聯合檢測標志物在糖尿病腎病早期腎損傷診斷中的臨床價值

郝玉婷 林潔 秦杰

(1.首都醫科大學附屬北京康復醫院檢驗科，北京 100144;2.北京大學醫學部醫院檢驗科，北京 100191;3.首都醫科大學附屬北京中醫醫院檢驗科，北京 100010)

糖尿病腎病是糖尿病患者中最為常見的一種微血管并發癥，若不能得到及時控制，更容易出現慢性腎功能衰竭，對患者的生活質量產生非常大的影響[1-2]。因為糖尿病患者長時間的腎小球內高濾過、高灌注對腎臟造成較大的損害，糖尿病早期易發生腎小動脈硬化，其典型的表現就是出現大量蛋白尿[3-4]。若在早期得不到較好治療，臨床出現蛋白尿時疾病就會比較嚴重，因此，對于糖尿病腎病患者應盡早發現盡早治療。而傳統的診斷方法不能準確的顯示糖尿病腎病患者的具體情況，造成患者得不到有效治療，并造成患者病情加重，危害身體健康。相關研究發現，采用mALB、UCr、α-MG、β2-MG、NAG聯合檢測的診斷方法靈敏度極高，極大提高了早期腎損傷診斷的準確性，使得患者能夠得到及時有效的治療[5]。本文探討mALB、UCr、α-MG、β2-MG、NAG聯合檢測在糖尿病腎病早期腎損傷診斷中的臨床價值，現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機選取2016年6月～2018年6月在我院治療的500例糖尿病腎病患者作為研究組，選取500例健康人作為對照組，研究組500例患者中男253例，女247例，年齡44～78歲，平均(63.29±1.27)歲，病程4～19年，平均病程(8.9±1.7)年；對照組500例被檢測者中男242例，258例，年齡47～81歲，平均(64.23±1.31)歲。納入標準：被確診為患有糖尿病腎病的患者；自愿參與本研究，并同意對其進行隨訪。糖尿病診斷符合2017年美國糖尿病協會(ADA)診斷標準。排除標準：有精神病史、風濕、類風濕性關節炎病史；肝臟功能不正常的患者；一個月之內有感染病史；對ARB、ACEI過敏、不能承受使用血管緊張素受體拮抗劑后產生的不良反應(皮疹、咳嗽等)、妊娠、低血壓、高鉀血癥、合并有其他疾病且較為嚴重；理解能力存在嚴重障礙或依從性差的患者；患者因其他原因出現中斷治療情況視為無效。患者均知情同意本研究，兩組的年齡、性別、病程等一般差異無統計學意義，具有可比性(P>0.05)。本研究通過醫院倫理委員會批準。

1.2 方法 首先在收集尿液之前，患者禁食，隨機收集住院患者晨尿，收集門診患者的任意時間的尿液，將尿液用特定儀器收集，對收集的尿液進行離心，3000r/rain，離心時間為10min,取尿液上清液，在4h之內完成對尿液的檢測[3]。NAG指標的檢驗使用終點法，而TF、MALB、β2-MG指標的檢驗使用膠乳增強免疫比濁方法。測定尿肌酐的測定使用Jaffe’s速率法進行測定。測定結果使用TF/Cr、NALB/Cr、&一MG/Cr、NAG/Cr進行表示。使用雅培C16000生化分析儀(由美國雅培ABBOTT公司制造)a1MG和NAG試劑(由北京利德曼生化股份有限公司制造)；NAG、U肌酐試劑(由美國雅培ABBOTT公司制造)微量白蛋白和B2微球蛋白試劑(由上海盈科醫學生物技術有限公司制造)。

1.3 觀察指標 對采集尿液的上清液進行檢測，觀察并記錄兩組尿液的UCr/Cr、MALB/Cr、β2-MG/Cr、NAG/C比值以及mALB、UCr、β2-MG、NAG單項指標的陽性率，mALB+UCr和β2-MG+NAG兩項指標雙向檢驗的陽性率以及采用mALB+UCr+β2-MG+NAG+α-MG五項指標聯合檢驗的陽性率。記錄血清肌酐該種指標的陽性率，采用尿素氮該種指標的陽性率以及采用內生肌酐該種指標的陽性率。

