利洋1號和利洋2號南美白對蝦仔蝦耐低氧能力研究

■ 單保黨、胡壯濤、蔡娟、丁玉龍、黎秋云

(廣州金水動物保健品有限公司，廣州 510510 )

南美白對蝦（Penaenus vannamei）屬于節肢動物門（Arthropoda）、甲殼綱（crustacean）、十足目（decapod）、對蝦屬（shrimp genus）白對蝦（White shrimp），也有人叫做凡納濱對蝦（Litopenaeus）、白肢蝦（White-lag shrimp）。它與斑節對蝦、中國對蝦并列稱為世界產量最高的三大對蝦。南美白對蝦因其肉質鮮嫩、生長迅速、產量高、抗病力強而逐漸成為我國沿海主要養殖品種之一，且深受廣大人們群眾的喜愛。目前國內對蝦養殖現狀是種蝦差、種苗差、養殖過程病害多、輪作障礙等。種苗的重要性不言而喻。如何培養出培養出一批抗病性強，耐低氧能力強，生長速度快的蝦苗？嚴格的親蝦選育技術及優良的育苗技術是培育優良蝦苗的關鍵。耐低氧能力是評價蝦苗好壞的指標之一，而蝦苗耗氧率、窒息點的高低均能反映耐低氧能力強弱。目前國內外耗氧率、窒息點等相關研究主要集中在溫度、鹽度、pH、規格、晝夜變化等，研究對象主要集中在貝類、魚類有斑點叉尾鮰魚苗、鯔幼魚、刀鱭幼魚、長鰭籃子魚幼魚、布氏鯛幼魚、羅非魚等；蝦類主要有日本對蝦、羅氏沼蝦、中國明對蝦、南美白對蝦等。而不同品系間的南美白對蝦仔蝦耗氧率、窒息點的相關研究較少。本試驗以利洋1號和利洋2號南美白對蝦仔蝦為研究對象，研究其瞬時耗氧速率、瞬時耗氧量、窒息點、窒息臨界點以及昏迷臨界點等耐低氧指標，以期為選育耐低氧品系南美白對蝦種苗及育苗工作提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 試驗對象與條件

試驗用南美白對蝦來自于利洋1號和利洋2號兩個品系p7-p8與p12-p13階段的仔蝦，試驗用水經過化學試劑消毒、曝氣、沙濾、沉淀、陶氏過濾器設備處理，二次消毒后使用。選取正常發育的仔蝦暫養幾小時后開始試驗。試驗中定期使用Hach溶氧儀監測溶解氧，試驗3次重復，結果取平均值。試驗水溫27.0±0.5℃，水體20L。

1.2 試驗方法

試驗過程中仔細觀察蝦苗的活動狀況，按時抽取水樣進行測定，定時記錄水體的溶解氧，當第一只蝦昏迷作為昏迷臨界值（Coma Threshold-CT），當第一只蝦死亡時作為窒息臨界值（Suffocating Threshold-ST），50%蝦死亡時水體的含氧量作為窒息點（Suffocating point-Sp,mg/L）。當蝦苗靜臥瓶底，僅附肢和尾部間歇運動即視為處于昏迷狀態，當觸碰無反應時,則視為窒息死亡。定期測觀察仔蝦并且判斷仔蝦存活狀況，并定時記錄水體溶解氧以及時間。記錄對應的昏迷臨界值，窒息臨界點和窒息點。按照以上公式換算出瞬時耗氧量，以及瞬時耗氧率。最后擬合瞬時耗氧率和時間的曲線，瞬時耗氧量和瞬時耗氧率的關系曲線，以及瞬時耗氧率和溶解氧的關系曲線。

1.3 試驗公式

試驗結束后用濾紙吸干仔蝦體表水分，進行稱重以及量體長，耗氧量H按下面公式計算：

H=（C1-C0）/（t*n）★1000★V, 單位（mg/h·尾）

式中C1是結束時溶解氧（mg/L），C0是初始溶解氧（mg/L），t為期間溶解氧變化所需時間（h），n為一個玻璃瓶中蝦的數量（尾），V為玻璃瓶容量單位L。

耗氧率v=H / w, 單位（mg/h·g），式中w為每尾蝦平均重量（g）。

2 結果與討論

2.1 利洋仔蝦瞬時耗氧速率與時間（t）的關系

利洋1號瞬時耗氧率與時間的關系結果見圖1圖2，由圖1-圖2可知，利洋1號和利洋2號仔蝦瞬時耗氧率隨著時間的增加呈指數下降。擬合方程分別是：v1= 0.27524exp（-0.1761t）+0.03862, R2=0.9834和v2=0.031+0.277exp（-0.151t）, R2=0.98017。

