、射干、甘草7味藥組成，功能清熱降燥，增液生津，能調節體內陰陽失衡，補充體內津液來源，促進口鼻等腺體分泌[21]，進而治療口干癥。

本實驗采用免疫誘導法對大鼠進行造模，通過觀察與唾液分泌有關腺體病理狀態，檢測各組大鼠唾液分泌量動態變化以及頜下腺指數變化探究生津片治療口干癥的作用機制。實驗表明，與模型組相比，生津片中高劑量組能促進大鼠唾液的增加，并減輕頜下腺損傷程度，說明生津片具有治療口干癥的療效。本實驗為今后探究生津片激動受體的途徑及作用位點打下基礎，為進一步研究生津片涉及的信號傳導通路提供了有力證據。