1.4 統計學分析 數據應用SPSS18.0進行分析，其中計數進行2檢驗，計量進行t檢測，計數資料采用均數±標準差表示， 以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組UCr/Cr、MALB/Cr、β2-MG/Cr、NAG/C比值對比 研究組UCr/Cr、MALB/Cr、β2-MG/Cr、NAG/C比值與對照組比較差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩組UCr/Cr、MALB/Cr、β2-MG/Cr、NAG/C比值的對比Table 1 Comparison of UCr/Cr, MALB/Cr, iso2 MG/Cr, NAG/C ratio between the study group and the control group

2.2 各項指標及聯合指標的陽性例數及陽性率 使用mALB、UCr、β2-MG、NAG單項指標的陽性率要明顯低于采用mALB+UCr和β2-MG+NAG兩項指標雙向檢驗的陽性率(P<0.05)；采用mALB+UCr+β2-MG+NAG+α-MG五項指標聯合檢驗的陽性率要明顯高于使用mALB、UCr、β2-MG、NAG單項指標的陽性率和采用mALB+UCr和β2-MG+NAG兩項指標雙向檢驗的陽性率(P<0.05)，見表2。

表2各項指標及聯合指標的陽性例數及陽性率

Table2Thenumberofpositivecasesandpositiveratesofallindicatorsandcombinedindicators

項目標本數陽性數陽性率(×10-2)UCr1007070.0MALB1005151.0β2一MG1006969.0NAG1005454.0mALB+UCr1007979.0β2-MG+NAG1008282.0mALB+UCr+β2-MG+NAG+α-MG1009393.0t/11.54214.526P/<0.05<0.05

2.3 聯合指標和血清肌酐指標的陽性例數及陽性率 采用mALB+UCr+β2-MG+NAG+α-MG五項指標聯合檢驗的陽性率要明顯高于采用血清肌酐該種指標的陽性率(P<0.05)，見表3。

表3聯合指標和血清肌酐指標的陽性例數及陽性率

Table3Thenumberofpositivecasesandpositiveratesofcombinedindicatorsandserumcreatinineindexes

項目標本數陽性數陽性率(×10-2)血清肌酐1007070.0mALB+UCr+β2-MG+NAG+α-MG1009393.0t/14.54216.525P/<0.05<0.05

2.4 聯合指標和尿素氮指標的陽性例數及陽性率 采用mALB+UCr+β2-MG+NAG+α-MG五項指標聯合檢驗的陽性率要明顯高于尿素氮指標的陽性率(P<0.05)，見表4。

表4聯合指標和尿素氮指標的陽性例數及陽性率

Table4Numberofpositivecasesandpositiveratesofcombinedindicatorsandureanitrogenindicators

項目標本數陽性數陽性率(×10-2)尿素氮1005252.0mALB+UCr+β2-MG+NAG1009393.0t/13.54214.547P/<0.05<0.05

2.5 聯合指標和內生肌酐指標的陽性例數及陽性率 采用mALB+UCr+β2-MG+NAG+α-MG五項指標聯合檢驗的陽性率要明顯高于采用內生肌酐該種指標的陽性率(P<0.05)，見表5。

表5聯合指標和內生肌酐指標的陽性例數及陽性率

Table5Thenumberofpositivecasesandpositiveratesofcombinedindicatorsandendogenouscreatinineindexes

項目標本數陽性數陽性率(×10-2)內生肌酐1004545.0mALB+UCr+β2-MG+NAG1009393.0t/11.54416.537P/<0.05<0.05