2.2 利洋仔蝦瞬時耗氧率與瞬時耗氧量的關系

利洋1號瞬時耗氧量與瞬時耗氧率的關系結果見圖3圖4，由圖3～圖4可知，利洋1號和利洋2號仔蝦瞬時耗氧量和瞬時耗氧率呈顯著正比關系（p＜0.001）。利洋1號和利洋2號仔蝦平均耗氧率分別為0.169mg/h·g和0.163mg/h·g。以及平均耗氧量為 0.00520mg /h·尾和0.00280mg/h·尾。

2.3 利洋仔蝦瞬時耗氧率與溶解氧（DO）的關系

利洋1號p12-p13階段仔蝦的耗氧率和溶氧的關系結果見圖5圖6。由圖5～圖6可知，仔蝦耗氧率和溶氧的方程分別為v1= 0.0415x+0.0603, R2=0.9024和v2=0.0379x+0.0807, R2=0.8296。p12-p13階段利洋仔蝦的耗氧率隨溶解氧含量降低而降低，屬于順應型呼吸類型。Fry等人認為順應型呼吸型是溶氧越低瞬時耗氧率越低。張磊磊發現太湖一號和日本對蝦雜交仔蝦屬于順應型呼吸。崔瑩等測定的南美白對蝦（3.14～3.27cm）瞬時耗氧率與溶解氧成反比，不屬于順應型呼吸型。以上研究說明，同一物種的不同試驗階段，瞬時耗氧率與溶氧的變化情況不同。順應型呼吸可能是仔蝦對低氧的一種適應，即通過減少瞬時的耗氧率來阻止進一步的氧氣的減少的一種環境突變的適應策略。

圖1 利洋1號瞬時耗氧率與時間的關系

圖2 利洋2號瞬時耗氧率與時間的關系

圖3 利洋1號瞬時耗氧量與瞬時耗氧率的關系

圖4 利洋2號瞬時耗氧量和瞬時耗氧率的關系

圖5 利洋1號p12-p13階段仔蝦的耗氧率和溶氧的關系

圖6 利洋2號p12-p13階段仔蝦的耗氧率和溶氧的關系

2.4 仔蝦的昏迷臨界點、窒息臨界點與窒息點的差異

利洋1號與利洋2號p7-p8階段仔蝦的昏迷臨界點（CT）、窒息臨界點（SP）以及窒息點（SP）結果見表1。由表1可知在p7-p8階段，大約經過6h左右，利洋1號和利洋2號仔蝦第一尾仔蝦昏迷時靜伏水底。昏迷點分別是1.43mg/L和1.40mg/L。接著過了大概0.5h至2h第一尾蝦開始死亡，此時窒息臨界點分別為1.28mg/L和1.03mg/L。在7～8h后，水體溶氧分別達到0.58mg/L和0.48mg/L時半數蝦死亡達到窒息點。利洋1號比利洋2號窒息點高，利洋2號更耐低氧。

利洋1號與利洋2號p12-p13階段仔蝦的昏迷臨界點（CT）、窒息臨界點（SP）以及窒息點（SP）結果見表2。由表2可知在p12-p13階段，利洋1號和利洋2號仔蝦經過6時30分左右仔蝦開始靜伏水底開始昏迷，昏迷點分別是1.5mg/L和1.65 mg/L。約7h后，兩品系仔蝦窒息點分別為0.795mg/L和0.695mg/L。利洋1號窒息點比利洋2號窒息點高，表明利洋2號更耐低氧。

3 討論與分析

3.1 利洋1號和利洋2號仔蝦耗氧量、耗氧率、昏迷點及窒息點差異分析

本試驗發現，利洋1號和利洋2號仔蝦瞬時耗氧量和瞬時耗氧率呈顯著正比關系（p＜0.001）。窒息點的高低與耗氧率（耗氧量）有正相關性，即高耗氧率（高耗氧量）導致仔蝦窒息點高，低耗氧率（低耗氧量）導致仔蝦窒息點低。利洋1號和利洋2號仔蝦由昏迷點達到窒息點的時間約7～8h。

