重組人腦利鈉肽在冠狀動脈搭橋術(shù)中的應(yīng)用效果分析

孫海磊，嚴中亞，葛建軍，趙智偉，樊揚名，蔣輝

[中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)附屬第一醫(yī)院(安徽省立醫(yī)院)心臟大血管外科，合肥230001]

近年來，隨著我國人口老齡化程度的加劇，飲食結(jié)構(gòu)發(fā)生巨大變化，冠心病發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升的趨勢。冠狀動脈搭橋手術(shù)成為重癥冠心病患者存活的唯一機會[1-2]。B型利鈉肽(BNP)是心臟壓力負荷和容量負荷增加時產(chǎn)生的用于增強心肌收縮功能的內(nèi)源性物質(zhì)，臨床研究顯示，嚴重心力衰竭時期，患者會出現(xiàn)內(nèi)源性BNP水平的相對不足[3-4]。因此，需給予患者外源性的BNP用于心力衰竭失代償期的治療。多項研究均顯示，采用凍干重組人腦利鈉肽(rhBNP)對冠心病患者進行治療，能顯著改善患者心室重構(gòu)狀況[5-6]。但對于應(yīng)用不同手術(shù)方式的患者，凍干重組人腦利鈉肽的應(yīng)用效果尚不明確。本研究旨在進一步研究凍干重組人腦利鈉肽對不同手術(shù)方式患者的療效狀況。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年6月至2017年12月在我院接受冠狀動脈搭橋手術(shù)同時應(yīng)用凍干重組人腦利鈉肽的80例患者病歷資料。根據(jù)手術(shù)方式的不同，分為體外循環(huán)組(n=45)和非體外循環(huán)組(n=35)。兩組均為單純冠心病均為三支病變(前降支、回旋支、右冠)，經(jīng)心內(nèi)科會診后無法予以經(jīng)皮冠狀動脈介入術(shù)(PCI)，同時不合并心臟瓣膜病。體外循環(huán)組患者中男28例，女17例；年齡范圍61～79歲，年齡(72.2±6.9)歲；非體外循環(huán)組患者中男23例，女12例；年齡范圍64～80歲，年齡(72.0±7.2)歲。兩組患者性別、年齡等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法 兩組均給予常規(guī)冠心病藥物進行治療。在此基礎(chǔ)上，給予兩組患者凍干重組人腦利鈉肽(成都諾迪康生物制藥有限公司生產(chǎn)，規(guī)格：0.5 mg/支)，首先以1.5 μg/kg靜脈沖擊后，以0.0075 μg·kg-1·min-1的速度連續(xù)靜脈滴注120 h。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察患者用藥后使用C反應(yīng)蛋白(CRP)和B型利鈉肽(BNP)水平變化，并對兩組患者左室射血分數(shù)(LVEF)、左心室舒張末期內(nèi)徑(LVEDD)、左心室收縮末期內(nèi)徑(LVESD)水平進行檢測。BNP的檢測采用上海奧斯邦公司提供的酶聯(lián)免疫試劑盒進行檢測。CRP的檢測采用德國西門子公司生產(chǎn)的BNII全自動蛋白分析儀進行分析。LVEDD、LVESD的檢測采用飛利浦公司IE33型號超聲儀進行，并自動計算LVEF值。再對比兩組患者臨床中的療效及不良反應(yīng)情況分析。具療效評價標(biāo)準(zhǔn)為[7]：顯效是指患者心功能分級恢復(fù)到二級以上；有效是指患者的心功能提高一級以上；無效是指患者心功能未達到明顯改善，甚至出現(xiàn)加重趨勢。

1.4 RT-PCR檢測CRP和BNP在rhBNP治療前后的表達 根據(jù)TRIzol reagent (Invitrogen，Carlsbad，CA，USA) 方法提取各樣品 RNA，將Trizol 裂解液轉(zhuǎn)入EP管中，室溫放置15 min；在上述EP管中，加0.2 mL氯仿，用力震蕩15 s，室溫放置 2～3 min，12 000 g，4 ℃離心15 min；取上層水相置于新EP管中，加0.5 mL異丙醇，室溫放置15 min，12 000 g，4 ℃ 離心10 min；棄上清，加1 mL 75%乙醇，渦旋混合，5000 g，4 ℃ 離心5 min，棄上清，重復(fù)1次；RNA 沉淀在室溫自然干燥，Rnase-free water 溶解 RNA 沉淀。在 Nanodrop 上測定 RNA濃度及 OD260/OD280 值。利用 Prime ScriptTMRT Master Mix kit (TaKaRa) 試劑盒反轉(zhuǎn)錄成 cDNA，1 μg RNA，2 μL 5×PrimeScript RT Master Mix，補充無 RNase 水至 10 μL。反應(yīng)程序為：37 ℃ 15 min，85 ℃ 5 s 結(jié)束。

利用 Real Time SYBR master mix kit (TaKaRa) 和 Step One real-time PCR system 檢測目的基因 (CRP和BNP) 表達，GAPDH 為內(nèi)參基因，2-ΔΔCT計算相對變化量。反應(yīng)體系為20 μL，包括 2×SYBR Green Premix Ex Taq II 10μL、上下游引物各 0.4 μL (25 pmol/L)、模板 (cDNA) 1 μL、ROX Reference Dye (50×) 0.4 μL，DEPC 水7.8 μL。反應(yīng)條件：95 ℃ 預(yù)變性 5min；95 ℃ 變性 5s，60 ℃ 退火及延伸 34 s，擴增 40 個循環(huán)。