3 討論

糖尿病腎病是糖尿病的并發癥之一。該病是糖尿病較為嚴重的微血管并發癥，治療比較困難，是糖尿病患者致殘致死的重要原因之一[6-8]。腎臟損害的早期表現為微量蛋白尿，可用于指導治療及判斷患者預后情況。半數以上患者的尿蛋白經過早期的干預可以恢復正常[9-11]。故對糖尿病腎病患者早發現、早治療成為研究的熱點。糖尿病腎病患者病情加重時會出現肌酐升高、鉀升高、干咳等癥狀，嚴重危害患者身體健康，為患者的家庭帶來了沉重的經濟和精神負擔[12-14]。針對該種病癥，要盡早發現盡早治療，防止造成生命危險。

正常腎小球的毛細血管的基底膜具有濾過功能，平均孔徑的大小不超過6nm，在它的表面帶有負電荷，濾過壓、腎小球毛細血管基底膜的電荷狀態以及蛋白質分子的大小狀態都會影響到血液中微量蛋白的漏出[15-16]。IF分子和微量白蛋白分子兩者均帶負電荷，在健康人群中，這兩種小分子的蛋白幾乎不能透過腎小球的基底膜，這兩種小分子經過濾過后，會被近曲腎小管重新吸收[17]。但是當糖尿病腎損傷時，腎小球的基底膜的硫酸肝素的合成會相對的減少，腎小球的濾膜上的電荷會丟失，進而破壞孔徑大小的選擇功能。而且患者血液中的高濃度的葡萄糖會造成非酶糖酰化的速率增加，進而造成基底膜的屏障功能發生改變，阻礙腎小球血管的調節功能，最終導致腎血流動力學發生改變，最終腎小球長期處于高濾過的狀態，進而造成患者腎部出現損傷現象。mALB、UCr、α-MG、β2-MG、NAG的含量可以準確的反應糖尿病腎病患者的身體指標的變化，適用于糖尿病腎病早期的診斷。使用mALB、UCr、β2-MG、NAG單項指標的陽性率要明顯低于采用mALB+UCr和β2-MG+NAG兩項指標雙向檢驗的陽性率，采用mALB+UCr+β2-MG+NAG+α-MG五項指標聯合檢驗的陽性率要明顯高于使用mALB、UCr、β2-MG、NAG單項指標的陽性率和采用mALB+UCr和β2-MG+NAG兩項指標雙向檢驗的陽性率。并且TF的敏感性要高于MALBE的敏感性[17]。NAG是一種高分子的糖蛋白，該種分子主要存在于近曲腎小管的上皮細胞中，一旦身體中NAG分子的釋放量過高，活性增高，則證明腎小管出現了壞死和變形，可以準確的反應腎小管實質細胞的損傷情況[18]。在血液循環中，β2-MG可以自由通過腎小球的濾膜，該種分子主要通過胞飲的形式進行攝取，當腎小管的上皮細胞出現損傷時，腎小管對該種分子的重吸收的能力就會相對減弱，進而在尿液中的含量就會大大增加[19]。該種分子也可以準確反映患者腎部的損傷情況，作為糖尿病腎病患者早期診斷的重要指標。

NAG和尿微量蛋白的聯合檢測可以極大的提高檢驗的陽性率，提高早期診斷的靈敏度。而采用mALB+UCr+β2-MG+NAG+α-MG五項指標聯合檢驗的陽性率時所有指標檢驗中陽性率最高的，陽性率高達93%。對比fi2+MG+NAG和rIF+MALB兩種檢驗的陽性率，fi2+MG+NAG的陽性率要明顯高于rIF+MALB的陽性率，這也就說明了腎小管的損傷出現的時間要比腎小球損傷出現的時間要早[20-21]。并且NAG和尿微量蛋白聯合檢測方法采樣方便，操作簡單快捷，并且不會在身體上殘留創口。傳統的實驗室診斷方法不能準確快速的反應糖尿病腎病患者的腎部損傷情況，并且操作復雜。故聯合檢測方法值得在早期診斷中進一步推廣和應用。

4 結論

mALB、UCr、α-MG、β2-MG、NAG聯合檢測可以靈敏地測得糖尿病腎病患者的身體變化，使患者盡早得到治療，腎小管比腎小球的損傷出現的時間要早，值得臨床醫師在早期診斷中借鑒。