4種常用水產藥物對大鱗鲃的急性毒性試驗

于振海，朱永安，孟慶磊，朱樹人，王錫榮

( 山東省淡水漁業研究院，山東省淡水水產遺傳育種重點實驗室，山東 濟南 250013 )

大鱗鲃(Barbuscapito)屬鯉科、鲃亞科、鲃屬，體質量可達5～10 kg，具有耐鹽堿、食性廣、生長速度快、肉質鮮美、抗逆性強等優良特性[1-5]。大鱗鲃主要分布于西亞的里海和咸海水域，是當地名貴的大型經濟魚類之一，為促進鹽堿水域的開發和利用，2003年引入我國，旨在增加內陸鹽堿地水域的養殖種類。

大鱗鲃為引進種，在我國養殖的時間較短，關于大鱗鲃疾病的報道極少，僅有2016年天津天祥水產有限公司出現的不明原因極度貧血而大量死亡的個例[6]。大鱗鲃雖未出現大規模疾病爆發，但對于疾病應防重于治。隨著大鱗鲃人工繁育技術成熟，養殖規模逐漸擴大，苗種的抗病力低于成魚，更易染病。藥物防治病害是有效且經濟的方法[7]。針對魚類常見的錨頭鳋(Lernaea)、中華鳋(Sinergasilus)、車輪蟲、指環蟲、線蟲幼體等寄生蟲性疾病和弧菌(Vibrio)、嗜水氣單胞菌(Aeromonashydrophila)、愛德華氏菌(Edwardsiella)等細菌引起出血、爛鰓、癤瘡、腐皮等細菌性疾病，筆者選用阿維菌素、敵百蟲作為抗寄生蟲藥物，選用聚維酮碘、三氯異氰尿酸作為殺菌藥物[8]，通過急性毒性試驗確定藥物的安全用量和毒性等級，為大鱗鲃養殖中合理用藥、安全用藥提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗用魚體長(17.9±1.6) cm、體質量(63.4±19.3) g，試驗前在試驗條件下暫養3 d，日投喂1次。試驗開始前24 h停食，選游泳活潑，無病、無傷、無畸形的魚進行試驗。試驗用藥分別為阿維菌素、聚維酮碘、三氯異氰尿酸和敵百蟲，藥品規格及生產廠家等見表1。

表1 4種試驗藥物的規格與成分

1.2 方法

2017年6月，采用靜態試驗法[9]，在80 cm×60 cm×45 cm、容水100 L的白色塑料箱內放魚10尾，進行試驗。每個周期4 d。試驗用水為池塘養殖用水，水質符合漁業水質標準(GB 11607—89)，水溫(24.1±1.5) ℃、pH 8.41±0.12、溶解氧(6.1±0.9) mg/L。每日測1次水溫、pH、溶解氧含量。試驗期間不投餌。

先采用靜態方式進行預試驗，每個預試驗質量濃度組放入5尾魚，不設平行組，持續48～96 h。每日至少記錄2次各容器內的死亡魚數，并及時取出死亡個體。

根據預試驗結果，參照《水和廢水監測分析方法》[10]，每種藥物設5個梯度組(表2)和一個空白對照組，每個梯度組設2個平行。溶液調節至相應質量濃度后，從馴養魚群中隨機取出試驗魚迅速放入各試驗容器中。試驗魚在20 min內分組完畢。

24、48、72、96 h后檢查試驗魚狀況，以試驗對象失去活力、對外界刺激無反應為死亡標準[11]。試驗開始后8 h連續觀察各處理組魚的狀況，記錄24、48、72 h和96 h的死亡數，記錄異常行為，及時清除死魚。

1.3 數據處理

半致死質量濃度(LC50，mg/L)、安全質量濃度(SC，mg/L)[12]按下式計算:

logLC50=xm-d(∑ωB-0.5)

SC=ρ1×0.3/(ρ2/ρ1)2

式中，xm為死亡組最大劑量的對數，d為相鄰質量濃度的對數差，ωB為各組的死亡率(%)，∑ωB為各組死亡率之和(%)；ρ1為48 h半致死質量濃度(mg/L)；ρ2為24 h半致死質量濃度(mg/L)。