2 結(jié)果

2.1 兩組治療后心功能改善情況比較 兩組患者治療后總有效率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組患者治療后臨床療效比較[例(%)]

2.2 兩組治療前后CRP及BNP水平分析 治療前，兩組患者的CRP及BNP水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；治療后，兩組患者的CRP及BNP水平均顯著降低，且非體外循環(huán)組CRP及BNP水平明顯低于體外循環(huán)組，兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

2.3 兩組患者心室各項參數(shù)記錄 治療前，兩組患者的LVEF、LVEDD及LVESD差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；治療后，兩組患者的LVEDD及LVESD均明顯降低，且非體外循環(huán)組LVEDD及LVESD水平明顯低于體外循環(huán)組，兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

2.4 兩組不良反應(yīng)分析 兩組患者的不良反應(yīng)發(fā)生率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表4。

表4 兩組不良反應(yīng)情況分析[例(%)]

3 討論

冠心病是嚴重危害我國公民健康的心血管疾病，也是導(dǎo)致猝死的主要原因之一。患者具有為心臟肥大或擴大等臨床表現(xiàn)，進而導(dǎo)致左心室收縮末期容積增大和射血分數(shù)降低[8-9]。為進一步明確不同手術(shù)方式的診療效果，并對療效狀況進行評估，我院特展開本次研究。

rhBNP注射用主要用來模擬內(nèi)源性腦利鈉肽的生物效應(yīng)，大部分用于治療患者的心力衰退[10]。rhBNP主要功能是促進平滑肌松弛和增加環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)濃度，使得動脈和靜脈擴散，可拮抗心臟纖維細胞，血管平滑肌細胞和心肌細胞的醛固酮，對利尿醫(yī)治帶來的療效和作用較好[11-12]。rhBNP具有血管擴張作用，促使鈉排泄，利尿作用較好，防止心力衰退的發(fā)展而帶來不良的影響。因此，rhBNP是一種有效的治療心力衰竭的藥物[13]。

血漿BNP水平可作為心力衰竭及心功能不全的心力衰竭的指標(biāo)[14-15]。血漿BNP水平的下降表明患者出現(xiàn)明顯的心功能衰退，同樣BNP水平也是判斷患者預(yù)后狀況的重要指標(biāo)。CRP是機體受到組織損傷等炎癥性刺激時肝細胞所產(chǎn)生的一種急性時相蛋白，臨床研究顯示心力衰竭患者全身多系統(tǒng)的循環(huán)障礙所致的低氧、低灌注、氧化應(yīng)激狀態(tài)均會刺激機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生較多免疫因子，進而誘導(dǎo)肝細胞合成CRP。CRP能反映心力衰竭患者治療反應(yīng)差狀況，是患者癥狀改善及情況判斷的獨立檢測指標(biāo)[16]。本研究中通過凍干重組人腦利鈉肽治療患者的CRP和BNP水平均明顯降低。本研究結(jié)果表明：治療前，兩組患者血液中的CRP及BNP表達無顯著性差異，治療后，兩組患者的CRP及BNP表達量均顯著降低，且非體外循環(huán)組CRP及BNP水平明顯低于體外循環(huán)組。體外循環(huán)冠脈搭橋患者的采用新活素治療后BNP、CRP水平改善較非體外循環(huán)心功能不全患者要差。

表2 兩組治療前后CRP及BNP水平分析

注：CRP為C反應(yīng)蛋白，BNP為B型利鈉肽；與非體外循環(huán)組比較，aP<0.05

表3 兩組患者的LVESD、LVEDD及LVEF比較

注:LVEF為左心室射血分數(shù)，LVEDD為左心室舒張末期內(nèi)徑，LVESD為左心室收縮末期內(nèi)徑；與體外循環(huán)組相比，aP<0.05

LVEF、LVEDD及LVESD是常規(guī)用于評估患者心室結(jié)構(gòu)的指標(biāo)，心功能不全或者心力衰竭患者會存在LVEF水平的降低，和LVEDD及LVESD的增大。多項研究顯示，冠心病心功能不全患者多存在LVEF的顯著降低，心肌缺血位置、冠狀動脈狹窄嚴重程度均會影響患者的心功能狀況。在對體外循環(huán)組冠脈搭橋心功能不全患者治療過程中需密切關(guān)注患者的心室重構(gòu)狀況，進而評估患者發(fā)生心力衰竭的風(fēng)險性[17]。在本研究中，體外循環(huán)組冠心病患者在常規(guī)心力衰竭各項癥狀外，心肌結(jié)構(gòu)發(fā)生較大病變，采用凍干重組人腦利鈉肽治療后，患者的心肌損傷狀況不能得到完全逆轉(zhuǎn)，因此，患者心室結(jié)構(gòu)各項指標(biāo)改善效果不及非體外循環(huán)冠脈搭橋患者[18]，表明凍干重組人腦利鈉肽治療非體外循環(huán)下冠狀動脈搭橋，較治療體外循環(huán)下冠狀動脈的心功能各項指標(biāo)改善效果更佳，表明凍干重組人腦利鈉肽對于非體外循環(huán)下冠狀動脈搭橋患者的預(yù)后改善效果較好。

總之，凍干重組人腦利鈉肽對非體外循環(huán)下冠狀動脈搭橋患者所致心力衰竭患者的CRP和BNP及心室結(jié)構(gòu)的改善效果較體外循環(huán)下冠脈搭橋患者更好。