犢牦牛腹瀉診斷

羅雪，李然，阿比克哈莫，湯承，岳華

（西南民族大學生命科學與技術學院，四川 成都 610041）

腹瀉是犢牛的常發疾病，其既可由細菌、病毒、寄生蟲等引起，也可由營養因素、環境因素引發，一般病原微生物感染是引發犢牛腹瀉的主要原因。腹瀉嚴重影響犢牛成活率，幸存犢牛的生長發育和生產性能也會受到影響。

1 臨床癥狀

某養殖戶的4頭犢牦牛發生以急性腹瀉為特征的疾病。病牛精神沉郁、被毛粗糙、呼吸短促，水樣腹瀉，糞便呈灰白色，其中3頭牛的糞便混有鮮血。

2 實驗室檢測

2.1 糞便處理及核酸提取 采集病牛糞便按1∶5（V/V）加入生理鹽水制成懸液，-80℃反復凍融3次，5000r/min離心10min，按照和酚-氯仿法提取DNA，按照Trizol法提取RNA，并參照反轉錄試劑盒說明合成cDNA。

2.2 PCR檢測 檢測牛輪狀病毒（BRV）、牛冠狀病毒（BCV）、牛病毒性腹瀉/黏膜病病毒（BVDV）、大腸桿菌K99、沙門菌的特異性PCR，以糞便DNA和cDNA為模板，參照相關文獻方法進行PCR擴增和凝膠電泳鑒定。

3 診斷

PCR從4份糞便樣本中擴增出4個BRV的特異條帶和2個BCV的特異性條帶，與陽性對照條帶大小一致。未檢出BVDV、大腸桿菌K99和沙門菌。

根據臨床癥狀，結合實驗室檢測，確診犢牦牛腹瀉是由BRV、BCV混合感染所致。

4 小結

細菌和病毒感染是導致犢牛腹瀉的常見原因，臨床上常見兩種及兩種以上的病原混合感染。本實驗對患牛糞便中BRV、BCV、BVDV、大腸桿菌K99、沙門菌5種常見病原進行了檢測，結果顯示牦牛腹瀉由BRV、BCV混合感染所致。

BRV是常見的導致犢牛腹瀉的病原，BCV也是引起犢牛腹瀉的主要病原，且可引起成年牛冬痢和呼吸道疾病。