2 結 果

整個試驗過程中，對照組大鱗鲃無死亡。阿維菌素、聚維酮碘、三氯異氰尿酸和敵百蟲藥物組大鱗鲃的毒性結果見表2。

2.1 阿維菌素試驗結果

阿維菌素急性中毒的大鱗鲃，少動，對外界刺激反應遲鈍，游動時身體會失去平衡。阿維菌素質量濃度為1.496～5.000 mg/L的試驗組，隨著質量濃度的增加，大鱗鲃的死亡率也逐漸增大。對照組和質量濃度為1.000 mg/L試驗組未見非正常現象，二者96 h死亡率均為0；當質量濃度為5.000 mg/L時，約6 h出現死亡，24 h死亡率為100%。阿維菌素對大鱗鲃的24、48 h和96 h的半致死質量濃度分別為3.340、2.840 mg/L和2.621 mg/L，安全質量濃度為0.616 mg/L(表3)。

表2 4種藥物對大鱗鲃的致死率

2.2 聚維酮碘

在聚維酮碘質量濃度為17.800～100.000 mg/L組中大鱗鲃反應遲鈍，游泳能力和呼吸能力減弱，最后死亡，而且隨聚維酮碘質量濃度的升高，死亡率也逐漸升高，而對照組和質量濃度為10.000 mg/L試驗組未出現不正常現象。100.000 mg/L試驗組的24 h死亡率為100%。聚維酮碘對大鱗鲃的24、48 h和96 h半致死質量濃度分別為74.967、63.077 mg/L和50.106 mg/L，安全質量濃度為13.397 mg/L(表3)。

2.3 三氯異氰尿酸試驗結果

在三氯異氰尿酸質量濃度為10 mg/L組中，約10 min大鱗鲃浮在上層，吞食空氣，類似浮頭現象，游泳動作緩慢，約20 min失去平衡，腹部朝上，對外界刺激反應遲鈍，約30 min開始死亡。質量濃度5.623 mg/L組大鱗鲃24 h死亡率達到90%，48 h和96 h的死亡率均為100%。三氯異氰尿酸對大鱗鲃的24、48 h和96 h的半致死質量濃度分別為4.466、3.758 mg/L和3.548 mg/L，安全質量濃度為0.798 mg/L(表3)。

2.4 敵百蟲試驗結果

在敵百蟲質量濃度為0.356～2.000 mg/L試驗組中，大鱗鲃不安地亂竄，時而箱底時而浮上水面，后期扭曲翻滾，抖動，最后死亡。試驗組的藥品質量濃度與大鱗鲃的死亡率呈正相關，對照組和質量濃度為0.200 mg/L組未出現非正常現象，96 h死亡率為0，質量濃度2.000 mg/L試驗組24 h死亡率為100%。敵百蟲對大鱗鲃的24、48 h和96 h的半致死質量濃度分別為1.191、1.061 mg/L和0.709 mg/L，安全質量濃度為0.253 mg/L(表3)。

表3 4種藥物的的半致死質量濃度及安全質量濃度

3 討 論

3.1 4種藥物毒性評價

半致死質量濃度是衡量藥物對試驗對象毒性的指標，其值越小，藥物毒性越大；其值越大，毒性越低[13-14]。以96 h半致死質量濃度為魚類急性毒性分級標準，分為極高毒(<1 mg/L)、高毒(1～10 mg/L)、中毒(10～100 mg/L)和低毒(>100 mg/L)4個等級[10]。本試驗中4種藥物對大鱗鲃的96 h半致死質量濃度為聚維酮碘>三氯異氰尿酸>阿維菌素>敵百蟲，按照藥物對其毒性依次為敵百蟲>阿維菌素>三氯異氰尿酸>聚維酮碘。本試驗結果表明，敵百蟲對大鱗鲃是極高毒藥物，三氯異氰尿酸和阿維菌素是高毒藥物，聚維酮碘是中毒藥物。4種藥物對大鱗鲃的半致死質量濃度呈24 h半致死質量濃度>48 h半致死質量濃度>96 h半致死質量濃度(表3)，說明隨時間的延長，4種藥物對試驗魚的毒性效應相應增加。