研究還發現利洋2號仔蝦（p12-p13階段）平均耗氧率、平均耗氧量均低于利洋1號平均耗氧率、平均耗氧量。利洋1號和利洋2號仔蝦（p12-p13階段）平均耗氧率分別為0.169 mg/h·g和0.163mg/h·g；平均耗氧量分別為0.00520 mg/h·尾和0.00285 mg/h·尾。表明了利洋2號仔蝦耐低氧能力強于1號仔蝦耐低氧能力。

較高的平均耗氧率意味著會加速消耗水體溶氧，耗氧量增大，導致達到窒息點的時間相對于低的耗氧率要更快，即不耐低氧。為何不良水體環境如溫度不適、鹽度不適、pH不當、水體有機質濃度過高等，均能加速到達窒息點而死亡？因為不良環境導致高的耗氧率，而高的耗氧率導致蝦苗應激增大，其活動增加，有更多的能量消耗，其新陳代謝加快，水體溶解氧量快速變少，若氧氣不足容易蝦缺氧死亡。同時新陳代謝加快還會使得排泄物增多，水質變差會更快，產生惡性循環。反之，低的耗氧率意味著更耐低氧。

表1 利洋1號與利洋2號p7-p8階段仔蝦的昏迷臨界點(CT)、窒息臨界點(ST)以及窒息點(SP)

3.2 利洋仔蝦在不同發育階段昏迷點、窒息點及安全溶氧濃度差異分析

研究發現不同發育階段其窒息點存在差異，p7-p8階段利洋1號和利洋2號仔蝦，昏迷點分別是1.43mg/L和1.40mg/L。而在p12-p13階段，利洋1號和利洋2號仔蝦昏迷點分別為1.50 mg/L和1.65mg/L。較早發育階段的仔蝦（p7-p8階段）耐低氧能力高于較晚發育階段的仔蝦（p12-p13階段）耐低氧能力，其規格越大耐低氧能力越低，這與陳琴研究南美白對蝦研究結果一致。利洋1號在p7-p8階段仔蝦的安全溶氧濃度大于1.43 mg/L，利洋2號p7-p8階段仔蝦的安全溶氧濃度大于1.40 mg/L。在p12-p13階段仔蝦，利洋1號的安全濃度大于1.5mg/L，利洋2號大于1.65mg/L。顯然只要溶氧不低于1.65mg/L利洋兩種品系仔蝦均處于安全狀態。

表2 利洋1號與利洋2號p12-p13階段仔蝦的昏迷臨界點（CT）、窒息臨界點(ST)以及窒息點(SP)

3.3 利洋仔蝦和已報道南美白對蝦仔蝦耗氧率、窒息點的差異分析

本試驗發現利洋1號和利洋2號仔蝦都屬于順應型呼吸類型，即溶氧量越低耗氧率越低。利洋仔蝦具有耐低氧能力強，可能是它對某種不良環境變化的一種適應，即減少自身耗氧量以及耗氧率來應對水體缺氧環境。利洋1號p12-p13階段仔蝦的窒息點為0.795mg/L，利洋2號在該階段仔蝦的窒息點為0.695mg/L，均低于陳琴已報道值（南美白對蝦p12-p13階段仔蝦的窒息點為0.947mg/L）。對比發現利洋1號和利洋2號苗屬于低耗氧品系，具有較強耐低氧能力。

3.4 利洋蝦苗特色

首先，利洋種蝦是一代種蝦。在此基礎上經過長期的人工育種及基因選育技術的篩選，蝦苗的生長速度快、抗病能力強、耐低氧能力強。其次管理體系嚴格，如，利洋的親蝦幼體均經過PCR技術進行包括WSSV、BPV、IHHNV、TSV、HPV、YHV的病毒檢測。及對蝦苗的全程質量監督，每一批蝦苗經過層層檢測合格后方可出苗。最后利洋育苗技術的成熟，全程使用天然餌料，合理飼喂營養全面的多種植物性活餌以及動物活餌，蝦苗胃腸飽滿，富含脂肪滴，身體健壯，抗應激能力強。尤其是利洋在國內首創的生態育苗體系，整個育苗過程不使用抗生素，確保優質蝦苗。總之，利洋以正確的養殖理念為前提，始終堅持以優秀的種蝦為戰略制高點、加之以嚴格的管理體系、以及先進的育苗技術為支撐。才得以保證每一批的蝦苗質量優秀，最終幫助養殖戶養成高產、穩產、養殖周期短的大規格蝦，實現雙贏的局面。（參考文獻略）