熒光定量PCR檢測HBV-DNA與化學發光酶免疫法檢測乙型肝炎五項的相關性研究

李澤銳 高 靜

（1 伊犁州新華醫院檢驗科，新疆 伊犁 835000；2 解放軍第十一醫院，新疆 伊犁 835000）

乙型肝炎位于世界人口病死率第10位，全球感染人數約為艾滋病的8倍，我國為乙型肝炎高發國家，流行病學調查顯示，人群發生乙型肝炎概率極高，表面抗原攜帶率大約為15%[1]。臨床上檢測HBV的方法中酶聯免疫吸附法為傳統方法，技術較為成熟，而乙型肝炎五項主要包含乙型肝炎e抗原（HBeAg），乙型肝炎表面抗體（HBsAb），乙型肝炎表面抗原（HBsAg），乙型肝炎核心抗體（HBcAb）和乙型肝炎e抗體（HBeAb）[2]。熒光定量PCR具有高靈敏度、高特異性及高精確度，廣受臨床檢驗人員的青睞，而化學發光酶免疫法不僅具有高靈敏度、高特異性及廣泛的線性范圍，還具有長時間有效的標志物及高的自動化程度，逐漸于乙型肝炎病毒感染檢測中應用，尤其是乙型肝炎五項。

1 資料與方法

1.1 一般資料：隨機選取2012年6月至2015年6月在我院門診和住院的乙型肝炎患者68離，包括47例男性患者，年齡在21～58歲，平均年齡（43.51±10.04）歲；21例女性患者，年齡在25～57歲，平均年齡（36.19±11.40）歲。乙型肝炎診斷標準符合文獻[2]。

1.2 檢測儀器和方法。方法一：對HBV-DNA的檢測選用羅氏公司的LightCycler2.0PCR儀進行檢測，試劑盒選用的為上海普眾華有限公司[3]。方法二：對血清的乙型肝炎五項檢測選用的為強生公司的VITROS3600儀進行檢測，按照說明書進行相關操作，每天在室內進行質控，每次檢測包括了對HBV陰性和HBV陽性的重復檢測[4]。

1.3 統計學處理：所有數據準確無誤的用SPASS 20.0統計學軟件進行處理。、t檢驗表示計量資料，（%）表示計數資料，χ2表示組間對比，P＜0.05差異顯著有統計學意義。

2 結 果

2.1 實驗結果統計：實驗結果顯示，所有乙型肝炎五項血清標本檢測中，HBV-DNA陽性標本血清學標志物的陽性模式共有10種，其中大三陽組（HBsAg+，HBcAb+，HBeAg+）和小三陽組（HBsAg+，HBcAb+，HBeAb+）所占比例最大，除此之外，HBcAb陽性標本總計66例，約占所有HBV-DNA陽性標本的97.5%。見表1。

表1 10種血清學模式標本的HBV-DNA載量分布

2.2 HBV-DNA的分布：將HBV-DNA載量分為低載量、中載量、高載量 三級。結果顯示134組三陽組：低載量占17.9%，中載量占17.4%，高載量占64.7%，135組小三陽：低，中，高載量的相應比例分別為81.3%，15.8%，2.9%差異顯著，有統計學意義（P＜0.05）。

2.3 HBeAg與HBeAb陽性標本中HBV-DNA載量分布：在68例實驗中，對低中高三組符合相應條件的樣本例數進行統計，結果顯示：高載量組有60.9%的陽性標本，低載量組有76.7%陽性標本 ，差異顯著，P＜0.05，見表2。

表2 HBeAg陽性組與HBeAb 陽性組標本的HBV-DNA載量分布

3 討 論

熒光定量PCR檢測和化學發光酶免疫法都是定量試驗，但二者的檢測原理和檢測標志物存在差異，因此不能直接相比較，HBV-DNA復制程度的檢測是熒光定量PCR從分子水平直接進行檢測的，能夠對患者治療的預后恢復情況進行準確反映；而化學發光酶免疫法僅僅為化學發光結合酶免疫實驗其中的一種技術[5]。實驗結果顯示：所有實驗樣本中大三陽和小三陽所占比例最高，其中小三陽組（135組）中低，中，高載量的相應比例分別為81.3%、15.8%、2.9%，大三陽組（134組）中低載量占16.9%，中載量所占比例為17.4%，高載量所占比例為64.7，兩組差異P＜0.05，具有統計學意義；HBeAb和HBeAg陽性標本在HBV-DNA水平存在差異，P＜0.05，具有統計學意義。

綜上所述，熒光定量PCR檢測HBV-DNA與化學發光酶免疫法檢測乙型肝炎五項水平在判斷乙型肝炎病毒感染病程的相關性具有理想效果，二者的結合可以多方位全面的反映乙型肝炎患者的病程轉歸及其預后恢復。