3.2 4種藥物用藥安全性

阿維菌素對錨頭鳋、中華鳋、纖毛蟲、指環蟲和線蟲等寄生蟲均有極強的驅殺作用，廣泛應用于水產動物體內外寄生蟲病的防治[15]。周帥等[16]評價了阿維菌素水乳劑對鰱魚(Hypophthalmichthysmolitrix)、異育銀鯽(Carassiusauratusgibelio)、草魚(Ctenopharyngodonidellu)的安全性和藥效，表明該制劑可有效防治錨頭鳋、中華鳋等寄生蟲病。阿維菌素常用量為0.037～0.045 mg/L，本試驗中阿維菌素的安全質量濃度為0.616 mg/L，高于常用量，說明阿維菌素能夠用于大鱗鲃寄生蟲疾病的防治。

聚維酮碘又名聚乙烯吡咯烷酮碘，對魚體無刺激性，體表存留時間較長，可保持長久的抑菌殺菌能力，促進魚類皮膚機械損傷愈合，為廣譜、高效消毒殺菌劑，防治水產動物爛鰓、癤瘡、腐皮等細菌性疾病的效果很好，是水產養殖中廣泛使用的消毒殺菌劑[17]。聚維酮碘常用量為0.03～0.04 mg/L，本試驗中聚維酮碘的安全質量濃度為13.394 mg/L，高于同為鲃亞科的光倒刺鲃(Spinibarbushollandi)的10.3 mg/L[18]，也遠高于常用量，在大鱗鲃養殖過程中可作為消毒殺菌劑使用，也可作為浸泡藥物治療細菌性疾病。

三氯異氰尿酸水解生成次氯酸,具有穩定殺菌作用，是生產上用以防治細菌性疾病的常用藥物，常用量為0.4～0.5 mg/L[19]。孫翰昌等[19]研究發現，三氯異氰尿酸對中華倒刺鲃(S.sinensis)的安全質量濃度為0.53 mg/L，雖易刺激魚體，但可用于魚病防治。本試驗中，三氯異氰尿酸的安全質量濃度為0.798 mg/L，藥品的有效成分為50%(有效氯計)，因此三氯異氰尿酸的安全質量濃度為0.399 mg/L，略低于常用量，高于光倒刺鲃的0.05 mg/L[18]。大鱗鲃和光倒刺鲃異氰尿酸反應強烈，建議生產中謹慎使用三氯異氰尿酸。

敵百蟲為膽堿酯酶抑制劑，能將膽堿酯酶的活性點磷酸化而抑制其活性。敵百蟲在魚體內殘留量少、殘留時間短而被廣泛用于防治體外寄生甲殼類、單殖吸蟲及部分腸內寄生蠕蟲，常用量為0.2～0.5 mg/L[20]。敵百蟲對光倒刺鲃的安全質量濃度為1.1 mg/L[18]，對中華倒刺鲃安全質量濃度為0.164 mg/L[20]，對黑脊倒刺鲃(S.caldwelli)安全質量濃度為50 mg/L[21]。試驗中敵百蟲的安全質量濃度為0.253 mg/L，介于常用量之間，因此敵百蟲可以作為大鱗鲃的疾病防治藥物。水產藥物對魚類的急性毒性因魚的種類、規格而異，對藥物的安全質量濃度也不同[22]。

生產中，藥物的毒性往往受水溫、水質、pH、各種水生生物和有機物等諸多因子影響。例如，敵百蟲是極高毒農藥，在堿性條件下可水解成毒性增加10余倍的敵敵畏[23]。除了從藥物的半致死質量濃度和安全質量濃度上考慮，在生產中選用藥物還需結合藥物的常用量、用藥時間及用藥環境綜合考慮，同時密切觀察魚的活動情況，防止魚類中毒。